猴免疫缺陷病毒SIV核心蛋白基因在大肠杆菌中表达的研究
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R136.4

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中国医科院青年基金


Studies on the Expression of SIV Core P27 Gene inE . coli
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    摘要:

    应用多聚酶链反应(PCR),直接从SIV感染的猴艾滋病(SAIDS)模型猴的外周血淋巴细胞总DNA中扩增出767bp的SIV核心蛋白P27基因片段。扩增产物经EcoRI及SalI双酶切后,克隆入相同酶切的表达质粒pBV220中,获得含SIV核心蛋白基因片段的重组质粒pBVSG,并进行DNA序列分析。用该重组质粒转化大肠杆菌DH5a经筛选、增殖及42℃温度诱导,SDS-PAGE表明外源基因表达蛋白含量占菌体总蛋白14.5%,Western-blot证实表达产物能被SIVP27单克隆抗体及SAIDS模型猴血清中特异性抗体识别。

    Abstract:

    IV core P27 gene was directly amplified from the monkey's PBMCinfected with SIVmac by method of PCR. The P27 gene was digestedwith EcoRI and SalI, and inserted into the EcoRI and Sall site of the exp-ression vector PBV220. The recombinant plasmid named PBVSG was vertifiedby DNA sequencing. When the expression plasmid PBVSG was transferred toE.coli DH5a and then induced at 40 , a product with the expected molec-ular weight ( 27KD ) was observed, which was approximately 14.5%of the total bacterial proteins. By Western blotting, the expressed proteinretained the reactivity with the SIV P27 monoclonal antibody and thespecific anti-SIV serum antibody in SAIDS model monkeys.

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    引证文献
引用本文

施慧君,何伏秋,吴小闲.猴免疫缺陷病毒SIV核心蛋白基因在大肠杆菌中表达的研究[J].中国实验动物学报,1995,(1).

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