唐鱼卵黄蛋白原的ELISA检测方法的建立
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X171.1

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珠海市科技计划项目,广东省科技计划项目?


Development and Application of an ELISA Technique for Detecting Tanichthys albonubes Vitellogenin
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    目的 探索建立唐鱼卵黄蛋白原的ELISA检测方法.方法 以卵黄脂磷蛋白(Lv)抗血清为抗体,以纯化的Lv作为抗原建立间接酶联免疫吸附反应(ELISA)方法检测雄性唐鱼(Tanichthys albonubes)整体匀浆液中的卵黄蛋白原(Vtg).结果 利用ELISA方法测定了经17-β雌二醇(E2)和不同浓度DDTs暴露21 d诱导的雄鱼整体匀浆液中的Vtg含量,可以直接在1块或在不同的酶标板上准确地进行比较.经0.055 mg/mL E2诱导的雄鱼整体匀浆液中Vtg含量为4148.33μg/g;当暴露DDTs浓度为0.0275、0.0137和0.0067 mg/mL时,雄鱼整体匀浆液中Vtg含量分别为1109.43、911.16和1322.79μg/g,与丙酮溶剂对照组462.79 μg/g比较差异存在显著性(P<0.05).结论 建立了唐鱼卵黄蛋白原的ELISA检测方法,本方法的检测灵敏度为8.1 ng/mL,批内误差为8.59%,批间误差为6.28%,工作范围为3.26~209.25 ng/mL.在该范围内,标准曲线具有良好的线性和重复性.

    Abstract:

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引用本文

姚静,方展强.唐鱼卵黄蛋白原的ELISA检测方法的建立[J].中国实验动物学报,2010,(3).

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