摘要:目的 构建人β-synuclein基因的原核表达载体,分析其在大肠杆菌中的表达.方法 从人脑组织中提取总RNA,用RT-PCR方法获得人β-synuclein基因,克隆至pCUm-T载体中,PCR筛选阳性克隆并测序.将酶切后的目的片段克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,转化大肠杆菌BL21.IPTG诱导后,经SDS-PAGE电泳分析目的蛋白的表达.结果 RT-PCR扩增出人β-synuclein基因,将其亚克隆至pGEX-6P-1构建成重组表达质粒,并在BL21中表达了β-synuclein蛋白.结论 成功构建人β-synuclein的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达了人β-synuclein融合蛋白,为进一步研究β-synuclein在帕金森病中的作用奠定了良好的基础.
