摘要:中国实验动物学会常务理事、《中国实验动物学报》编委、中国农业大学教授陈德威先生因病医治无效 ,于 2 0 0 0年 3月 3日在京逝世 ,享年 6 4岁。陈先生 1 96 0年毕业于北京农业大学兽医系 ,1 992年晋升为研究员 ,博士生导师 ,享受国务院特殊津贴。四十年来 ,长期从事兽医微生物学、免疫学与实验动物学的科研、教学与生产工作。曾对鸡毒支原体的分子生物学、诊断与净化、鸡白血病的监测与净化、鸡葡萄球菌病的病原分型与疫苗、动物大肠杆菌病的病原分型与防制、ＳＰＦ鸡的微生物学监测、实验用小型猪选育与医学模型以及非免疫鸡的建立与维持…

摘要:目的　建立在猫肾F81 细胞中犬细小病毒原位PCR的检测方法。方法　在猫肾F81 细胞上感染犬细小病毒 ,设计特异性引物 ,用直接原位PCR法在染毒 12h ,2 4h ,48h细胞片上检测出犬细小病毒 ,并与常规免疫组化的方法进行了比较。结果　在染毒 48h的细胞片上 ,用阳性记分法将两种检测方法得到的阳性细胞进行统计比较 ,差异极显著 (P <0 .0 0 1) ,用原位PCR法所得出的阳性率高。结论　原位PCR法检测犬细小病毒具有敏感性高和组织定位的优点

摘要:与血压调控有关的如ｒｅｎｉｎ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎ转基因鼠模型出现高血压 ,用于研究ＲＡＳ(ｒｅｎｉｎａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎｓｙｓｔｅｍ)中各成分致高血压的作用 ,以及相互关系 ,发现人ｒｅｎｉｎ转基因大鼠出现高血压 ,而转基因小鼠不出现高血压 ,只有ｒｅｎｉｎ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎ联合转基因小鼠才出现高血压。与动脉粥样硬化与脂质代谢有关的如ＬＤＬ受体转基因动物可增强ＬＤＬ的清除 ;ａｐｏＥ3基因转基因鼠可增强ＬＤＬ的清除 ,而突变的ａｐｏＥ则诱发高脂血症 ,ａｐｏＥ4与ａｐｏＥ7转基因鼠…

摘要:曾经参与克隆小羊多利的英国ＰＰＬ医疗公司 2 0 0 1年 4月 11日宣布 ,该公司研究人员成功地培育出了 5只转基因克隆猪。这是人类首次培育出转基因克隆猪 ,标志着异种器官移植研究又向前迈进了重要的一步。这 5只小猪于 3月 2 9日诞生在ＰＰＬ公司的美国弗吉尼亚州布莱克斯堡的分公司里 ,ＰＰＬ公司发表的新闻公报说 ,5只小猪现在都很健康 ,它们是使用经过基因改造的猪细胞克隆出来的 ,ＤＮＡ里含有一个外源标志基因。这些外来基因来自水母 ,为水母体内的发光蛋白编码 ,但在小猪体内没有任何实际用处 ,只是被研究人员用来证明他们有能力克隆…

摘要:中国科学技术协会第六次全国代表大会于 2 0 0 1年 6月 2 1日至 2 5日在北京隆重召开。代表全国各地区、各行业科技工作者的 94 7名代表和 12 8名特邀代表出席了本次大会。中国科协第一次邀请了香港和澳门的代表以及来自美国、英国、德国、日本等国的具有中国国籍的科技工作者参加了此次代表大会。开幕式由全国人大常委会副委员长、中国科协主席周光召主持。党和国家领导人江泽民、李鹏、朱镕基等出席了开幕式。中共中央总书记、国家主席、中央军委主席江泽民发表了重要讲话。此次大会的中心任务是 :高举邓小平理论伟大旗帜 ,团结和动员广大…

摘要:目的探讨被转入的人SR-AI基因的整合与复制情况及其对小鼠繁育的影响.方法采用类似系祖建系的方法,对人SR-AI转基因小鼠的2、3534、3560、3638、3639五个系列进行了繁育.并用PCR和Southermblot的方法,检测五个系列小鼠尾组织的DNA样品.结果五个系列小鼠共产仔431只,PCR检出阳性小鼠178只,阳性率为41.2%.在3639系的F1、F2、F3代及纯合子转基因鼠中PCR阳性率分别为47.8%、71.3%、75%和100%.结论人SR-AI基因在子代鼠中能稳定遗传,且对生殖和发育无明显影响.

摘要:目的建立人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和相应体外细胞系.方法将病理证实的人卵巢浆液性乳头状腺癌手术切除标本移植于SCID小鼠皮下,成瘤后行鼠间传代,取移植瘤细胞体外分离培养、传代和建系,并应用细胞、分子生物学手段对移植瘤和建系细胞进行一系列生物学特性检测.结果历时14个月传至5代,皮下移植瘤存活率为90%,持续6个月,体外建系(OVA-319)细胞生长稳定.镜下观察组织形态学和超微结构符合原肿瘤组织基本特征;染色体分布在12～46条之间,多为异倍体,显示人类肿瘤异常染色体;流式细胞术和RT-PCR技术分析原代、体内移植瘤和OVA-319细胞结果一致,表现为瘤细胞生长活跃、细胞周期分布相仿,MAGE-2基因在mRNA水平异常表达.结论人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和OVA-319细胞系为人类肿瘤的研究提供了良好的实验材料.

摘要:目的用辣根过氧化酶(HRP)逆行追踪技术探讨异种神经移植后神经纤维的再生.方法将多次冻融处理后的兔胫神经移植于大鼠坐骨神经,术后第2、4、6、8和10周,将HRP注人大鼠坐骨神经吻合部远侧端.结果移植术后第4周起在L4～5脊神经节见到HRP标记细胞,从第6周在腰段脊髓前角内见到标记细胞,其数量随术后存活期延长而增多.术后4周在移植神经内见少量再生神经纤维,6周后再生神经纤维穿过异种移植神经进入大鼠坐骨神经远侧端.结论自移植术后4周起,移植神经内已有再生纤维并部分恢复了轴浆流,证实了用HRP法可反映移植后神经纤维的再生情况.

摘要:目的建立检测Sendai病毒的RT-PCR方法并应用于活疫苗及其生产基质中Sendai病毒的检测.方法将Sendai病毒E17株接种9日龄鸡胚尿囊腔,72h后收集尿囊液,用于提取病毒RNA,并逆转录成cDNA,用两对针对Sendai病毒NP基因设计的外引物和内引物分别进行扩增.扩增产物克隆于T-载体,并测序.尿囊液按10倍倍比稀释,进行敏感性实验.将该方法用于检测乙脑减毒活疫苗和用于生产疫苗用的普通级乳地鼠肾中的Sendai病毒.结果外引物和内引物的PCR分别扩增出684bp和248bp的片段,外引物PCR产物的测序结果与Genbank报告的序列完全一致.敏感性实验结果表明,第一次PCR可检测到10-4病毒滴度,巢式PCR可检测到10-7病毒滴度.乙脑减毒活疫苗和乳地鼠肾的检测结果为阴性.结论建立检测Sendai病毒的RT-PCR方法具有很高的特异性和敏感性.

摘要:目的建立在猫肾F81细胞中犬细小病毒原位PCR的检测方法.方法在猫肾F81细胞上感染犬细小病毒,设计特异性引物,用直接原位PCR法在染毒12h,24h,48h细胞片上检测出犬细小病毒,并与常规免疫组化的方法进行了比较.结果在染毒48h的细胞片上,用阳性记分法将两种检测方法得到的阳性细胞进行统计比较,差异极显著(P＜0.001),用原位PCR法所得出的阳性率高.结论原位PCR法检测犬细小病毒具有敏感性高和组织定位的优点.

摘要:目的探讨接种人巨细胞病毒(Humancytomegalovirus,HCMV)是否引起Wistar大鼠、昆明种小鼠眼组织损伤.方法将HCMVAD169毒株经静脉接种Wistar大鼠和昆明种小鼠,观察动物眼部发病情况,原位杂交检测动物眼组织中的HCMVDNA片段.结果接种病毒后部分动物缓慢出现眼部发病,局部分泌物增多、浑浊甚至失明;经原位杂交于视锥、视杆细胞和角膜内皮细胞中检出HCMVDNA片段.结论HCMV可以感染动物眼组织,并引起动物发生眼病.

摘要:目的建立急性脑缺氧缺血的动物模型.方法采用足月妊娠小鼠(查到阴道栓后19.5d),用剖宫手术方法,暴露子宫,用止血钳阻断双侧子宫动脉血管,致使缺氧缺血后脑部发生病理改变.结果随着阻断子宫血管时间的延长,胎鼠的死亡率增高,两者具有直线正相关关系(P＜0.05).实验组胎鼠体重(出生至离乳)增长缓慢,胎鼠爬、翻身及对应激刺激等的运动发育明显迟缓,脑部的病理改变明显,与人的急性脑缺氧缺血的临床表现,脑部病理变化及其后遗症是相似的.结论采用小鼠做急性脑缺氧缺血的动物模型,脑缺氧缺血效果明显,本模型的建立,可用于人的急性脑缺氧缺血的病理学、生理学及其药物治疗等诸多方面的类比实验研究.

摘要:目的目前的虚寒证模型存在两个环节的不足一是可能未能在寒证的基础上达到寒邪伤阳而致虚;二是虚证上未达到"精气夺则虚”.本实验尝试通过加大造模量改进这一模型.方法雌性WistarⅡ级大鼠,按照动物体温分为对照组和虚寒证组.虚寒证用较典型的造模药物灌胃造模,但用量较大,时间较长.造模结束检测有关指标.结果与对照组比较,虚寒证组动物外观差,舌质淡嫩,明显腹泻,体重增长减缓,体温较低,食量减少,游泳时间缩短,受激排便增多.血浆cGMP含量、乳酸脱氢酶活性、肾脏指数、脾脏指数、肝脏指数、肾上腺指数显著增高,皮质醇含量、T含量、卵巢指数、血清乳酸含量显著降低,cAMP/cGMP比值,E2含量、E2/T比值、胸腺指数有降低趋势.血清IL-2含量、血清木糖吸收率、血清TT3含量无显著差异.结论本模型有程度较深的寒证表现,并出现虚证.

摘要:目的提高制备转基因动物的效率.方法着重对注射DNA的制备,高质量受精卵的获得,显微注射及胚胎移植各步骤中的主要影响因素进行了优化.结果移植后出生的小鼠经PCR及Sonthern-Blot检测,从最初的146只仔鼠中检测到2只阳性鼠,提高到由34只仔鼠中检测到10只阳性鼠,阳性鼠概率由1.4%基本稳定增加到30%.结论通过技术改良后,转基因效率得到明显提高,为从事转基因动物方面的研究建立了稳定的技术平台.

摘要:目的观察失血性休克后肠道损伤情况与过氧化反应和TNF、IL-6的变化.方法利用太鼠失血性休克模型(30mmHg、70min),在复苏后0、2、6、12、24、和48h检测血液和小肠组织的过氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)、TNF和IL-6含量,以及小肠的病理改变和肠道菌移位情况.结果大鼠血清MDA值在复苏后0～2h升高,SOD活性多数时间点均升高;小肠MDA值在0～24h升高,SOD活性0～12h降低.血清TNF含量在6～48h升高;小肠在0～12h升高.IL～6含量无明显变化.小肠粘膜在复苏后2h有明显的上皮脱落,6～12h,可见细菌侵入粘膜层,6～48h,在肠系膜淋巴结等脏器中检出肠道菌.结论大鼠失血性休克后肠粘膜SOD合成能力的降低或活性抑制可能是加重局部损伤的机制之一.在休克复苏早期TNF值的升高与肠道内该因子的大量释放有关.

摘要:20 0 0年 4月初 ,武汉市某小型养鸡场的雏鸡一直在室内离地 5 0ｃｍ网架上饲养 ,2月龄时 ,将其开放饲养到室外已消毒的土壤地面的运动场 ,2ｄ后 ,就有少量雏鸡发生以拉血便为主要症状的疾病 ;发病 1- 2ｄ后 ,有 5 0 %以上的病雏死亡。而没有开放的两车间内的小雏鸡没有发生此病。1　临床症状　病雏精神沉郁 ,羽毛蓬松 ,闭目 ;食欲、饮欲减退或废绝 ;粪便带血 ,大多为全血 ,肛门附近不见粪便附着 ,偶尔见羽毛上带有少量血迹。病鸡消瘦 ,畏寒 ,病末发生神经症状 ,1～ 2ｄ后死亡。2　病理剖检　以肠道病变为主 ,肠系膜严重充血 ,小肠、盲肠肿胀…

摘要:目的探讨外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对晚期周围神经再生的作用.方法50只SD大鼠随机分治疗组、对照组各25只,切断右侧坐骨神经,12周后予以修复,修复术后每日分别给予bFGF和生理盐水,行神经电生理和组织学检查.结果治疗组和对照组修复处远段神经均有不同程度再生,4周时已可见到再生轴突,且治疗组多见.计量分析治疗组运动神经传导速度、神经肌肉动作电位幅值、髓鞘厚度、再生轴突直径和截面积明显优于对照组.治疗组与对照组相比,差异有显著性.结论bFGF能促进晚期周围神经再生.

摘要:目的研究人发角蛋白人工腱(humanhairkeratinartificaltendon,HHKAT)材料在体内的可降解性及其生物相容性.方法对12只日本大耳白兔随机分组,在脊旁肌埋藏不同处理时间的人发角蛋白人工腱试件F及Z,用正常人发O做对照,分别在2、6、12、24周取材,观察人发角蛋白的降解吸收过程及其周围的组织反应.结果动物植入实验中发现不同时间处理的材料其降解速度不同,其中降解最快的F组在24周已完全吸收,而Z组在24周只有部分降解,O组未见降解.HHKAT及人发在肌肉组织内无明显的炎症排斥反应,随着HHKAT材料的降解吸收,其周围的组织反应逐渐降低.结论本研究表明人发角蛋白人工腱材料具有良好的生物相容性,在体内能够被降解吸收,可根据不同的需要调节其降解速度,是良好的肌腱替代材料.

摘要:国家实验动物质量检测普通级实验动物体外寄生虫的方法有 5种以上[1 ,2 ] 。但是 ,许多检测单位常用透明胶带粘取法 ,我部对沈阳地区 14个单位 2 2 6只实验动物检查过程中用透明胶带粘取法与尸体静置法对比检测 ,现将结果报告如下 :1　材料和方法1.1　材料　实体显微镜 ,光学显微镜 ,载玻片 ,透明胶带 (2ｃｍ宽 )等。1.2　实验动物　沈阳地区 14家送检的 2 2 6只小体型动物 :大鼠、小鼠、豚鼠和地鼠。1.3　方法1.3.1　透明胶带粘取法　方法见国家标准。1.3.2　尸体静置法　将动物处死 ,分别放入平皿器中 ,放置 2～ 3ｈ后 ,解剖显微镜下检查…

摘要:目的阐明新型IRM-2近交系小鼠G-显带核型和自发畸变率.方法采用小鼠骨髓制备和G-显带法.结果从20只小鼠的50个G-显带细胞中,10个G-显带细胞被选作模型分析.根据特有带型来识别各号染色体,描述了带型特征,测量了相对长度和标准差,绘制了模式图.对于1、6与X,4与5,9、13与14等带型较相似的染色体提出了一些识别要点.此外,用常规Giemsa染色分析了1200个中期细胞,发现染色体断裂为0.33%,无着丝粒畸变和不平衡易位均为0.08%,自发畸变率很低.结论新型IRM-2近交系小鼠G-显带的识别为结构异常、辐射效应、肿瘤研究和基因作图提供了科学依据.

摘要:目的为进一步深入研究Smad3基因在脊椎动物发育中的重要作用,对Smad3基因剔除小鼠进行保种和繁育研究.方法采用基因剔除杂合子小鼠进行保种,通过PCR和Southern杂交对杂合子小鼠交配所产生的后代进行基因型鉴定,纯合子小鼠和野生型小鼠用于表型分析,杂合子小鼠用于留种和繁殖生产.结果采用PCR方法对278只子代小鼠进行了基因型鉴定,83只为野生型,133只为杂合子,62只为纯合子.结论Smad3基因剔除突变能稳定遗传.采用杂合子小鼠保种,子代小鼠三种基因型比例符合孟德尔遗传定律.

摘要:目的建立雌激素替代治疗动物模型,观察其血清中一氧化氮(NO)含量的变化.方法取40只雌性大鼠切除双侧卵巢,随机分成四组A组假手术组;B组单纯去卵巢组;C组去卵巢+雌激素治疗组(隔日肌注苯甲酸雌二醇5μg);D组去卵巢+雌孕激素治疗组(隔日肌注苯甲酸雌二醇5μg,黄体酮1mg),两月后检测血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)及NO2-/NO3-的含量.结果(1)卵巢切除后血清E2、P和NO2-/NO3-浓度显著降低;(2)雌激素治疗组和雌孕激素治疗组血清E2和NO2-/NO3-的含量及雌孕激素治疗组血清P的含量,略低于A组而显著高于去卵巢组.结论所建立的动物模型可以模拟绝经及绝经后的小剂量雌激素替代治疗,动物模型体内雌激素浓度与具有抗衰老作用的NO浓度呈相互平行的变化关系,雌激素可能通过NO达到延缓衰老作用.

摘要:目的采用体外无血清培养方法,研究雌激素(E2)对恒河猴睾丸Leydig细胞睾酮分泌的影响.方法恒河猴睾丸活体组织,经胶原酶消化,BSA密度梯度重力沉降分离细胞,得到的Leydig细胞置二氧化碳培养箱培养,收集培养液,应用放射免疫测定法测定培养液中的睾酮含量.结果不同剂量的睾酮前身物孕烯醇酮、孕酮和17α-羟孕烯醇酮都能促进睾酮的含量升高,其中以17α-羟孕烯醇酮的作用最为显著;当孕烯醇酮、孕酮和17α-羟孕烯醇酮分别与E2合并应用时,有明显地抑制作用,同样以17α-羟孕烯醇酮的抑制作用最为显著.结论E2抑制恒河猴Leydig细胞睾酮的分泌是由于影响了3β-羟类固醇脱氢酶、17α-羟化酶以及17,20-碳裂酶的活性所致.