
- 浏览排行
- 引用排行
- 下载排行
2005(1).
摘要:ChenZ等人在美国病毒学杂志上报道了基因重组修饰痘苗病毒 (modifiedvacciniavirusAnkara ,MVA)表达SARS病毒S蛋白引起针对S蛋白受体结合区的保护性抗体的研究。MVA因为不含病毒基因组中的宿主基因而不能在人体内和绝大多数哺乳动物细胞中复制 ,但MVADNA基因表达没有受影响 ,能够在人体细胞内能合成早期和晚期基因。MVA已经针对天花作了上亿次应用于大规模的疫苗试验和临床试验 ,在使用过程中没有发现副作用 ,即使在高危病人或实验免疫缺陷的猴子中。在该研究中 ,作者将全长SARS -CoV包膜S蛋白基因转入了MVA缺失III区基因。…
2005(1).
摘要:美国哥伦比亚大学的BingGong等研究发现磷酸二酯酶 4的抑制剂 Rolipram ,能够持久的改善Alzheimer sDisease (AD) [APP(K6 70N ,M6 71L) ;PS 1(M14 6V) ]转基因小鼠模型的突触和记忆缺陷 ,但没有改变 β淀粉样沉积的病理改变。实验结果提示 ,Rolipram可能通过提高环磷酸腺苷 (cAMP)的水平 ,稳定突触间信号传导 ,增加对 β淀粉样沉积的毒性作用。Rolipram引起的AD转基因小鼠行为学改善 ,作用持续停药后 2个月之久 ,并且在老龄鼠中作用更明显。除rolipram外 ,其它的磷酸酯酶抑制剂也可能对抗AD中淀粉样蛋白的毒性作用 ,并可能延缓…
2005(1).
摘要:日本实验动物学会第 5 2届年会将于 2 0 0 5年 5月 18- 2 0日在日本东京召开 ,大会讨论主题包括动物福利问题、3R原则、环境改善、实验动物及动物实验的重要性等。同时举办“实验器材、商品展示会”等及其他实验动物专题研讨会。地点 :TOWERHALLFUNABORI ,4 - 1- 1,FunaboriEdogawa ku ,Tokyo ,Japan 134- 0 0 91注册费 :12 ,0 0 0日元 (会前 ) ,14 ,0 0 0日元 (会间 ) ;社交集会 :4 ,0 0 0日元 (会前 ) ;5 ,0 0 0日元 (会间 ) ;欢迎晚宴 :4 ,0 0 0日元。参会学者可以进行口头或海报论文交流 ,摘要请在 2 0 0 5年 1月 18日前发至大…
2005(1).
摘要:美国实验动物学会主办的实验动物学研究杂志 [ILAR ,4 6 (1) ]发表了“生物防护时代的感染性疾病研究”专题。该专题再次聚焦美国自从反恐战争以来对生物防护问题的研究结果 ,包括为感染性疾病的制定的一些新的规章制度、研究预算、生物安全、公共关系和研究资源等 (http : www .national-academies .org ilar)。文章题目包括 :1 生物防护研究的潜在费用 ;2 规章制度的选择 ;3 生物恐怖时代感染性疾病研究问题的管理 ;4 生物防护时代非人灵长类动物资源的需求 ;5 选择性因素动物研究对实验设施的要求 ;6 生物污染研究设施使用问题 ;7…
2005(1).
摘要:地点 :希腊的雅典时间 :2 0 0 5年 5月 30 - 31日组织者 :雅典生物医学研究基金会实验外科中心 (www .bioacademy .gr)、国际实验动物科学家联合会(ICLAS)和希腊生物医学和实验动物学会 (HSBLAS)联合举办。目的 :召集来自东地中海区域各国科学家交流实验动物科学进展情况。主题 :1实验动物饲养 ;2实验动物设施管理 ;3职业卫生和安全 ;4转基因动物的饲养要求 ;5健康监测和对结果的阐释 ;6教育培训 ;7伦理学问题 ;8“东地中海区域各国实验动物状况”圆桌会议。会展及征文 :会议期间将举办会展 ,有意参加者请将以Word形式的电子版发送给举…
孙明 , 李纯铃 , 赵铁柱 , 王传彬 , 陈西钊 , 田克恭 , 王宏伟
2005(1):3-6.
摘要:目的 检测和鉴定A型、H5亚型禽流感病毒 (AIV) ,研发一种高效实用的检测手段。方法 根据Ming ShiuhLee报道的文献设计、合成引物 ,采用反转录和PCR一步法对A型、H5亚型禽流感病毒cDNA进行扩增和电泳鉴定 ,组装成禽流感病毒RT PCR试剂盒 ,对H1~ 15亚型AIV参考株、38份AIV国内分离株进行检测试验。结果 建立了A型、H5亚型禽流感病毒RT PCR检测方法 ,并在此基础上组装试剂盒 ,用A型试剂盒检测时 ,全部AIV毒株均为阳性 ,能检测 1 10 2 4血凝单位禽流感病毒 ;用H5亚型试剂盒检测时 ,仅有H5亚型AIV参考株和 19株H5亚型AIV分离株呈阳性 ,其余H1~H4、H6~H15参考株和H7、H9分离株以及 1株H5分株均为阴性 ,能检测1 6 4血凝单位禽流感病毒。 2种试剂盒对实验感染鸡病料检出率均为 10 0 %。结论 研制的AIVA型、H5亚型RT PCR试剂盒具有特异性强、敏感性高、稳定性和重复性好的特点。
多海刚 , 赵铁柱 , 孙明 , 王传彬 , 王宏伟 , 陈西钊 , 冉多良 , 田克恭
2005(1):7-10.
摘要:目的 表达H7N2亚型禽流感病毒 (AIV)HA1基因 ,用于感染H7亚型禽流感病毒抗体的检测和HA1蛋白功能研究。方法 采用RT PCR方法对H7N2亚型AIVHA1基因进行扩增 ,将PCR产物克隆于pGEM T Easy载体 ,将该基因插入pGEX 4T 2中构建HA1基因原核表达载体 ,转化BL2 1大肠杆菌后 ,在IPTG诱导下表达HA1蛋白 ,Westernblot鉴定表达HA1蛋白。电洗脱方法纯化表达HA1蛋白 ,建立间接ELISA方法 ,对感染AIVH7、H9、H5亚型AIV阳性血清进行检测。结果 成功克隆H7N2亚型AIV的HA1基因 ,其核苷酸序列长度 96 6bp ,编码 32 2个氨基酸残基。构建HA1基因原核表达载体在大肠杆菌内表达出约 6 1× 10 3的HA1融合蛋白。Westernblot和ELISA方法鉴定表明 :表达HA1蛋白与感染H7亚型AIV鸡血清有反应 ,与H5、H9亚型AIV阳性血清没有反应。结论 本研究在大肠杆菌中成功表达了H7N2亚型AIVHA1基因蛋白 ,具有与感染H7亚型AIV阳性血清反应原性 ,不与H5和H9亚型AIV感染阳性血清发生反应。
王传彬 , 孙明 , 赵铁柱 , 遇秀玲 , 陈西钊 , 王宏伟 , 田克恭
2005(1):11-15.
摘要:目的 克隆测定国内具有代表性的禽流感病毒 (AIV)的非结构 (NS)蛋白基因核苷酸序列 ,分析其同源性和等位基因类型 ,为进一步探索禽流感NS蛋白抗体监测方法奠定基础。方法 经RT PCR扩增了国内 3株H9N2、2株H5N1、2株H7N2亚型AIV分离株的NS蛋白基因 ,并把扩增的基因片段克隆到pGEM T载体中测序 ,将测序结果与GenBank中的核苷酸序列进行同源性比较 ,绘制基因进化树。结果 经测序获得了各AIV分离株NS基因的完整编码序列。同源性分析表明 ,3株H9亚型AIV的NS基因之间的同源性为 96 %~ 98% ;两株H5亚型AIVNS基因同源性为 91 6 % ;两株H7亚型AIV的NS基因同源性为 98 9%。H5和H9亚型分离株的NS基因之间的同源性均高于 90 % ;而H7N2亚型分离株与其它两种亚型分离株的NS基因同源性约为 6 0 %~ 70 %。在AIVNS基因系统发育进化树中 ,H5、H9亚型分离株都处于等位基因A群内 ;3株H9亚型分离株的进化关系较近 ,与香港、广东的部分H5N1病毒株起源相同 ,而 2株H5病毒的NS基因则处于不同分枝内 ;2株H7亚型分离株的NS基因都处于等位基因B群内 ,进化关系较近。结论 这 7株国内AIV分离株的NS基因之间的同源性差异较大 ,约为 6 0 %~ 99% ,且包括A、B两种类型的等位基因
2005(1):16-19.
摘要:目的 检测Cx4 3在人类和小鼠的胚胎心脏的表达 ,了解该基因在心脏发育过程中的表达规律。方法 选取人类 6~ 18孕周正常胚胎或胎儿心脏 6 3例 ,小鼠孕龄 9 5~ 16 5d胚胎心脏 6 4例 ,采用免疫组化法显示Cx4 3基因在心脏的表达。结果 早期人类胚胎心脏中 ,Cx4 3在心室肌中没有表达 ,心房肌表达微弱 ,原始小梁网中表达很高 ,随着胚胎发育 ,在心房和心室的表达逐渐增强 ,小梁网的表达在胚胎 13~ 14周达到高峰。室间隔的肌部表达量较弱 ,膜部室间隔不表达。房室瓣和大动脉根部管壁Cx4 3没有明显表达。除了在大动脉管壁表达不同 ,小鼠胚胎心脏表达规律与人类基本相同。结论 Cx4 3对于胚胎心脏的发育至关重要。
2005(1):20-22.
摘要:目的 通过向大鼠脑内单侧、双点、间隔注射 6 OHDA ,建立PD动物模型。方法 取SD大鼠 4 0只 ,随机分为实验组 35只和对照组 5只。实验组大鼠右侧黑质致密部和内侧前脑束注射 6 OHDA ,两次注射间隔一周 ,对照组大鼠注射人工脑脊液 ,观察经阿朴吗啡诱导后大鼠的行为及黑质DA神经元形态学变化。结果 ①实验组有 2 3只恒定左转鼠且旋转圈数 >2 10r 30min ,被认为是成功的PD模型 ,占 6 7 7% ;有 1只动物死亡 ,占 2 9%。②对PD大鼠模型的免疫组化研究发现 ,注射侧黑质区多巴胺神经元较健侧和对照组显著减少。结论 利用向脑内单侧、双点、间隔注射 6 OHDA制备PD大鼠模型 ,结果稳定可靠 ,动物死亡率低 ,为PD动物模型的建立提供了新方法。
2005(1):23-26.
摘要:目的 构建pCR○R3 1 p16真核表达质粒 ,并建立其稳定表达的NIH3T3细胞株。方法 将人的p16cDNA亚克隆至pCR○R3 1,将该重组质粒转化DH5α感受态大肠埃希菌 ,筛选阳性克隆 ,进行EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定及DNA测序 ,将已鉴定的pCR○R3 1 p16经脂质体介导转染至NIH3T3细胞中。结果 重组质粒双酶切后 ,出现约 80 0bp片段 ,提示p16cDNA片断已插入pCR○R3 1多克隆位点内 ,DNA测序显示p16cDNA按照正确方向和阅读框插入表达载体pCR○R3 1。通过pCR○R3 1 p16转染NIH3T3细胞 ,获得 10个G4 18抗性克隆 ,其中 2个为RT PCR阳性。结论 成功构建pCR○R3 1 p16真核表达载体并建立了其稳定表达的NIH3T3细胞株。为建立p16转基因鼠奠定基础。
谢夏阳 , 滕勇 , 孙强 , 徐平 , 孙怀昌 , 李厚达
2005(1):27-32.
摘要:目的 为解决SV4 0T转基因小鼠高发瘤难保种的问题 ,构建了两种含有SV4 0T不同区段的外源基因 :Rb结合域点突变的SV4 0T基因 (SV4 0T DRb)和无p5 3结合域的SV4 0T基因 (SV4 0T Dp5 3)。方法 利用分子生物学的基因克隆手段 ,将改造的SV4 0T基因片段克隆测序 ,最终将这两个改造后的基因克隆进乳腺特异性的真核表达载体p2 0 5C3中 ,运用雄原核显微注射法制备转基因小鼠。结果 利用PCR方法检测出 6只双阳性转基因 (同时检测到SV4 0T DRb和SV4 0T Dp5 3两种基因 )小鼠 ,为避免检测结果中假阳性的发生 ,应用Southern blot方法检测出 1只双阳性转基因小鼠。结论 本试验的结果证明 ,构建的两种含SV4 0T不同区段的策略是成功的 ,其建立的阳性转基因小鼠确实是弱化了SV4 0T转基因小鼠高发瘤的特性。
黎宗强 , 谢莉萍 , 陈敏 , 卢晟盛 , 江明生 , 卢克焕
2005(1):33-37.
摘要:目的 为食蟹猴实施人工授精和适时配种提供一种有效的测定排卵期的方法。方法 选择 4~ 6岁性成熟的雌性食蟹猴 30只 ,对其阴道涂片进行动态观察。结果与结论 食蟹猴阴道涂片中主要有角化上皮细胞、中层基底细胞、白细胞和细胞碎片等。分析结果说明 ,白细胞数各时期差异均具显著性 ;角化上皮细胞在月经前期和月经期没有差异 ,但其他各期差异具显著性 ;月经期和月经后期中层基底细胞数目变化差异不显著 ,但其他各期差异具显著性 ;月经前期和月经期的细胞碎片数目相似 ,但其他各期差异具显著性。各时期细胞成份变化规律是 ,角化上皮细胞从月经期到排卵期呈逐渐增加至最高 ,然后逐渐减少 ;而白细胞、中层基底细胞和细胞碎片则恰好相反。
杨建民 , 赵德明 , 郝永新 , 阚广捍 , 李宁 , 秦秀慧 , 马李颖
2005(1):38-41.
摘要:目的 通过对拟应用于航天飞船模拟试验的实验动物恒河猴进行朊病毒基因检测和分析 ,了解其朊病毒疾病易感性 ,进而为该试验所用实验动物质量提供朊病毒疾病的遗传数据。方法 根据已报道的猴朊病毒基因序列设计引物对 ,采用PCR方法扩增恒河猴朊病毒基因 ,将其克隆到T—VECTOR ,序列测定及分析。结果 序列测定及分析表明所克隆的恒河猴PRNP基因片段为 76 2bp ,该基因内无内含子 ,包含了PRNP完整编码区序列 ,编码 2 5 3个氨基酸的前体蛋白 ,推测其相对分子质量约 2 7 6× 10 3。与已报道的猴的相应序列作比较 ,核苷酸序列同源性分别为 95 %以上 ,其编码的氨基酸同源性均为 95 %以上。其中发现了已报道的多态性位点N97S ,H10 0N和未曾见报道的Q5 2E点突变位点 ,以及沉默突变位点A78G ,T84C ,T4 95C ,A5 6 4G ,C6 5 4 ,未发现与朊病毒敏感性连锁的氨基酸多态位点P10 2L、M12 9V ,N171S和E2 19K。结论 航天医学实验所用 17只恒河猴不存在朊病毒敏感性基因。
2005(1):42-44.
摘要:目的 建立蒙古长爪沙鼠标准G带染色体的核型 ,提供可靠的细胞遗传学的背景数据。方法 雌、雄各 3只成熟长爪沙鼠 ,外周血淋巴细胞培养 ,制片、镜下观察分裂中期的淋巴细胞。随机计数 10 0个分裂细胞中的染色体数目 ,确立长爪沙鼠体细胞染色体数目。选择 10个典型细胞测量染色体基本数据 ,建立标准G带核型。结果 长爪沙鼠染色体数为二倍体 ,4 4条染色体 ,可划分A、B、C、D、E、F六组。中着丝点区域的 11对 ,主要分布A、C、E三组中 ;近中着丝点区域的染色体 5对 ,主要分布B组中 ;端着丝点区域的染色体 5对 ,主要分布D、F组中 ;x为第 6号中着丝点染色体 ,y为端着丝点的区域染色体大小在 14号与 15号染色体之间。结论 长爪沙鼠染色体为 2n =4 4 =2× 11m +2× 5sm +2× 5t+(x)m +(y)t
2005(1):48-50.
摘要:目的 建立检测猴血B病毒的PCR方法。方法 根据MakotoH报道的引物 ,用PCR方法直接扩增猴血B病毒及扩增经Vero细胞培养后的猴血B病毒 ,扩增产物连于pGEM T载体。结果 这四对引物可同时对猴血B病毒及经Vero细胞培养后的猴血B病毒进行扩增 ,扩增结果一致 ,对扩增片段克隆测序的结果证实 ,其与美国猴B病毒E2 4 90株同源性为 10 0 %。结论 建立了从血样中直接检测猴B病毒DNA的PCR方法。
2005(1):55-58.
摘要:痛风是一种以血尿酸增高为特征的代谢性疾病 ,近年来随着我国人民生活水平的提高 ,高尿酸血症和痛风的发病率逐年上升 ,因而研制防治痛风和高尿酸血症的药物已成为当前医药界研究的热点 ,但实验动物模型的困难严重地影响着研究工作的开展。本文对目前常见的痛风和高尿酸血症实验动物模型进行了较系统的简介 ,并根据笔者的研究经验进行了简要评价 ,供致力于该方面研究的学者参考。
2005(1):59-63.
摘要:黑素皮质素受体 4 (MC4R)是人类中枢神经系统中参与调节肥胖症发生的重要因素 ,可调节动物的体重和采食量。自MC4R基因克隆以来 ,学者们对MC4R的结构 ,生理功能 ,调控 ,作用机制及其基因突变与体重的关系等方面进行了大量的研究。