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摘要:目的 研究cyclin A1基因变异对活体小鼠动物模型可能产生的影响.方法 饲养 46只cyclin A1基因变异的小鼠与25只同龄野生型小鼠9～24个月,进行比较观察.对发现病变部位的组织切片和对照标本采用HE染色和免疫组织化学染色方法检查.结果 cyclin A1基因变异鼠中,约有24% (11/46) 在头颈部发生了深溃疡状的皮肤病变,HE 染色结果显示病变及病变周围皮肤过度角化,皮脂腺增生明显.而25只野生型鼠中未见类似改变.以cyclin A1特异性抗体进行免疫组织化学染色结果显示,野生型小鼠的皮脂腺内可以观察到明显的染色,而cyclin A1基因变异小鼠标本中没有染色.结论 cyclin A1基因变异是导致本实验中观察到的小鼠发生头颈部皮肤病变的直接或间接原因.

摘要:目的 探讨胰岛素样生长因子-2(Insulin-like growth factor 2,IGF-2) 在骨骼畸形大鼠肢端软骨细胞内的表达规律.方法 应用光镜和透射电镜观测二(哑)英诱导的骨骼畸形大鼠足部软骨组织病理学改变.应用二(哑)英(1×10-8mol/L)干预体外培养的大鼠软骨细胞,采用RT-PCR及western 印迹杂交检测软骨细胞内的IGF-2 mRNA及蛋白质的表达水平.结果 15 μg/kg剂量的二(哑)英诱导实验组胎鼠出现多种畸形,内翻足、无尾畸形、腭裂等骨骼畸形发生率为33.3%.畸形胎鼠的肢端骨化中心发生带缩小,软骨细胞核内粗面内质网扩张,线粒体嵴紊乱.1×10-8mol/L剂量的二(哑)英使体外培养的大鼠软骨细胞内IGF-2 的mRNA及蛋白质的表达水平分别减少80%和60%(P＜0.05).结论 在二(哑)英诱导的骨骼畸形大鼠软骨细胞内IGF-2呈低表达状态.软骨细胞内IGF-2 的表达可能与骨骼发育密切相关.

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摘要:目的 建立H5N1禽流感病毒感染ICR小鼠的疾病动物模型.方法 将100 μL H5N1 禽流感病毒原液(EID50为105.37/0.2 mL) 鼻腔接种ICR小鼠,设生理盐水组、正常尿囊液组对照,接毒后14 d内每隔12 h观察一次,主要观测指标有临床体征、体重和体温变化、死亡率、病理变化、病毒分离和血清抗体检测 (ELISA方法).结果 被感染的ICR小鼠的病程可以划分为潜伏期 (第0～1天)、急性感染期 (第2～7天)、恢复期 (第8～14天),急性感染期表现出活动明显减少,弓背,反应性差,扎堆;接毒后第1天开始体温和体重下降,第6天体温和体重停止下降;接毒组ICR小鼠累计的死亡率为60%;急性感染期ICR小鼠的肺部病变最严重,表现为间质性肺炎,肺间质充血、水肿和淋巴细胞浸润,毛细血管扩张,上皮细胞变性、坏死、脱落,并有充血和单核细胞浸润;接毒后第1天至第8天可在小鼠的肺、脑、气管和心、肝、脾、肾分离到病毒;接毒后第6天从ICR小鼠血清中检测到抗体.结论 本实验室建立的H5N1禽流感病毒感染ICR小鼠的模型在临床表现、体重变化、死亡率、病理变化、病毒复制指标能达到禽流感病毒疾病模型的造模要求,符合人类禽流感感染疾病的基本特征.

摘要:目的 评价体外合成的A2E对猪视网膜色素上皮(RPE)细胞的细胞活力和生物学特性影响,为进一步研究A2E在RPE细胞相关疾病中的作用提供细胞模型.方法 利用全反式视黄醛和乙醇胺体外合成脂褐质荧光基团A2E.不同浓度的A2E(0,50,75,100 μmol/L)作用第3代体外培养的猪RPE细胞30,45,60,90 min,换10% FBS DMEM-F12培养液孵育24 h后 ,倒置荧光显微镜观察荧光强度,IPP 6.0软件灰度扫描定量荧光强度.采用MTT法检测A2E 作用细胞各个时间段的吸光度值,应用SPSS 11.0 软件包对数据进行统计学分析,评价A2E 的细胞毒性及RPE细胞活性.结果 A2E被RPE细胞摄取后主要分布于细胞核周围,具有自发荧光.MTT实验及荧光灰度扫描结果显示,不同浓度的A2E被细胞摄取后细胞活力和荧光灰度扫描结果不同,以50 μmol/L浓度A2E作用RPE细胞60 min时,细胞内荧光强度高同时细胞活力强.结论 体外培养的猪RPE细胞摄取体外合成的50 μmol/L A2E 60 min后细胞对A2E的摄取较多,A2E对细胞的毒性相对较低,该条件下进行A2E对离体猪RPE细胞的研究较好.

摘要:目的 筛查中国恒河猴Mamu-A*01基因,比较中国恒河猴和印度恒河猴的Mamu-A*01基因序列和功能是否相同.方法 PCR方法检测128只中国恒河猴,用特异性引物扩增Mamu-A*01基因,将PCR扩增后的产物克隆测序后与印度恒河猴的Mamu-A*01基因进行同源比对;酶联免疫斑点检测 (ELISPOT) 方法分别检测5只Mamu-A*01基因阳性和5只阴性恒河猴针对SIV、SHIV抗原肽p11C的特异性CTL反应.结果 共筛查出5 只Mamu-A*01基因阳性恒河猴 (3.91%),经测序分析后与印度恒河猴的同源性可达99.1 %.这5只均为SIV/SHIV感染恒河猴,其中四只SIV感染的猴的ELISPOT结果显示针对p11C的高频CTL反应,斑点数在500-1400/106 PBMCs之间,而另1只SHIV感染的恒河猴及5只阴性猴没有斑点出现.结论 中国恒河猴含有Mamu-A*01基因,基因频率有区域性差异,中国恒河猴的Mamu-A*01可提呈特异性抗原肽p11C.

摘要:目的 应用双向电泳和质谱技术研究5周龄小鼠晶体蛋白质组.方法 提取小鼠晶体总蛋白,进行固相pH梯度 (IPG) 等电聚焦双向电泳,胶体考马斯亮蓝R-250染色,使用P DQuest 7.30图像分析软件分析电泳图像.选择主要蛋白点胶上酶解,应用基质辅助激光解析电离飞行时间/飞行时间 (MALDI-TOF/TOF) 仪器进行串联质谱 (MS/MS) 鉴定. 结果 上样量为882 μg和190 μg时,分别检测370±41蛋白点 (n=3) 和57±5 个蛋白点 (n=3).高上样量能够较好地分离晶体低丰度蛋白,如念珠状纤维结构蛋白BFSP ;低上样量可很好地分离高丰度蛋白-晶体蛋白 (包括αA、αB;βA1～βA4;βB1～β B3;γA～γF和γS等).质谱鉴定得到1种细胞骨架蛋白和16种高丰度晶体蛋白.结论 双向电泳和质谱技术有效考察了晶体总蛋白质,为分析白内障形成过程中蛋白质的表达改变提供了新的方法和途径.

摘要:目的 研究裸项栉鰕虎鱼全人工繁殖及胚胎发育,为该鱼的实验动物化研究奠定基础. 方法 对胚胎和仔稚幼鱼各个发育期的连续取样,系统地观察了裸项栉鰕虎鱼各发育期的形态变化及生长特征.结果 水温25.8℃～26.5 ℃,裸项栉鰕虎鱼受精后约82h仔鱼开始出膜,初孵仔鱼全长1.42～1.73 mm,1d开口摄食,3d卵黄囊消失,23d第一背鳍形成,鳞片出现;33d全身被鳞;初孵仔鱼经97d发育成熟,繁殖周期约为36 d;雌鱼性腺成熟系数可达40%,个体相对生殖力达每克8193.5粒.结论 裸项栉鰕虎鱼具有个体小、性成熟早、生殖季节长、繁殖周期短、繁殖力强等特点,可进行室内规模化人工繁殖和培育.

摘要:目的 利用大鼠可逆性大脑中动脉栓塞模型 (MCAO),研究周期素依赖性蛋白激酶5 (cyclin depen dent kinase 5,Cdk5) 对视网膜母细胞瘤蛋白 (Rb) 的磷酸化作用与细胞凋亡的关系. 方法 线栓法制作大鼠MCAO模型,随机分为再灌注0、3、6、9、24 h组.通过免疫组化染色观察缺血侧大脑Cdk5和磷酸化Rb的数量和变化,TUNEL标记法检测凋亡神经元数量和变化,Western blot检测不同再灌注时间Cdk5蛋白水平的表达.结果 缺血侧Cdk5随再灌注时间增加而增加,24 h达到高峰;再灌注6 h出现磷酸化的视网膜母细胞瘤蛋白 (pRb),并随再灌注时间增加而增加,24 h达到高峰.缺血侧凋亡阳性细胞变化趋势与Cdk5基本一致.缺血侧Cdk5蛋白的表达随再灌注时间增加而增加,缺血对侧无明显变化.结论 大鼠局限性脑缺血再灌注损伤可以诱导Cdk5数量和激酶活性增加,通过底物磷酸化作用引起神经细胞凋亡.

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摘要:目的 测定中国地鼠线粒体DNA细胞色素b基因部分序列,分析其分子系统进化关系.方法 提取中国地鼠肝脏的总基因组DNA.设计合成特异引物进行PCR扩增,经检测进行测序.用Blast与GenBank中啮齿类其他常用实验动物的物种细胞色素b基因进行同源序列比较,分析其碱基组成及变异情况,并用邻接法、最大简约法、最小进化法构建了分子系统树,在分子水平上探讨中国地鼠和常用啮齿类实验动物的进化关系.结果 获得了中国地鼠线粒体Cyt b基因的部分序列,共 936 bp.结论 中国地鼠和金黄地鼠的亲缘关系最近,与小鼠、大鼠存在的差异相对大,与豚鼠的亲缘关系最远 ,与传统的分类地位基本吻合.

摘要:目的 建立雌激素受体β基因敲除小鼠子宫内膜异位症模型,为进一步研究雌激素受体β基因在子宫内膜异位症发生发展过程中的作用提供平台.方法 用外科手术方法对16只β基因敲除小鼠进行自体子宫移植,术后14 d、21 d取病灶组织进行光镜观察分析.结果 建模成功率达95.8%,可形成明显囊肿,内含囊液,囊肿内壁有子宫内膜上皮细胞生长.结论 应用本方法可建立稳定的子宫内膜异位症转基因小鼠模型,便于研究雌激素受体β亚型及其相关基因、蛋白在子宫内膜异位症发生发展过程中的作用机制.

摘要:目的 考察神经生长因子对视神经损害的疗效.方法 腹腔注射二硫化碳致视神经损害的大鼠模型,给药组球后注射或肌内注射神经生长因子,每天一次,每周6 d,共计3周 , 空白对照组球后注射等量生理盐水,于治疗前后测定大鼠模式翻转 (FREP) 和闪光视觉诱发电位.结果 球后注射高剂量组大鼠在治疗10 d和20 d时各波潜伏时比对照组有显著缩短, 而球后注射低剂量组和肌内注射高剂量组大鼠于治疗10 d时FVEP各波潜伏时也显著缩短,肌内注射低剂量组大鼠于治疗20 d时FEP的P1和P2波潜伏时也显著或非常显著缩短.结论 神经生长因子对大鼠视神经损害有明显的治疗作用.

摘要:阿尔采默氏病(Alzheimer's Disease,AD)是一种病因不明的脑部退行性疾病 .建立适合的AD动物模型对研究阿尔采默氏病的发病机理和相关药物筛选有十分重要的意义 .本文将目前常用的AD动物模型分为两类,即以模拟AD症状为主的动物模型和以模拟AD病理改变为主的动物模型,并对相关文献加以综述.

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