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2013, 21(2).
摘要:为了寻找能调节T细胞功能的分子,我们建立了一种单克隆抗体,实验证明其目标分子是CD98重链,同时后续实验显示抗CD98单克隆抗体能抑制纤连蛋白介导的细胞分布,但不影响氨基酸转运。而且混合淋巴细胞反应显示该抗体能显著抑制T细胞增殖反应;因此有望将本抗体用于T细胞介导的自身免疫性疾病的相关预防及治疗中。
2013, 21(2).
摘要:目的 建立BABL/C小鼠感染大肠杆菌O127的模型,并建立TGF-β1的荧光定量PCR方法检测方法。方法 通过灌胃的方式建立肠炎性小鼠模型,并利用嵌合荧光定量的方法对其结肠TGF-β1定量分析实验。结果 成功建立了肠炎性小鼠模型,荧光定量PCR试验结果表明实验组TGF-β1表达量明显高于对照组。结论 利用经口灌胃的方法可以成功的建立肠炎性小鼠动物模型,TGF-β1定量方法可以作为模型建立的评价标准。
2013, 21(2).
摘要:目的 实验通过克隆分析中国地鼠16S基因的部分序列,对中国地鼠16S基因的结构和功能进行初步探索和揭示。方法 从GeneBank中已报到的啮齿动物16S基因保守区设计一对引物,进行PCR扩增,测序。用Blastn与Genbank中7种啮齿类动物的16S基因进行序列比较,分析其碱基组成及变异情况,并用邻接法(NJ)、非加权组平均法(UPGMA)构建分子系统树,在分子水平上探讨中国地鼠和其它啮齿类动物的进化关系,对中国地鼠的种属地位进行了进一步验证。结果 获得了中国地鼠线粒体16S基因的部分序列;进化树表明,中国地鼠、金黄地鼠与欧洲仓鼠先聚为一支,小鼠与大鼠先聚为一支,东方田鼠、台湾田鼠与东欧田鼠先聚为一支。结论 中国地鼠和金黄地鼠的亲缘关系最近,与传统的分类地位基本吻合。
2013, 21(2).
摘要:一、目的:观察一次性大剂量和多次小剂量经尾静脉注射盐酸博来霉素(BLM)诱导ICR小鼠肺间质纤维化的动态变化和程度的差异,探讨博来霉素诱导小鼠纤维化最佳剂量和方法。二、方法:126只8周龄雄性ICR小鼠,随机分成一次性大剂量模型和多次小剂量模型。一次性大剂量模型分为200mg/kgBLM组、150mg/kgBLM组、100mg/kgBLM组及阴性对照组(DN组),每组18只,分别经尾静脉一次性注射盐酸BLM200mg/kg、150mg/kg、100mg/kg及生理盐水10ml/kg。各组分别于7、14、21天各处死6只。多次小剂量模型分为10mg/kg/d BLM组(n=36)及阴性对照组(N组),分别经尾静脉注射盐酸BLM10mg/kg/d及生理盐水10ml/kg/d,连续注射14天,两组分别于14、21、28天各处死6只。留取肺组织,观察肺组织病理改变,检测Ⅲ型胶原的含量,观察小鼠体重,生存率。三、结果:①在一次性大剂量模型中,BLM各剂量组肺泡炎症评分及肺纤维化评分与正常组相比,除100mg/kgBLM组和150mg/kgBLM组在第7天的模型无统计学意义外(P >0.05),其余各组均有统计学意义(P<0.05);各个剂量组Ⅲ型胶原的表达面积与正常组相比,除100mg/kgBLM组在第7天的模型无统计学意义外(P >0.05),其余各组均较正常组高(P <0.05),各个剂量组分别在第21天达到高峰,以200mg/kgBLM组第21天组Ⅲ型胶原的表达面积最高;该模型小鼠各剂量组均未出现死亡,死亡率为0。②在多次小剂量模型中,各组的肺泡炎症与肺纤维化程度与正常组相比均有统计学差异(P<0.05);各组Ⅲ型胶原的表达也均高于正常组(P <0.05),且随着时间的延长呈进行性增加,在第28天达到高峰;该模型小鼠共死亡11只,死亡率为30.56%。四、结论:在本实验中,以尾静脉一次性注射BLM200mg/kg后第21天诱导建立的ICR小鼠肺纤维化模型成模最好,其小鼠死亡率低,操作简单,有效安全方便的特点使之有希望成为一种复制肺纤维化的理想模型。
甄毅岚 , 王亚男 , 李晟 , 董金龙 , 盛汝祥 , 史开宇 , 董六一
2013, 21(2).
摘要:【摘要】 目的:线栓法制备小鼠脑缺血/再灌注模型,并探讨影响该模型稳定性的因素。方法:KM小鼠100只,雌雄各半,体重20-39g,分别将雌雄KM小鼠随机分为假手术组(n=20)和不同体重实验组(n=80)。其中实验组按小鼠体重分为以下8组:A组(♂,20-24g)、B组(♂,25-29g)、C组(♂,30-34g)、D组(♂,35-39g),E组(♀,20-24g)、F组(♀,25-29g)、G组(♀,30-34g)、H组(♀,35-39g),每组10只。线栓栓塞法制备局灶性脑缺血/再灌注模型,选用单丝尼龙线(直径0.128-0.180 mm),液体石蜡处理浸泡后,从右侧颈总动脉进线,阻塞大脑中动脉血流,再灌注时拔出线栓,并对模型进行评价,采用的主要观察指标是神经功能损伤评分和2,3,5-三苯基氯化四氮唑( TTC)染色。 结果:同假手术相比,不同体重实验组小鼠脑缺血再灌注后,出现神经行为功能异常,TTC染色脑组织显示出明显的梗塞灶。与C、D组相比, A、B两组行为学评分以及梗死灶体积显著性增加(P<0.01);与 G、 H组相比, E、 F两组的行为学评分以及梗死灶体积也显著性增加(P<0.01,P<0.05)。雄性KM小鼠与雌性相比,成模率较高且死亡率相对较低。此外,A组与E组相比,其行为学评分显著增加(P<0.01);B组与 F组相比,小鼠行为学评分以及脑梗塞体积显著增加(P<0.01)。结论:线栓法是一种简单、稳定、可靠的制备小鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的方法。影响线栓法构建模型成功率的因素有许多,其中小鼠体重与线栓直径比例的匹配、品系性别的选择、手术时间、进线深度以及26℃左右的室温是手术过程中需注意的重要因素。本研究结果表明,体重在25g左右的雄性KM小鼠制备模型成功率较高,死亡率较低,适合建立小鼠局灶性脑缺血/再灌注模型。 【关键词】:小鼠;局灶性脑缺血/再灌注模型;线栓法;体重
2013, 21(2).
摘要:目的 探讨H9N2亚型猪流感病毒诱导小鼠急性肺损伤过程中炎症因子的变化和作用. 方法 通过滴鼻的方法将H9N2亚型猪流感病毒感染BALB/c小鼠,于感染后2、4、6、10、14 d取小鼠肺组织匀浆,分别测定肺组织匀浆中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的浓度。结果 试验组肺组织匀浆中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10在不同时间点浓度均显著高于正常对照组(P<0.05),TNF-α和IL-1β于14d后趋于正常,而IL-6和IL-10增高持续至14d后。结论 H9N2猪流感病毒诱导小鼠急性肺损伤过程中炎症因子发挥重大作用,TNF-α和IL-1β起致炎作用,IL-6可能和IL-10一样,发挥抗炎作用。
2013, 21(2).
摘要:药物临床前安全性评价中的致癌实验对药物是否能进入临床实验和上市起着至关重要的作用。一些发达国家已经采用小鼠模型的短中期致癌实验作为附加实验,代替了传统的两年期实验。本文主要参考这些模型在致癌实验和药品致癌性评价中的已有数据及资料,对其特点和近年来的应用情况进行了概述。结合现有模型的缺陷,我国新药研发的需求和药物流通日益国际化的现状,得出研发DNA修复系统和细胞周期控制系统缺陷的人源化的转基因模型,是非常有前景的新替代模型。
杨玉琴 , 冯洁 , 柏熊 , 沈志敏 , 刘雄伟 , 高捷 , 谢建云 , 胡建华 , 高诚
2013, 21(2).
摘要:[摘要] 目的:建立东方田鼠非酒精性脂肪肝模型,并观察测定其肝指数、病理、血清生化指标的动态变化。方法:选取6周龄湖南洞庭湖种群雄性东方田鼠70只,随机分为2组,模型组饲喂高脂肪料,对照组饲喂高纤维料,分别于第2、4、6、8、12周处死,称量体重及肝重,计算肝指数,采血检测东方田鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、r-谷氨酰转移酶(r-GT)、胆碱酯酶(CHE)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、葡萄糖(GLU)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL),并取肝脏HE染色后做病理学观察。结果:与对照组相比,模型组6周时肝脏出现了典型的脂肪肝特征,肝重和肝指数都明显升高(P﹤0.05),血清ALT、AST、r-GT、CHE、TC、FFA、GLU和LDL都明显升高(P﹤0.05),HDL和TG均明显降低(P﹤0.05)。镜检观察到模型组田鼠肝细胞逐渐呈现弥漫性脂肪变性,6周时大范围出现脂滴,8周时肝内出现弥漫性大脂肪滴,12周后出现炎细胞的浸润。结论:采用高脂饲料成功诱发东方田鼠非酒精性脂肪肝,可为研究非酒精性脂肪肝的发病机制和药物干预提供新的模型。
2013, 21(2).
摘要:【摘要】 目的 构建稳定表达β-synuclein的SH-SY5Y细胞株。方法 利用脂质体转染技术将质粒pcDNA3.1-β-synuclein转染SH-SY5Y细胞,通过Zeocin进行抗性筛选。采用原位免疫荧光、免疫组织化学染色及Western杂交检测β-synuclein在SH-SY5Y细胞中的表达情况;通过MTT比色法检测β-synuclein稳定表达对SH-SY5Y细胞增殖的影响。 结果 原位免疫荧光、免疫组织化学染色及Western检测结果显示β-synuclein在SH-SY5Y细胞中的表达水平较对照组明显升高; 稳定表达β-synuclein的细胞增殖程度较对照组明显增高(P<0.05)。结论 β-synuclein在SH-SY5Y细胞中稳定表达,对细胞具有明显的保护作用。这为进一步研究β-synuclein对帕金森病发病神经保护作用的研究奠定了良好的基础。
2013, 21(2).
摘要:目的: 测定成年SD大鼠体重与各脏器重量,并对不同脏器之间及体重与各脏器重量的相关性进行分析, 方法: 选用两月SD大鼠雄性共24只,进行颈动脉放血处死,解剖后分别测定心、肝、肺、肾等脏器重量, 对大鼠体重与各脏器总重及各脏器分别重量之间作相关性分析。结果: SD大鼠的心、肝、肺、脾、肾等五种脏器与胃空体的相关性分析中,SD大鼠的心脏及肝脏重量之间不相关(P> 0.05),且分别与其它各脏器及胃空体之间也无明显相关(P> 0.05);而脾脏的重量与肾脏重量之间则相关极为显著(P < 0.01);胃空体与肺、脾呈现极显著相关(P < 0.01),与肾脏呈显著相关(P < 0.05)。结论: 国内很少有关于动物脏体之间相互关系的实验,本研究通过解剖比较SD大鼠各脏器之间的关系,使我们对动物体内各脏器的大小及相互关系有了初步的认知,为今后进行的动物相关实验研究打下基础。
2013, 21(2).
摘要:【摘要】 目的 观察百草枯(PQ)对发育期C57BL/6J小鼠神经发育的毒性作用,并探讨百草枯对小鼠学习记忆的影响。方法 80只出生第21天的仔鼠分为对照组(生理盐水),1.25mg/kg/d,2.5mg/kg/d,5mg/kg/d,10mg/kg/d五组,灌胃染毒百草枯,每天一次,连续30d。观察小鼠的一般生理和神经行为发育情况,并在染毒结束后进行Morris水迷宫实验和避暗实验,测试小鼠的学习记忆功能。神经行为学测试结束后取小鼠大脑,称重并进行病理检查,同时利用透射电镜观察各组小鼠中脑黑质部超微结构。结果 染毒期间小鼠一般状况没有明显变化,染毒结束后各组体重没有统计学差异;在Morris水迷宫测试中,各组差异没有统计学意义,而避暗实验中与对照组相比,高剂量组的避暗潜伏期延长,差异具有统计学意义(P<0.05);在病理切片和透射电镜观察中,在高剂量组分别观察到黑质细胞减少和神经元细胞凋亡。结论 百草枯暴露对发育期小鼠成年后神经行为有影响,同时会使小鼠成年后出现脑组织的病理变化,发生器质性的病变。
邵国艳 , 冯洁 , 柏熊 , 赵莹 , 刘大海 , 高捷 , 谢建云 , 高诚 , 胡建华
2013, 21(2).
摘要:目的 研究东方田鼠感染日本血吸虫后肝、肺组织病理改变及相关基因表达差异,为进一步研究东方田鼠抗血吸虫机制提供依据。方法 东方田鼠感染日本血吸虫尾蚴(2000条/只),取对照组东方田鼠和感染血吸虫后第6、10、15、20、30天肺、肝组织样品,HE染色后进行病理观察,并提取肺和肝总RNA,对Lyz、RT1-Db1、Cd74、C1qa、Thra、Igf1基因进行实时荧光定量PCR检测,比较其在肝脏和肺脏的动态表达水平。结果 东方田鼠感染血吸虫后6-10天,肺部有大量出血点,肝细胞空泡变性,肝窦高度扩张,肺和肝组织内血管周围及管腔均有大量嗜酸性粒细胞及少量中性粒细胞、巨噬细胞等炎性细胞浸润,至第20天逐渐恢复。从感染后第6天开始,Lyz、RT1-Db1、Cd74基因在肺和肝内表达均明显上调,在第20天后逐渐恢复,C1qa基因在肺内表达上调,Thra基因在肺内表达下调,Igf1基因肝内表达下调。结论 在东方田鼠抗血吸虫感染的过程中,嗜酸性粒细胞发挥了非常重要的作用,相关基因在东方田鼠抗血吸虫感染的过程中可能发挥一定的作用。
许琴 , 李建瑛 , 任秀梅 , 赵彦斌 , 胡仲明 , 许永华 , 孙兆增 , 刘一 , 刘文森
2013, 21(2).
摘要:目的 研究雌激素受体α, β在比格犬卵巢及子宫内的定位。 方法 采用免疫组化SP法DAB显色结合BCIP/NBT及AEC显色检测ERα、ERβ在比格犬子宫及卵巢内的表达。 结果 比格犬ERα主要表达于卵泡颗粒细胞、卵巢间质腺腺上皮细胞及子宫内膜腺体腺上皮细胞胞核内,胞质内仅有少量表达,而在卵泡膜内膜的间质细胞,腺体周围的基质细胞及小动脉血管内皮细胞和平滑肌细胞、小静脉内皮细胞的胞核内有少量表达。而ERβ则以相同的组织特异性主要表达于上述组织细胞的胞质内,在胞核内有微弱表达。ERα 表达于膜黄体细胞的胞核内,而在黄体颗粒细胞胞核与胞质内均有表达。而ERβ则仍特异表达于不同生理阶段黄体细胞的胞质内。BCIP/NBT与AEC双染未见ERα、ERβ在子宫内有明显的共表达现象。结论 比格犬ERα、ERβ 在子宫与卵巢组织内定位不同,ERα主要定位于胞核,在胞质内有微弱表达,而ERβ主要定位于胞质,在胞核内有零星表达。
2013, 21(2):0-0.
摘要:目的 对cTnTR141W扩张型心肌病转基因模型小鼠左、右心室进行对比分析,研究cTnTR141W转基因小鼠是否可以作为右心室心肌病的动物模型。方法 利用7.0T高场强磁共振成像(MRI)技术,定量分析了2、4、6和8月龄对照组及cTnTR141W转基因模型小鼠左、右心室的舒张末容积(EDV)、收缩末容积(ESV)和射血分数(EF)的变化情况,同时对6月龄对照组cTnTR141W转基因模型小鼠心肌组织进行组织学分析。结果 转基因阴性对照小鼠相比,cTnTR141W转基因小鼠左、右心室的容积在2月龄时已有增大趋势,而射血分数有减小趋势。右心室射血分数减小出现最早也最显著(P<0.05)。随年龄增加,cTnTR141W转基因小鼠与转基因阴性对照小鼠相比,右心室的结构和功能的病理生理变化与左心室同时趋于严重。该小鼠左、右心室在4月龄后表现典型的扩张型心肌病表型。结论 cTnTR141W转基因模型小鼠左心室和右心室的扩张性心肌病表型同时出现,该小鼠可作为研究心肌病对右心室功能影响的动物模型。
程凯慧 , 于志君 , 忻悦 , 张坤 , 黄靖 , 岳秀芳 , 丁洁 , 杨霞 , 乔军 , 王铁成 , 杨松涛 , 黄耕 , 赵永坤 , 高玉伟 , 华育平 , 夏咸柱
2013, 21(2):0-0.
摘要:目的 本研究利用A/H6N1亚型禽流感病毒的反向遗传平台,评估PB2 E627K对A/H6N1亚型禽流感病毒的致病性,探究A/H6N1流感病毒的致病性分子基础。方法 通过A/H6N1亚型禽流感病毒A/Mallard/SanJiang/275/2007株反向遗传操作系统和点突变技术拯救病毒rA/H6N1和PB2 E627K位点发生突变的 rA/H6N1-627,两株拯救病毒分别以101EID50~106EID50的攻毒剂量人工感染BALB/c小鼠,通过体重变化、死亡率、病毒滴定等方面进行致病性分析。结果 成功构建A/H6N1亚型禽流感病毒的反向遗传平台,rA/H6N1的8个基因片段完全源于A/H6N1的基因组,核苷酸序列及生物学特性与A/H6N1完全一致。rA/H6N1能够人工感染BALB/c小鼠,但不致死,对BALB/c小鼠呈现低致病性(MLD50>106.5EID50),病毒在小鼠体内的分布情况及各个脏器中的病毒滴度与A/H6N1保持一致; rA/H6N1-627能感染小鼠,引起小鼠体重下降,但不能引起所有106EID50组小鼠死亡,病毒能在小鼠的肺脏和脑部进行增殖。结论 实验结果表明,在H5N1禽流感中发挥重要作用的PB2-E627K位点并非A/H6N1流感病毒的毒力决定因子。A/H6N1流感病毒致病性的分子基础还有待继续研究,该反向遗传操作系统和点突变技术的建立为研究该亚型流感病毒致病机制、传播机制及病毒基因功能奠定了基础,同时也为A/H6N1亚型禽流感病毒新型疫苗的研制开辟了新途径。
2013, 21(2):0-0.
摘要:【摘要】 目的 了解性发育相关数量性状基因座( Quantitative Trait Locus,QTL)(DXMit68-rs29053133)在近交系小鼠A/J 和C3H/HeJ (C3H)中是否存在影响表型的序列差异,以帮助对候选基因进行筛选。方法 利用A/J 和C3H/HeJ (C3H)构建了针对该区段的特异区段替换系小鼠,并对其雌鼠的性发育相关性状进行研究。结果 A/J 和C3H/HeJ在这一QTL中染色体的序列差异,没有引起相关性状的明显差异。结论 研究结果显示,A/J 和C3H/HeJ小鼠中该QTL区段中存在序列差异的基因并不是引起性发育表型产生差异的候选基因。
2013, 21(2):0-0.
摘要:动物模型在II型糖尿病研究中发挥了重要作用,对于深入研究糖尿病及其并发症的发病、预防、诊断和治疗有重要意义。本文就II型糖尿病动物模型的构建进行了概述,对发展新型构建糖尿病模型的方法具有重要的参考价值。