• 2013年第21卷第3期文章目次
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    • 同一滴度不同方法转染AAV9-SERCA2a基因对大鼠的有效性和毒副作用评价

      2013, 21(3).

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      摘要:目的 研究同一滴度不同心脏基因转染方法转染携带肌浆网钙ATP酶2a(sarcoplasmic reticulum Ca2+ATPase 2a,SERCA2a)基因的9型腺相关病毒(adeno-associated virus serotype9,AAV9)即AAV9-SERCA2a对SD大鼠心肌的有效性及对机体毒副作用的影响。方法 体外成功构建AAV9-SERCA2a-EGFP病毒载体系统,90只雄性SD大鼠随机分为尾静脉注射(Tail vein injection,TVI)组、心肌注射(Intramyocardial injection,IMI)组、心包腔注射(Intrapericardial injection,IPI)组,采用相应方法在体分别转染滴度1×1011 vg/mL AAV9-SERCA2a-EGFP、AAV9-EGFP、NS各200µL。转染后30d,荧光显微镜下观察心肝肾组织绿色荧光表达情况,Western Blot检测SERCA2a基因在大鼠各组织的相对表达量,体表12导联心电图检测心律失常发生率,HE染色观察病理学变化,心脏彩色多普勒超声评价心功能,血液生化学指标检测肝肾功能。结果 三组左心室可见大量绿色荧光表达,IMI组荧光局限在注射点,三组肝肾组织均可见微弱荧光;三组心肌SERCA2a蛋白相对表达量显著高于肝肾(P<0.01),TVI组和IMI组心肌SERCA2a蛋白相对表达量明显高于IPI组(P<0.01);TVI组和IPI组心电图正常,IMI组2只大鼠发生室性早搏;三组转染AAV9-EGFP、AAV9-SERCA2a-EGFP与转染NS相比,心功能、组织病理学、血液生化学指标均无显著差异(P>0.05)。结论 三种方法转染滴度1×1011 vg/mL AAV9-SERCA2a基因,TVI法和IMI法在心肌的有效性优于IPI法,TVI法和IPI法对机体的毒副作用小于IMI法,综合三种方法的有效性和毒副作用评价,TVI法优于IMI法和IPI法。

    • Tg-visfatin×ob/ob小鼠表型特征与内脂素表达

      2013, 21(3).

      摘要 (3676) HTML (0) PDF 0.00 Byte (612) 评论 (0) 收藏

      摘要:[摘要] 目的 内脂素(visfatin )是近年发现的一种在内脏脂肪中大量表达的细胞因子,很多研究表明其与胰岛素抵抗和2型糖尿病有关,但作用效果存在争议。本文将visfatin转基因小鼠和2型糖尿病模型小鼠ob/ob杂交,研究Tg-visfatin×ob/ob小鼠的表型特征并探讨内脂素的作用。方法 将visfatin转基因小鼠与ob(+/-)小鼠杂交,获取visfatin转基因ob/ob小鼠(Tg-visfatin×ob/ob),以ob/ob小鼠为对照,测定两种小鼠1至9月龄的体重变化,分别在3,5,9月龄测定其腹腔糖耐受和胰岛素耐受情况,并对其从9月龄至11月龄的死亡率进行统计。结果 两种小鼠在1至9月龄的体重没有显著性差异。腹腔糖耐受和胰岛素耐受实验显示,与ob/ob小鼠相比,3月龄时,Tg-visfatin×ob/ob小鼠的糖耐受受损及胰岛素耐受情况得以改善;5月龄时,Tg-visfatin×ob/ob 小鼠仅糖耐受受损得以改善;9月龄时,Tg-visfatin×ob/ob小鼠具有更严重的糖耐受受损及胰岛素耐受。统计结果显示,从9月龄到11月龄之间,Tg-visfatin×ob/ob小鼠的死亡率比ob/ob小鼠提高了44.4%。结论 visfatin体内的高表达对ob/ob小鼠糖耐受和胰岛素耐受有影响,作用效果随着小鼠的年龄不同而变化,在早期起到代偿性的缓解ob/ob小鼠的糖耐受和胰岛素耐受的作用,到后期表现为失代偿性的加重了ob/ob小鼠的糖耐受和胰岛素耐受,并增加了小鼠的死亡率。

    • 三种药物对大鼠糖尿病性白内障延缓效应的研究

      2013, 21(3).

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      摘要:目的 本实验旨在验证腹腔注射葡萄糖能否成功建立大鼠糖性白内障模型,并且探讨黄芩苷点眼、牛磺酸点眼、牛磺酸腹腔注射以及Vc腹腔注射对大鼠糖性白内障的延缓效应及短期治疗作用。方法 本实验按照公鼠2.5ml/次,母鼠2ml/次剂量注射30%葡萄糖生理盐水建立大鼠糖性白内障模型,给药同期进行,点眼每日2次,腹腔注射每日1次。从注射葡萄糖第3日开始对各组晶状体进行裂隙灯检查,并定期测定体重、饮食量等相关指标。结果 实验结果表明葡萄糖腹腔注射第3天即可使大鼠晶状体出现空泡现象。各组药物的延缓效应与短期治疗效应相同,依次为牛磺酸注射、黄芩苷点眼、牛磺酸点眼以及Vc注射。结论 30%葡萄糖腹腔注射能快速建立大鼠糖性白内障模型,且比半乳糖注射建模成本低,成模率高。4%牛磺酸腹腔注射以及0.1%黄芩苷在预防和治疗大鼠糖性白内障方面效果显著。

    • 镉染毒对大鼠骨生物力学性能的影响

      2013, 21(3).

      摘要 (3342) HTML (0) PDF 0.00 Byte (520) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的: 探讨镉对大鼠股骨和腰椎生物力学性能的影响。方法: 24只8周龄雄性SD大鼠随机分成4组,分别背部皮下注射生理盐水0.5ml(对照组)和0.1mg/kg bw(低剂量组),0.5mg/kg bw(中剂量组),1.5mg/kg bw(高剂量组)CdCl2,每周称体重,并根据体重调整注射量。染毒后第12周,收集全血、腰椎及股骨,分别用于血镉测定、骨镉测定、骨密度测定及生物力学测定。结果: 染毒组大鼠体内血镉及骨镉水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05);中、高剂量染毒组大鼠骨密度较对照组显著下降(P < 0.05);染毒组大鼠股骨和腰椎生物力学性能较对照组有不同程度的的降低,其中高剂量染毒组大鼠股骨生物力学性能的下降和对照组相比有显著差异(P < 0.01);中剂量和高剂量染毒组大鼠腰椎生物力学性能和对照组相比差异有统计学意义(P < 0.01)。结论: 镉能影响大鼠股骨和腰椎的生物力学性能,并且腰椎生物力学性能的改变要早于股骨。

    • 氟对大鼠肝组织细胞凋亡与DNA损伤的影响?

      2013, 21(3).

      摘要 (3078) HTML (0) PDF 0.00 Byte (287) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 研究大鼠染氟后肝组织细胞凋亡及DNA损伤情况。 方法 SD大鼠随机分为对照组、低氟组、中氟组、高氟组,每组12只,分别饮用含氟化钠为0、50、100、200 mg/L的去离子水,均饲标准营养大鼠饲料,染氟120天。肉眼观察牙齿的变化,采用氟离子选择电极法测定大鼠尿氟,HE染色观察组织病理学变化,彗星实验检测细胞DNA损伤,流式细胞术检测肝脏组织细胞凋亡率。 结果 低氟组、中氟组、高氟组大鼠尿氟分别为23.52?.91、30.16?.78、61.23?.98 mg/L,均显著高于对照组0.07?.02 mg/L,差异有统计学意义(p<0.01)。不同剂量染氟大鼠肝组织细胞呈现不同程度肿胀,肝组织内出现多种灶状病变。各染氟组大鼠肝细胞拖尾率及拖尾长度与相应的对照组相比,差异均有统计学意义,并且肝细胞拖尾率及拖尾长度随染氟剂量的加大而增大。不同剂量染氟组细胞凋亡率与对照组相比,均明显增高,而且高、中氟组肝细胞凋亡率显著高于低氟组(p<0.01)。结论 氟化物可导致大鼠肝细胞DNA损伤,诱导细胞凋亡,一定浓度的氟化物诱导大鼠肝细胞凋亡与DNA损伤之间存在着相关性。

    • CT 灌注成像与大鼠C6 胶质瘤CD105表达相关性研究

      2013, 21(3).

      摘要 (3370) HTML (0) PDF 0.00 Byte (382) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 研究大鼠脑C6 胶质瘤CT 灌注参数的变化特征,分析CT 灌注参数在评价C6 胶质瘤血管生成中的价值。材料与方法 20只雄性SD 大鼠,随机分为肿瘤组和正常对照组。对照组通过立体定向仪于鼠脑右侧尾状核区注射10μL生理盐水,肿瘤组于鼠脑右侧尾状核区种植C6 胶质瘤细胞复制大鼠脑胶质瘤模型,3周后两组大鼠分别在脑尾状核层面进行CT 灌注扫描,大鼠脑组织进行HE 染色及FⅧ 抗体和CD105 单抗免疫组化染色。应用SPSS11.5 统计学软件进行数据分析,P<0.05有统计学意义。结果 大鼠胶质瘤的CBV、CBF、PS 及MTT 值分别为 (均数?标准差)分别为(17.35?.73)mL/100g、(508.66?58.88)mL/min.100g、(13.92?.96)mL/min.100g、(1.79?.44)s;对照组大鼠右侧基底节CBV、CBF、PS 及MTT 值分别为(均数?标准差)分别为(10.28?.01) mL/100g, (304.95?8.77) mL/100g.min, (0.26?.34) mL/100g.min, (1.48?.07) s, 两组CBV、CBF、PS 值有显著性差异,胶质瘤组呈现明显的高灌注特征,MTT无显著性差异。胶质瘤FⅧ 和CD105计数分别为(34.7?.13)条/高倍视野、(16.6?.12)条/高倍视野; 对照组FⅧ计数为(17.31?.62)条/高倍视野, 对照组无明显CD105染色阳性血管。肿瘤实质区的CBV、PS 与免疫组化的FⅧ-MVD 和CD105-MVD 计数之间明显相关( P均<0.05),CBF 与CD105-MVD 计数之间相关( P<0.05),MTT 与免疫组化MVD 计数之间均无显著相关性。结论 CT 灌注参数CBV、CBF及 PS与CD105-MVD表达正相关,CT 灌注成像有助于胶质瘤血管生成的研究。

    • 胎次、性别对成年小鼠海马齿状回神经发生及学习记忆的影响

      2013, 21(3).

      摘要 (1464) HTML (0) PDF 0.00 Byte (273) 评论 (0) 收藏

      摘要:【摘要】目的 探讨胎次、性别是否对成年小鼠海马齿状回神经发生及学习记忆产生影响。 方法 运用Morris水迷宫系统检测第1至3胎成年小鼠的学习记忆能力,腹腔注射BrdU,标记神经干细胞,检测不同胎次、性别小鼠海马齿状回中的神经发生的差异。结果 (1)在同性别、不同胎次成年小鼠间,第2胎的学习记忆能力(LMA)均显著地高于第1、3胎的,其影响规律为LMA2 > LMA1 > LMA3,且P < 0.05;在同胎次、不同性别成年小鼠间,雌性小鼠的LMA均高于雄性小鼠的,但其差异均不显著(P > 0.05)。(2)在同性别、不同胎次成年小鼠间,第2胎海马DG新生神经细胞的数量(N)均高于第1、3胎的,其影响规律分别为NF2 >NF3 >NF1和NM2 >NM1 >NM3,但其差异均不显著(P > 0.05);在同胎次、不同性别成年小鼠间,雌性小鼠的N均高于雄性小鼠的,但其差异也均不显著(P > 0.05)。结论 胎次、性别对实验动物神经发生及学习记忆等方面产生的影响是肯定的。因此,在使用实验动物时,应予以充分考虑,尽量使用胎次、性别相同的。

    • 重组8型腺相关病毒(rAAV8-1.3HBV)介导HBV急性感染树鼩模型建立

      2013, 21(3).

      摘要 (4214) HTML (0) PDF 0.00 Byte (314) 评论 (0) 收藏

      摘要:【摘要】 目的 利用重组8型腺相关病毒介导1.3拷贝HBV基因组(1.3HBV,ayw亚型)在树鼩肝脏表达,建立HBV急性感染树鼩模型。 方法 通过大腿内侧静脉注射将携带有1.3 HBV的重组8型腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus 8,rAAV8-1.3HBV)导入树鼩肝脏,通过ELISA检测树鼩血清中HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb,荧光定量PCR检测树鼩肝脏和血清中HBV DNA,全自动生化分析仪检测血清中ALT水平,并观察感染后肝脏的病变情况。结果 HBV感染主要血清标志物1-2周内均检测阳性;30天后肝组织仍可检测到病毒抗原阳性细胞;55天时肝组织HBV DNA拷贝数仍可达到104 -105 ;树鼩血清中HBV DNA拷贝数持续一个月高于正常组;肝组织炎细胞略增多,血清ALT水平持续升高。 结论 rAAV8所携带的HBV基因组高效专一导入树鼩肝细胞并复制表达,成功建立HBV急性感染树鼩模型,为进一步探索rAAV8树鼩慢性感染模型打下一定的基础。

    • 糖尿病动物模型血清及组织中细胞因子的变化

      2013, 21(3).

      摘要 (2962) HTML (0) PDF 0.00 Byte (564) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨恒河猴糖尿模型病细胞因子的水平和变化规律。方法 健康恒河猴5只,小剂量(30mg/kg)多次静脉注射链脲佐菌素(STZ),分别血糖稳定后3、9、15和19个月检测血清中白细胞介素- 6( IL-6)、白细胞介素- 10( IL- 10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。安乐濒死状态的动物,取胰腺、肝脏、肾脏制成石蜡切片,用免疫组化染色法显示组织中IL-6、IL- 10、TNF-α的表达,并对结果进行图像分析和统计学处理。结果 造模后6个月动物血清中IL-10浓度显著降低(P<0.01)。IL-6、TNF-α水平在采样的各个时间点均显著高于造模前 (P<0.01,P<0.05)。胰腺组织中IL-6中等强度着色,对照组弱阳性表达(P<0.05)。对照组IL-10强阳性表达,模型组弱阳性(P<0.01)。模型组TNF-α中等强度表达,对照组弱阳性(P<0.05)。模型组肝脏组织TNF-α中等阳性表达,对照组弱阳性(P<0.05)。结论 小剂量多次注射STZ后恒河猴细胞因子的含量及变化与临床类似,可作为相关研究的动物模型。

    • 自发性及睾酮诱导犬前列腺增生模型的比较研究

      2013, 21(3).

      摘要 (2100) HTML (0) PDF 0.00 Byte (302) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 比较自发性及雄激素诱导犬前列腺增生模型的特点,为更好地评价治疗前列腺增生药物奠定方法学基础。方法 成年雄性Beagle犬12只,随机分成2组,B超探测符合要求的老年Beagle犬6只,依次设为对照组、睾酮组和老年犬组。睾酮组动物去势后,经肌肉注射(im)给予2.5 mg/kg的睾酮,对照组动物给予等体积溶媒,老年犬组动物不给药,连续4周。每周称重一次,最后一次给药24 h后,B超探测前列腺体积,采血,取血清备用。麻醉处死动物,取前列腺,称干湿重,测量前列腺体积,计算前列腺脏器系数,组织切片,HE染色后镜下观察前列腺病理组织学变化,并进一步利用显微图像软件测量前列腺上皮高度及腺腔面积。利用磁酶免和ELISA方法检测血清及前列腺组织中睾酮(T)、双氢睾酮(DHT)、前列腺特异抗原(PSA)和前列腺酸性磷酸酶(PAP)水平。结果 ①给药后,各组动物体重增长总体呈平稳趋势。②B超结果显示,去势Beagle犬给予睾酮4周,前列腺体积大于对照组(P<0.01),老年犬前列腺体积大于成年犬(P<0.01)。③解剖结果显示,睾酮组和老年犬组实际前列腺体积均明显大于对照组(P<0.05),且老年犬前列腺体积大于睾酮组;睾酮组和老年犬组前列腺湿量和脏器系数均大于对照组(P<0.05),且老年犬前列腺湿重和脏器系数均大于睾酮组。?病理形态分析显示,睾酮组犬前列腺镜下主要表现为腺体增生,尤其是腺上皮增生,而老年犬则更多表现为间质增生。显微图像分析结果显示,与正常对照组相比,睾酮组前列腺上皮高度增加(P<0.01),腺腔面积增大(P<0.01);老年Beagle犬同样表现为前列腺上皮高度增加(P<0.01),腺腔面积增大(P<0.05),但上皮高度要低于睾酮组。⑤激素检测结果显示,与对照组相比,睾酮组血清中T、DHT和PAP水平略升高,前列腺组织中T(P<0.05)、DHT(P<0.01)、PAP(P<0.05)和PSA水平升高明显;老年犬血清中T、DHT和PAP水平略升高,前列腺组织中T升高,但DHT、PAP和PSA水平均较正常组为低。结论 自发性和睾酮诱导的犬前列腺增生模型均可用于前列腺增生药物评价,但模型间存在一定的差异性。

    • 胶原性关节炎大鼠炎性细胞因子的动态观察

      2013, 21(3).

      摘要 (3379) HTML (0) PDF 0.00 Byte (563) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 以胶原性关节炎(CIA)大鼠模型为基础,动态观察CIA大鼠血清中炎性细胞因子水平的变化。方法 建立CIA大鼠模型。分别于初次免疫后第0、10、20、30、40、50、60天记录大鼠的体重,测量大鼠后足体积和足垫厚度,计算关节炎指数;HE染色光镜下观察关节滑膜病理变化;采用ELISA方法检测大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平变化。结果 造模成功后的CIA大鼠14d左右出现炎症反应,30d左右达高峰,以后炎症逐渐减轻。与同期空白对照组大鼠相比,CIA大鼠血清中TNF-α水平10d明显升高(P<0.01),IL-1β和IL-6水平20d明显升高(P<0.05),三者水平均30d达高峰(P<0.01),以后持续存在,但水平有所降低。结论 CIA大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6在RA的整个病程中一直发挥着重要作用。

    • 兔食管静脉曲张模型的建立

      2013, 21(3).

      摘要 (1654) HTML (0) PDF 0.00 Byte (388) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立新西兰大白兔的食管静脉曲张模型,为下一步的临床研究提供可靠的小动物型模型。方法 采用门静脉左支完全夹闭法造模,并通过外观、超声、胃镜等检查检验手段对造模结果加以评估。结果 术后8周100%存活动物可见食管静脉曲张。结论 通过门静脉左支夹闭法,基本可以建立兔食管静脉曲张模型。

    • SNP与Car2、Gpi1基因多态性的关联性研究

      2013, 21(3).

      摘要 (1854) HTML (0) PDF 0.00 Byte (290) 评论 (0) 收藏

      摘要:[摘要] 目的 从单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)水平探索小鼠生化标记基因Car2与Gpi1多态性的形成机理。方法 从DNA、cDNA和蛋白多肽3个方面分析研究Car2与Gpi1基因的多态性。结果 Car2基因DNA和cDNA中有3个SNP与Car2a/b多态性相关,分别为外显子2中的C(T)、G(C)和外显子7中的A(G);蛋白多肽中发现第38位Gln/His与Car2a/b多态性相关,对应于外显子2中的G(C)。Gpi1基因DNA中没有发现与Gpi1a/b多态性相关的SNP;cDNA水平有2个SNP与Gpi1a/b多态性相关,分别为外显子9中的T(C)和18中的A(G);蛋白多肽中发现第247位Phe/Leu与Gpi1a/b多态性相关,对应于外显子9中的T(C)。结论 Gln/His(38)、Phe/Leu(247)间的转换可能分别是近交系小鼠形成Car2a/b,Gpi1a/b多态性的原因。

    • DS-1226对慢性束缚大鼠的抗抑郁作用

      2013, 21(3).

      摘要 (1920) HTML (0) PDF 0.00 Byte (305) 评论 (0) 收藏

      摘要:【摘要】 目的 研究DS-1226对慢性束缚大鼠的抗抑郁作用,为抗抑郁药物的研发提供实验数据。 方法 将90只雄性SD大鼠随机分为6组,每组15只,分别为对照组(control group)、模型组(model group)、西酞普兰组(100mg/kg citalopram)、低剂量组(18.75mg/kgDS-1226)、中剂量组(37.5mg/kgDS-1226)、高剂量组(75mg/kgDS-1226)。预防7天给药后进行每天14小时连续28天的束缚造模并连续给药。造模过程中每周监测体重并在造模完成后进行糖水偏爱、新奇事物、自主活动实验,测试完成后处死动物取血清检测皮质酮含量。 结果 经过慢性束缚应激后,模型组大鼠的糖水偏爱指数降低,对新奇事物的探索行为以及自主活动尤其是中央区的活动减少,体重降低,血中的皮质酮含量升高。但中剂量、高剂量的DS-1226和西酞普兰能不同程度的提高慢性束缚大鼠的糖水偏爱指数,增加对新奇事物的探索次数、探索时间、降低潜伏期时间,增加自主活动尤其是中央区的活动,增加体重,降低血中皮质酮的含量。结论 DS-1226具有改善慢性束缚大鼠抑郁行为的作用。 【关键词】 DS-1226;慢性束缚;抑郁;大鼠。

    • 烧烫伤创面感染的小鼠模型构建

      2013, 21(3).

      摘要 (2398) HTML (0) PDF 0.00 Byte (597) 评论 (0) 收藏

      摘要:【摘要】 目的 探讨一种简单、稳定的烧烫伤创面感染的小鼠模型构建方法,以便进行相关烧烫伤创面修复研究。方法 取30只Balb/C小鼠,采用自制木质烫伤板,沸水浴法烫取直径8 mm的圆形创面,烫伤时间分别为5s、10s、15 s。伤后48 h,取创面组织进行HE染色观察,筛选最佳创面烫伤时间。另取72只小鼠制成深Ⅱ度烫伤创面,采用擦刮法分别接种20 ul菌浓度为1?06、l?07、1?08 CFU/mL金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC 25923的菌液。接种细菌72 h后 ,取创面组织HE染色观察创面炎症反应情况,并测定3d、7d、14 d的皮肤菌负荷,筛选最佳的细菌接种浓度。最后,按最佳条件建模后,观察创面的完全愈合时间以及创面愈中、愈后的组织学变化,以确定此创面感染模型是否建立成功。结果 组织学结果表明,10 s为深Ⅱ度创面的理想致伤时间,最佳接种菌浓为l?08 CFU/ml,此时,14 d内菌负荷均高于l?05 CFU/g。该模型的创面愈合时间(21?.95 d)较正常创面愈合时间(15.92?.34 d)明显延长(P<0.01),炎性反应明显,愈后不佳。结论 烧烫伤创面感染的小鼠模型构建成功,可作为感染创面防治研究的实验动物模型。

    • 四种苏丹红染料对小鼠血液的影响

      2013, 21(3).

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      摘要:目的 探讨苏丹红对小白鼠血液和组织器官的影响。方法 取小鼠连续12天腹腔注射不同剂量苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ(0、40、80、160mg/kg),末次给药24后采集血样,用血细胞分析仪检测血常规指标,毛细血管法测定凝血时间,剖腹取主要器官称重,计算脏器系数。结果 苏丹红I和II组血液红细胞数明显减少,而苏丹红III和IV组不明显,苏丹红不同剂量之间比较,低剂量苏丹红I和高剂量苏丹红II组比苏丹红III和IV组血液红细胞数变化明显;苏丹红I和II组血液血红蛋白含量明显降低,而苏丹红III和IV组血红蛋白含量变化不明显。四种不同剂量苏丹红组小鼠血液中血小板数量减少,随着剂量增加小鼠血液凝固时间延长。随着苏丹红剂量增加,苏丹红I和II组小鼠血液白细胞数比对照组明显增加,苏丹红III和IV组白细胞数有增加趋势但差异不显著。与对照组比较,苏丹红组小鼠血液白细胞数明显增加、而淋巴细胞和单核细胞显著减少。随着苏丹红注射剂量增加,肾脏和脾脏脏器系数较对照组明显增大,肝脏脏器系数变化不明显。结论 苏丹红对小鼠血液细胞、血红蛋白、血小板和凝血时间以及组织器官都有不同程度影响。

    • 稳定表达hSOD1G93A基因的肌萎缩侧索硬化体外细胞培养模型的建立与鉴定

      2013, 21(3).

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      摘要:摘要:目的 建立并鉴定稳定表达G93A型突变人超氧化物歧化酶(hSOD1G93A)基因的肌萎缩侧索硬化体外细胞培养模型。方法 利用活化的树突状聚合物将空质粒、hSOD1WT、hSOD1G93A基因转染入VSC4.1细胞内,G418抗性筛选,从而建立稳定的肌萎缩侧索硬化体外细胞模型。用免疫荧光技术检测VSC4.1细胞系运动神经元标志物。蛋白印迹实验鉴定hSOD1WT蛋白、hSOD1G93A蛋白的表达。MTT法检测细胞模型生长曲线。结果 VSC4.1细胞分化前表达Class III β-Tubulin、MNR2,分化后表达Class III β-Tubulin、MNR2、NF200、MAP2等运动神经元标志物。VSC4.1-hSOD1WT、VSC4.1-hSOD1G93A细胞均过表达人来源的SOD1,而VSC4.1-mock则不表达。与VSC4.1-mock、VSC4.1-hSOD1WT相比,VSC4.1-hSOD1G93A生长缓慢,在48h、72h细胞活力均低于VSC4.1-mock(P=0.031, P =0.000)、VSC4.1-hSOD1WT(P =0.001,P =0.000),其余时间点无明显差异(P >0.05)。结论 成功建立稳定表达hSOD1WT、hSOD1G93A 的VSC4.1细胞系,为进一步研究肌萎缩侧索硬化的发病与治疗奠定了良好的基础。

    • 豚鼠气管平滑肌化学介质敏感性与体征表型相关性研究

      2013, 21(3).

      摘要 (1735) HTML (0) PDF 0.00 Byte (420) 评论 (0) 收藏

      摘要:【【摘要】目的 研究豚鼠体征表型与气管平滑肌化学介质敏感性的相关性。方法 根据体征表型眼睛颜色、毛色、性别差异选取36只豚鼠,将动物按体征表型分为白色黑眼雌性组(WBEF),白色黑眼雄性组(WBEM),白色红眼雌性组(WREF),白色红眼雄性组(WREM),杂色黑眼雌性组(VBEF),杂色黑眼雄性组(VBEM),每组动物各6只。用旋割法制备离体豚鼠气管螺旋条,以组胺histamine (浴槽浓度2.0×10-3 g/L)和乙酰胆碱acetylcholine (浴槽浓度2.0×10-4 g/L)诱导气管螺旋条收缩,用BL420生物信号采集系统与张力传感器测定标本张力变化值,分析豚鼠眼睛颜色、毛色、性别与组胺、乙酰胆碱诱导的气管螺旋条收缩效应强弱的关系。数据采用SPSS11.5软件在α = 0.05的信度下进行单因素方差检验。结果 豚鼠毛色与眼睛颜色表型其气管平滑肌化学介质敏感性差异显著,P<0.05,有统计学意义,白色体征表型豚鼠的气管平滑肌化学介质敏感性较杂色表型高,红色眼睛表型较黑色眼睛表型高。性别表型对其介质敏感性差异不显著。结论 毛色、眼睛颜色表型不同其豚鼠气管平滑肌化学介质敏感性差异显著,性别表型不同其介质敏感性差异不显著,平喘动物模型宜优先选择白色红眼表型豚鼠。

    • >专题研究
    • 中国两头乌猪品种内源性逆转录病毒基因研究

      2013, 21(3):0-0.

      摘要 (1758) HTML (0) PDF 0.00 Byte (331) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 对5个中国两头乌猪品种(通城猪、东山猪、沙子岭猪、赣西两头乌猪和金华猪)及3个国外品种(大白猪、长白猪和杜洛克猪)猪内源性逆转录病毒(PERV)的核心蛋白(gag) 基因、多聚酶(pol) 基因、囊膜(env) 基因的三个亚型A、B、C,分别从DNA和RNA水平上进行研究,以发现中国两头乌猪品种在异种器官移植中的资源优势。方法 利用PCR方法在DNA水平上对PERV基因的3个亚型进行鉴定,并通过半定量PCR方法在RNA水平上检测通城猪和大白猪PERV各亚型在心、肝、脾、肺、肾、肌肉、脂肪、淋巴和脑组织中的表达谱。结果 4个华中两头乌猪种中env-AB型为主要PERV亚型,分别占被测总数的92%~100%。在这4个品种中均没有检测到C亚型,金华猪以及3个国外猪种中均检测到了C亚型,病毒亚型种类也更丰富。半定量PCR实验结果显示gag、pol基因在两个品种9个组织中广泛表达,env-A在通城猪的心、肝、肺、脂肪和淋巴组织中表达量较低,env-B在通城猪的心脏和淋巴组织中表达量较低,而env-B在大白猪的肾脏中表达很低,其他所测8个组织中表达量都较高。结论 通城猪、东山猪、赣西两头乌猪和沙子岭猪可以做为较佳的异种移植候选供体,具有良好的应用前景。

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