摘要:目的 比较分析H7N9病毒与H1N1病毒感染小鼠病理学损伤特点，初步探讨两种病毒感染致小鼠急性肺损伤的致病机制. 方法 H7N9病毒与H1N1病毒分别感染小鼠，观察不同病毒感染后小鼠生存率，并于不同时间点取心、肝、脾、肺、肾、脑、肠等组织，伊红-苏木素染色并进行组织病理学分析，免疫组化检测病毒抗原分布及中性粒细胞浸润.综合分析肺组织病理损伤与病毒复制、宿主免疫反应之间的关系. 结果 H7N9病毒感染小鼠肺及脾脏损伤较轻，存活率较高.H1N1 病毒感染的小鼠肺及脾脏损伤较重，感染后9 d全部死亡；两种病毒抗原主要分布于支气管上皮细胞、少量间质细胞和肺泡上皮细胞，病毒复制水平无明显差异.但H1N1病毒感染后肺及脾脏中均有大量中性粒细胞浸润，小鼠机体炎症反应明显强于H7N9病毒感染后小鼠炎症反应. 结论 H7N9病毒与H1N1病毒感染后小鼠病理学损伤特点及程度均不同，病毒复制是小鼠肺损伤的诱发因素但并非决定因素，宿主针对病毒感染产生的免疫反应程度与急性肺损伤密切相关.

摘要:目的 分析候选基因Agouti的多态性，揭示染色体工程小鼠毛色差异的分子机制.方法 首先，用测色仪检测小鼠的毛色差异.其次，利用DNA芯片进行全基因组扫描确定候选基因Agouti.最后，运用生物信息学软件分析Agouti基因cDNA序列和氨基酸序列的多态性，预测突变对蛋白结构和功能产生的影响.结果 发现Agouti基因cDNA序列上存在5个SNPs，使Agouti信号蛋白产生了3个错义突变.生物信息学分析发现，其中一个错义突变使该蛋白丢失了一个β折叠，并且其三级结构发生改变，最终导致与受体结合的能力相较于野生型有所下降.结论 在毛色基因Agouti的编码区发现了一个新的错义突变，该突变使Agouti信号蛋白与受体结合能力下降，最终导致小鼠的毛色由浅灰色变为深灰色.

摘要:目的 建立脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）/D-氨基半乳糖（D-galactosamine，D-GalN）诱导小鼠急性肝损伤模型.方法 40只雌性C57BL/6小鼠用于观察8种不同LPS与D-GalN剂量配比联合刺激后小鼠存活时间，以确定模型建立的最佳剂量.使用腹腔注射最佳剂量染毒32只雌性C57BL/6小鼠，分别在0、1、4、8 h处死，每组8只，0 h注射相同剂量生理盐水作为对照.观察染毒后小鼠肝组织病理损伤，检测血清中ALT及炎症因子IL-6、MCP-1和TNF-α表达水平变化.结果 通过观察小鼠存活时间，确定腹腔注射最佳染毒剂量为LPS（2.5 mg/kg）/D-GalN（0.3 g/kg）；小鼠染毒后肝组织呈进程性病变，最终发展为肝脏弥漫性坏死，肝细胞核崩解.与对照组相比，血清ALT显著升高（P<0.001），IL-6、MCP-1、TNF-α均在1 h后达到最高水平（P<0.001），然后持续下降.结论 成功建立LPS/D-GaIN诱导小鼠急性肝损伤模型，为探索急性肝损伤的致病机制以及药物干预治疗提供有效的动物模型.

摘要:目的 采用多因素刺激方法建立吻合人类“肝郁脾虚泄泻”疾病特征的大鼠模型，并选取操作简单、结论实时、科学经济的评价指标.方法 将幼年SD大鼠随机分为空白组和模型组，模型组采用母婴分离、束缚刺激、直肠醋酸刺激三种因素复合造模，选择不同时间测定大鼠体重变化、直肠敏感性、大鼠粪便分型积分及粪便含水量等指标，客观验证肝郁脾虚泄泻模型是否成功.结果 模型大鼠出现食欲减退，饮水量增大，尿液减少的病理现象，部分大鼠出现活动增加、甚至躁狂.粪便积分在5～7分，粪便含水量远远高于正常组大鼠，而肠道敏感性显著增加. 结论 该模型较好的模拟了肝郁脾虚泄泻的临床表现，能满足该类疾病的相关研究.

摘要:目的 探讨cAMP/PKA-pCREB信号通路是否在康复训练促进的缺血性脑卒中大鼠运动功能的恢复方面发挥作用. 方法 采用Longa改良线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型（middle cerebral artery ischemia-reperfusion model，MCAO），造模成功的大鼠随机分为自然恢复组（n = 24）、自然恢复+Rp-cAMP组（n = 24）、康复训练组（n = 18）和康复训练+Rp-cAMP组（n = 18）.同时设立假手术组（n = 12）.于侧脑室注射Rp-cAMP 后立即进行MCAO模型的制备.训练组大鼠于术后48 h 开始每天给予平衡木、转棒及滚筒训练.采用平衡木试验评定大鼠的运动功能.酶联免疫法（ELISA）检测缺血灶周围的脑组织内PKA表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测pCREB蛋白表达，同时采用免疫组化法对pCREB进行定位检测.结果 （1）运动功能评分结果揭示，自然恢复+Rp-cAMP组大鼠的运动功能低于自然恢复组，提示Rp-cAMP可抑制脑缺血大鼠运动神经功能的恢复；康复训练组大鼠的运动功能明显高于自然恢复组，也高于康复训练+Rp-cAMP组，提示Rp-cAMP明显减弱康复训练促进脑缺血大鼠运动神经功能的恢复；（2）于术后2 d、7 d、14 d、21 d检测缺血灶周围的脑组织PKA、pCREB的蛋白表达结果显示：康复训练组明显高于自然恢复组，同时高于康复训练+Rp-cAMP组，提示康复训练促进脑缺血大鼠的PKA、pCREB蛋白的表达，且Rp-cAMP明显抑制了康复训练促进脑缺血大鼠的PKA、pCREB蛋白的表达. 结论 cAMP/PKA-pCREB信号通路可能介导康复训练促进的脑缺血大鼠运动功能的恢复.

摘要:目的 分析脂多糖（LPS）造模方法对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠的肺支气管上皮细胞多药耐药相关蛋白1（MRP1）功能的影响.方法 利用LPS造模方法制备COPD模型大鼠，设置正常对照组、造模14 d组和造模28 d组，分别测定其呼吸功能；以酚红外排水平评价大鼠肺支气管上皮MRP1的功能；同时采用免疫组化法分析各组大鼠肺支气管上皮MRP1的表达.结果 与正常对照组比较，LPS处理组造模进程中随时间的延长大鼠的各项肺功能指标明显下降；静脉给予酚红后其BALF中酚红浓度与血浆酚红浓度的比值降低；其肺支气管上皮MRP1蛋白表达显著性降低.结论 LPS造模方法制备COPD模型大鼠，随着造模的进程，其肺支气管上皮细胞MRP1蛋白的功能随之下调.

摘要:目的 比较两种不同品系小鼠食物过敏模型的敏感性和肠道菌群变化的差异，旨在为食物过敏模型的建立提供依据.方法 分别对30只4～5周龄BALB/c和KM雌鼠用卵清蛋白（ovalbumin，OVA）致敏建立食物过敏模型，ELISA法检测小鼠血清OVA特异性IgE水平；HE染色观察空肠组织形态；采用DGGE技术检测粪便菌群的变化.结果 （1）30只致敏的BALB/c小鼠中有27只血清OVA特异性IgE水平明显升高（P<0.001），而30只致敏的KM小鼠中有21只，且BALB/c小鼠空肠绒毛炎症细胞浸润、上皮脱落及坏死比KM小鼠明显；（2）食物过敏造模后，BALB/c小鼠肠道菌群的改变明显（P<0.001），而KM小鼠中仅有均匀度改变显著（P<0.05）；（3）BALB/c小鼠和KM小鼠对照组肠道菌群的丰富度、Shannon指数及均匀度都有差异.结论 BALB/c小鼠对OVA的敏感性高于KM小鼠，不同品系小鼠肠道菌群结构不同，OVA处理后，BALB/c小鼠菌群的改变比KM小鼠更明显.

摘要:目的 通过观察血管源性头痛清醒动物模型中Fos阳性细胞在三叉神经节及三叉神经脊束核尾侧亚核的分布情况，明确两种非甾体类抗炎药NSAID对乙酰氨基酚及布洛芬在头痛控制中，在颅内特定区域的作用机理.方法 30只雄性SD大鼠随机分为对照组（生理盐水组）、对乙酰氨基酚组、布洛芬组，每组给药后50 min分别给予频率为20 Hz、电流为3～5 mA和脉宽为0.25 ms的电刺激，刺激后给予大鼠灌注固定取脑，分别在颅内取三叉神经节及三叉神经脊束核尾侧亚核制作石蜡切片，进行免疫组织化学染色，利用Image J软件对阳性细胞进行计数统计.结果 电刺激后盐水组与非甾体类药物组在双侧三叉神经节、三叉神经脊束核尾侧亚核Fos蛋白表达的差异具有显著统计学意义，对乙酰氨基酚组与布洛芬组在双侧三叉神经节、三叉神经脊束核尾侧亚核Fos蛋白表达未见统计学差异.结论 给予非甾体类抗炎前后在双侧三叉神经节、三叉神经脊束核尾侧亚核的Fos表达的改变提示三叉神经节、三叉神经脊束核尾侧亚核参与了疼痛的传递和表达以及药物对疼痛控制的药理过程.

摘要:目的 探讨PCR-测序法在啮齿类动物汉坦病毒临床检测中的应用价值.方法 以Genbank 7种血清亚型24株汉坦病毒代表性毒株为基础，从病毒基因S片段序列设计引物，采用邻位相连法进行系统进化分析，以该方法对浙江省近年从野生啮齿类动物中临床分离的汉坦病毒毒株进行分型鉴定.结果 所建系统发育树将所分析的毒株分为5个区域，引起HFRS的四种血清型具有较稳定的拓扑结构，且能与引起HPS的血清型进行区分.11株实验毒株进行PCR扩增和测序，结果表明该引物具有高度的敏感性和特异性，其中9株浙江省分离的血清型未知毒株的系统发育分析发现其包含引起HFRS的3株HTN和1株SEO血清型，其他5株属两种未知血清型.讨论 所建立的PCR-测序法具有用于临床检测汉坦病毒的价值.

摘要:目的 应用胆总管内注射无水乙醇建立SD大鼠胆道闭锁模型. 方法 将SD雄性大鼠随机分为实验组和对照组，在实验组中经静脉留置针插入胆总管注入无水乙醇，对照组注入生理盐水.观察SD大鼠的生化及病理结果. 结果 在实验组中SD大鼠根据病理及生化检测分为肝功能持续恶化组和肝功能修复组，肝功能持续恶化组在8周以后生化明显高于对照组及肝功能修复组.常规HE染色及SMA、Masson染色也出现明显变化.结论 胆总管无水乙醇注射诱导胆道闭锁模型是一种可靠的动物模型，此动物模型会帮助人们进一步研究胆道闭锁提供更多的研究手段.

摘要:目的 从亚细胞超微结构的角度揭示其抗冻能力优于正常孵化胚胎的原因.方法 利用透射电子显微镜观察小鼠休眠胚胎与正常孵化期胚胎在细胞连接和各细胞器形态与分布上的差异，以及冻融培养后的变化，并进行相关比较分析.结果 通过亚细胞结构对比分析发现：冷冻前小鼠休眠胚胎为紧缩状，处于能量代谢较低的“基态”，通过冻融后培养，细胞器结构恢复与正常孵化胚胎冷冻前相似；而正常孵化胚胎经过冻融后，线粒体数量减少，细胞核松散，异染色质增多.结论 小鼠休眠胚胎与正常孵化胚胎冻融后相比，其细胞状态更有利于物质储存及能量代谢，表明小鼠休眠胚胎从亚细胞超微结构的角度比其正常孵化胚胎更具抗冻性.

摘要:目的 探讨CD82对着床窗口期小鼠子宫内膜上皮细胞内整合素αV、β3、E-cadherin以及β-catenin蛋白表达的影响. 方法 将构建的CD82腺病毒转染原代培养的小鼠子宫内膜上皮细胞.检测妊娠小鼠子宫内膜上皮细胞转染CD82腺病毒后，细胞内整合素αV、β3、E-cadherin和β-catenin的表达变化情况.结果 提取的上皮细胞纯度为（93.2±0.6）%.构建的CD82腺病毒转染效率达到（92.0±4.5）%，转染原代培养的小鼠子宫内膜上皮细胞24 h后，RT-PCR检测发现CD82基因表达明显升高.转染48 h后，Western blot检测CD82蛋白水平明显升高.免疫细胞化学检测妊娠第4天的小鼠子宫内膜上皮细胞转染CD82腺病毒后，整合素αV、β3以及β-catenin的表达较未转染组均有明显上升（P<0.05），但E-cadherin的表达量无明显变化（P>0.05）.结论 胚胎植入前，CD82可能影响小鼠子宫内膜上皮细胞内整合素αV、β3和β-catenin的蛋白表达.

摘要:目的 探索生活环境条件（居住环境条件和动物之间相互作用的因素）对中国树鼩血激素水平和心理行为的影响.方法 采用空间大小不等的笼具饲养中国树鼩，或给予利血平，分别在15、30、60、120、180 d时用乙醚吸入麻醉，从心脏采血，用放射免疫法检测血液中睾酮（testosterone，T）、雌二醇（estradiol，E2）、内皮素（endothelin，ET）、肾上腺素（adrenaline，A）和去甲肾上腺素（noradrenaline，NA）水平.结果 ①将中国树鼩分别放入大笼（D1组）、小笼（X1组）单独饲养15、30、60、120、180 d时检测，与大笼（D1组）比：小笼（X1组）T水平显著降低（P<0.01），A、NA、ET水平显著升高（P<0.01）.②小笼和大笼临近饲养（X2组）饲养15、30、60、120、180 d时检测，X2组T、A、NA水平均比小笼单独饲养（X1组）显著升高（均P<0.01）.③利血平各组A、NA水平均显著降低（均P<0.01）. ④小笼单独饲养（X1组）、小笼和大笼临近饲养（X2组）的动物均出现猝丧、食欲降低、睾丸萎缩、阴茎外露下垂等应激症状.利血平组中国树鼩均出现性情温顺，活动显著减少，食欲降低，停喂利血平，放入大笼饲养，动物逐渐恢复到正常生活状态.结论 居住环境条件和动物之间的相互作用均能引起中国树鼩血激素水平变化和心理行为的改变.

摘要:目的 比较不同治疗方案对H22肝癌荷瘤小鼠的疗效.方法 采用H22腋下实体瘤KM小鼠及小鼠标准化、计量化辨证方法，观察复合化疗方案局部注射、索拉非尼口服，及两者联合应用等对小鼠抑瘤率和证候的影响.结果 所选用3个治疗方案均具有一定的抑瘤作用，综合对气血阴阳证候的影响及胸腺和脾脏重量，以复合化疗方案局部注射联合索拉非尼口服最好.结论 局部介入联合索拉非尼口服方案疗效较好.

摘要:目的 建立一种简洁稳定、特异灵敏的检测泰泽病原体（Tyzzer’s organism）的反向斑点杂交方法（reverse dot blot，RDB）.方法 根据泰泽病原体16S rDNA保守基因组序列设计引物和特异性探针，上游引物用生物素标记，进行PCR扩增，建立反向斑点杂交方法，用此法进行了特异性和灵敏度实验，同时，用RDB、ELISA和IFA对41只小鼠、38只大鼠进行了检测.结果 RDB特异性强，最低检测限为4.5 ng/μL.对79例实验动物的检测中，与ELISA检测结果一致性为100%，阳性率是7.59%（6/79）；与IFA一致性为92.4%（73/79），IFA阳性率是0%.结论 建立了PCR扩增与分子杂交相结合的准确、灵敏、特异的泰泽病原体反向斑点杂交检测方法.

摘要:目的 筛选豚鼠基因组的多态性微卫星标记，为豚鼠遗传质量控制及基因定位等工作奠定基础.方法 采用磁珠富集法和豚鼠基因组数据库筛选法获取微卫星位点序列，通过分析和初步筛选，挑选部分候选位点，根据其序列设计引物，对5种不同来源的豚鼠基因组DNA标本进行PCR扩增，以期获得多态性分子标记. 结果 本实验采用磁珠富集法共获得微卫星序列304个，设计引物125对，最终获得多态性位点1个，暂未发现多态性的特异性位点17个；用数据库筛选法共获得微卫星序列292个，设计并合成相应引物178对，最终发现多态性位点25个，暂未发现多态性的特异性位点28个.结论 本实验获得26个多态性微卫星标记，45个潜在的候选标记，为微卫星标记在豚鼠遗传质量监测及突变基因定位等工作的应用奠定了基础.

摘要:目的 观察出生后小鼠不同部位皮肤毛囊早期发育生长差异及细胞色素C的表达分布.方法 对新生1～9日龄的KM小鼠背部、尾部和触须部皮肤取材，进行HE染色，用二步法免疫组织化学对组织进行细胞色素C进行表达分布检测.结果 新生小鼠不同部位皮肤毛囊发育差异很大，这种差异不仅体现在形态差异上，而发育时间的差异也十分明显.小鼠出生后背部皮肤和尾部皮肤的毛囊发育都经过了一个非线性的发育和生长期，过了非线性的发育和生长期才开始快速生长，相比较尾部发育略迟于背部.触须部毛囊发育特征和背部尾部差异很大，一出生便可看到较成熟的触毛，没有经过稳定期便开始发育.结论 通过形态学比较，结合CytC表达分布水平，发现新生小鼠不同部位皮肤毛囊早期发育存在形态和时间上的差异.

摘要:目的 开发一种新的培养人胚胎干细胞（hESCs）的包被基质，使hESCs的培养更加简便.方法 用甲醇固定的小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）作为包被基质，人胚胎干细胞系X-01在该基质上生长，每隔5～6 d传代一次，培养10代后，对人胚胎干细胞特性进行检测，包括细胞形态、碱性磷酸酶染色、相关多能性基因的表达和分化能力.结果 hESCs在新的基质上生长良好，经10次传代后仍能保持典型的hESCs克隆形态.碱性磷酸酶染色阳性，免疫荧光染色 Oct4、SSEA4、Tra-1-60 为阳性，体外分化可形成拟胚体.结论 此种固定的基质可以大量制备，长期保存，并可以长期维持hESCs的未分化状态，为人胚胎干细胞的体外扩增探索出了一个新的途径.

摘要:目的 采用电生理的研究方法，观察脑源性神经营养因子（BDNF）基因修饰的骨髓间充质干细胞对脊髓损伤的修复作用.方法 随机将大鼠分成 3组：空白组10只（只切除椎板，暴露脊髓硬脊膜）；SCI 组10只；SCI术后细胞移植组10只；从以上三组大鼠随机抽取8只于细胞移植后1 d、7 d、14 d、21 d、30 d、60 d进行SEP（皮层体感诱发电位）、MEP（运动诱发电位）等电生理检测技术，并观察大鼠的运动评分恢复程度.结果 细胞移植4d后，大鼠饮食和活动开始增加；后肢变化过程如下：损伤后1~4 d损伤侧后肢迟缓性瘫痪，拖地行走，损伤对侧后肢由损伤初期的运动减弱逐渐恢复，损伤后5~9 d损伤侧后肢痉挛性瘫痪；10~14 d损伤侧下肢恢复少量活动，损伤对侧后肢恢复至较损伤前稍弱的状态；15~21 d损伤侧后肢活动能力较之前有明显改善，至30 d损伤侧后肢活动能力及肌张力恢复程度最明显，30 d以后无更明显改善.免疫组化发现损伤处诱导标记的骨髓间充质干细胞存活，行为学观察发现细胞移植改善了损伤大鼠运动能力.结论 骨髓间充质干细胞经BDNF基因修饰后可以促进脊髓损伤大鼠的神经再生及部分传导功能恢复.

摘要:目的 探讨固本抑瘤Ⅲ号方以及与吉西他滨联合治疗人胰腺癌裸鼠异位移植瘤的抑瘤作用.方法 将40只荷瘤裸鼠随机分为对照组、吉西他滨组、固本抑瘤Ⅲ号联合吉西他滨组、固本抑瘤Ⅲ号组，每组10只.于接种后第8天开始给药，观察指标为瘤重、裸鼠体重、移植瘤体积.结果 吉西他滨组、固本抑瘤Ⅲ号联合吉西他滨组、固本抑瘤Ⅲ号组的抑瘤率分别为49.2%、68.9%和28.0%.固本抑瘤Ⅲ号联合吉西他滨组较吉西他滨组抑瘤作用更强（P<0.05）.吉西他滨组、固本抑瘤Ⅲ号联合吉西他滨组、固本抑瘤Ⅲ号组移植瘤体积均较对照组明显降低，差异有显著性.固本抑瘤Ⅲ号联合吉西他滨组体重下降明显，体重较对照组、吉西他滨组及固本抑瘤Ⅲ号组明显下降，差异有显著性.结论 固本抑瘤Ⅲ号方具有增加吉西他滨化疗治疗人胰腺癌裸鼠腋下移植瘤疗效的作用.