摘要:目的 探讨建立C57BL/6 J 小鼠黑色素瘤肺转移模型的影响因素,包括肿瘤的接种方式?细胞接种数量和成瘤周期?方法 体外培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10?1)取6 ~8 周龄,雄性小鼠18 只,随机分三组,每组6 只,分别采取尾静脉注射?腹腔注射和皮下注射方式,每只小鼠注射100 μL(3 × 10⁶ 个细胞)B16F10 细胞悬液,2周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;2)分3 组,同上,经尾静脉分别注射3 × 10⁶ 个细胞?1 × 10⁶ 个细胞?3 ×10⁵ 个细胞,2 周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;3)分3 组,同上,尾静脉注射1 × 10⁶ 个细胞,分别于1 周?2 周?3 周解剖小鼠,观察黑色素瘤的生长和转移情况?结果 1)尾静脉注射小鼠黑色素瘤细胞,小鼠发生肺转移的成功率为100%,而腹腔注射和皮下注射未发生肺转移?2)接种小鼠黑色素瘤细胞数量为1×10⁶ 时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量适中;接种细胞数量为3 ×10⁶ 时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量过多;接种细胞数量为3 ×10⁵ 时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量较少?3)尾静脉注射1 ×10⁶ 个小鼠黑色素瘤细胞,饲养2 周后,可以观察到黑色素瘤细胞明显的肺部转移,且不会导致小鼠死亡;饲养3 周,黑色素瘤细胞肺部转移数量过多,且小鼠死亡过半;饲养1 周,黑色素瘤细胞肺部转移数量较少?结论 经尾静脉注射1 ×10⁶ 个小鼠黑色素瘤细胞,生长2 周时间,为构建C57BL/6 J 小鼠黑色素瘤肺转移模型的推荐方法?

摘要:目的 检测瘦素受体缺陷的Lepr ^db/db 小鼠体内肝?肾中硫辛酸合成酶(LIAS)的表达?方法 分别选取10 周龄Lepr ^db/+ 与Lepr ^db/db 雄性小鼠各8 只,禁食8 h 后,测量两组小鼠体重及空腹血糖(FPG);用乙醚麻醉动物,经腹主动脉采血,处死动物,取肝?肾并称重?取肝右叶和左肾经4% 多聚甲醛固定,进行肝?肾组织病理学检查?分离血清,用试剂盒检测血清中CHO?TG?HDL?LDL 含量?应用线粒体分离试剂盒分离肝?肾组织线粒体,提取总蛋白,采用western blot 方法检测LIAS 蛋白的表达?结果 组织病理观察,发现Lepr ^db/+ 小鼠肝肾结构完整,而Lepr ^db/db 小鼠肝细胞出现脂肪变性,肾小球肥大,基底膜增厚,系膜区增宽;与Lepr ^db/+ 小鼠比较, Lepr ^db/db 小鼠体重?GLU?CHO?TG?LDL 及AST 明显增高,差异有显著性( P < 0.05);与Lepr ^db/+ 小鼠比较, Lepr ^db/db 小鼠肝肾线粒体内LIAS 蛋白表达量均增高,差异有显著性( P <0.05)?结论 瘦素受体缺陷的Lepr ^db/db 小鼠存在糖脂代谢紊乱?肝肾细胞损伤?肝肾组织线粒体LIAS 蛋白的表达增高?

摘要:目的 通过对海洋青鳉鱼视觉器官的结构与发育情况进行组织观察,为进一步研究其行为学提供理论依据,同时也可为研究其他相关物种提供实验方法?方法 将组织进行石蜡包埋切片处理,显微观察?结果海洋青鳉鱼的视觉器官发育快速,胚胎时期就已分化出眼球的色素层,有明显的眼球区域;刚出膜时,视网膜发育不完整,未分化出外核层和外网状层;出膜1 d,视网膜结构分化基本完成;6 d,已有明暗视觉功能;14 d,观察到明显的视网膜运动现象;23 d,视网膜结构发生较大变化,与该阶段海洋青鳉鱼的生活习性转变有密切联系;9 ~14 月龄,视网膜各层的厚度均有所减小,表明视觉有一定程度退化?同时,内核层分化明显,感光细胞层的视椎细胞与视杆细胞呈紧密镶嵌的结构?结论 海洋青鳉鱼视觉器官的发育过程阶段性明显,且有较好的光敏感性和视敏度强的特点?

摘要:目的 构建中国地鼠口腔颊黏膜癌(OSCC)中差异表达的miRNA 和mRNA 表达谱,初步预测与OSCC发生发展相关的miRNA 和mRNA?方法 运用新一代高通量测序技术构建miRNA 和mRNA 表达谱,通过Gene Ontology 功能富集和KEGG Pathway 分析预测与OSCC 发生发展相关的miRNA 和mRNA?结果 成功构建中国地鼠口腔颊黏膜癌中差异表达的miRNA 和mRNA 表达谱,共发现11 个已知miRNA?3 个新miRNA 显著性差异表达和194 个mRNA 差异表达,且一个miRNA 可调控多个mRNA,多个miRNA 靶向调控某个mRNA?结论 本实验OSCC 中差异表达的miRNA 通过调控mRNA 形成复杂的调控网络,在口腔癌的发生发展中发挥重要作用,为口腔癌的发生?发病机制,及临床治疗及预后判断提供理论依据?

摘要:目的 比较分析WHBE 兔和日本大耳白(Japanese white rabbit, JW) 兔腹泻型肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)模型肠道菌群的差异性?方法 WHBE 兔和JW 兔各16 只,按品系随机分为两组,即正常对照(NC)组和IBS 模型组,每组8 只?采用湿热应激复合番泻叶方法建立腹泻型IBS 兔模型,观察实验兔的腹围指数?粪便含水量?结肠转运功能,处死后分别取结肠组织和结肠内容物进行病理组织学观察和肠道菌群多样性分析?结果 与NC 组比,IBS 模型兔均出现腹围指数和粪便含水量增加,结肠转运时间缩短,但结肠组织未见病理性改变;同时IBS 模型兔Shannon 指数和Chao1 指数均显著下降( P <0.05)?根据OTU 分类分析的结果,厚壁菌门和拟杆菌门为兔肠道菌群的绝对优势菌群?与NC 组比较,WHBE 兔IBS 模型组厚壁菌门?疣微菌门?绿弯菌门?Akk 菌属?链球菌属均明显下降( P < 0.05, P < 0.01),拟杆菌门和rc4-4 菌属丰度显著上升( P < 0.05, P <0.01);而JW 兔IBS 模型组优杆菌属和罕见小球菌属均显著上升( P < 0.05),乳酸杆菌属?粪杆菌属?韦荣球菌属和链球菌属均显著下降( P <0.05)?与JW 兔NC 组比,WHBE 兔NC 组厚壁菌门?Odoribacter 菌属?韦荣球菌属?链球菌属?颤螺旋菌属?Pseudoflavonifractor 菌属较低( P <0.05, P <0.01),拟杆菌门?疣微菌门?优杆菌属?粪杆菌属?Akk 菌属较高( P <0.05, P <0.01)?与JW 兔IBS 模型组比,WHBE 兔IBS 模型rc4-4 菌属?粪杆菌属?梭菌属的丰度较高( P <0.05, P <0.01),而厚壁菌门?多尔氏菌属?粪球菌属和罕见小球菌属的丰度则较低( P < 0.05, P <0.01)?结论 IBS 模型兔存在肠道菌群失调,导致菌群多样性降低;WHBE 兔和JW 兔IBS 模型肠道菌群变化均具有其自身的特点,且具有明显的差异性?

摘要:目的 用外部特征观察与尿液代谢组研究相结合的方式,对维吾尔医异常黑胆质证大鼠模型进行生物学标志评价与讨论?方法 采用维吾尔医异常黑胆质理论建立大鼠动物模型,并对其各项外部指标如毛发?舌象?睡眠?粪便?情绪?体重增长率等进行观察和评分,采用核磁共振氢谱(¹H-nuclear magnetic resonance, ¹H-NMR)对其尿液进行检测与分析?结果 异常黑胆质证模型组大鼠与对照组相比较外部特征发生了明显的变化,包括粪便干燥且硬,尿量减少且颜色加深,皮毛干燥,舌苔暗紫并有瘀斑,体重增长率降低等;尿液代谢物中23 种代谢物含量明显降低包括丙酸酯?乳酸?丙氨酸?丙酮酸?乙酸?乙酰胺?糖蛋白?丙酮?甲胍?肌氨酸?鸟氨酸?甘氨酸?肌酸?肌酸酐?肌胺酸酐?β-半乳糖?尿刊酸酯?酪氨酸?苯丙氨酸?马尿酸?氨基马尿酸?甲酸和赖氨酸等,而尿素?柠檬酸?尿囊素和α-酮戊二酸等4 种代谢物含量明显升高?结论 模型组大鼠在异常黑胆质证发生发展过程中不但外在表形发生明显变化,而且也发生了内在多种代谢通路的明显变化,尿液代谢产物的明显异常可能与异常黑胆质证的生物学机制有关?

摘要:目的 通过将不同饲料利用效率猪的粪便移植至伪无菌小鼠,探讨其对受体小鼠生长性能的影响规律,并初步揭示其机制?方法 使用36 头28 kg 左右的杜× 长× 大阉公猪进行42 d 单笼饲养(自由采食)并测算其饲料转化效率?实验结束时将36 头猪根据饲料转化效率分为高?中?低3 组,采集三组猪的新鲜粪便,通过灌胃移植到经广谱抗生素处理过的小鼠中,监测粪便移植后小鼠的生长性能变化?采用全收粪法测定饲料利用效率高?中?低三组猪的营养物质消化率,并采用16S rRNA V3 -4 可变区扩增测序对猪和小鼠的粪便微生物组成进行分析比较?结果 将不同饲料利用效率猪的粪便移植至广谱抗生素处理的伪无菌小鼠后,小鼠重现了猪的生长性能表型;在肠道微生物的组成结构方面,高饲料转化效率猪及其高生长性能的受体鼠,肠道微生物的物种丰富度和微生物多样性相对较高;高饲料利用效率猪的总能消化率( P =0.01)显著增加,产气短杆菌的丰度显著提高,且其粪便移植后受体小鼠的肠球菌和阿克曼氏菌丰度也显著高于低饲料利用效率的受体小鼠,表明肠道微生物在能量的高效利用方面起着重要的作用?结论 移植不同饲料利用效率猪的粪便可定向改变伪无菌小鼠肠道微生物的物种丰富度?微生物多样性及其生长性能?高饲料利用效率猪的优势主要在于能量消化利用效率较高,肠道中与能量高效利用相关微生物丰度相对较高?

摘要:目的 探讨实验室饲养和野外生存条件下东方田鼠肠道菌群的分布和差异?方法 应用高通量测序技术测定实验室饲养和野外捕捉东方田鼠的肠道细菌16S rDNA?V4?V5 区序列,统计操作分类单元(OTUs)数量,分析菌群物种丰度?分布及差异性?结果 稀疏曲线表明取样数量合理,测序充分?在门水平,实验室饲养和野外生存的肠道菌群分布和占比基本相似,实验组有1 个独有的门,即黏胶球形菌门(Lentisphaerae),野生组有3 个独有的门,分别是梭杆菌门(Fusobacteria)?奇古菌门(Thaumarchaeota)和未分类的门,丰度差异最大的为软壁菌门(Tenericutes)?在属水平,野外东方田鼠肠道细菌较实验室饲养的丰富,丰度差异最大的为瘤胃球菌属(Ruminococcus)?结论 获得了实验室饲养和野外生存条件下东方田鼠肠道菌群结构和差异性,进一步充实了东方田鼠基础生物学数据?

摘要:目的 探讨系统性红斑狼疮(简称狼疮)TC 小鼠肠道微生物菌群结构与抗dsDNA 抗体之间的关系?方法 ELISA 法检测狼疮TC 小鼠血清抗dsDNA 抗体,然后分别收集dsDNA 阳性组和阴性组的小鼠粪便,利用Illumina HiSeq 2500 高通量测序,进行粪便样本16S 测序,比较两组之间的肠道微生物菌群结构与抗dsDNA 抗体水平之间的关系?结果 通过ELISA 检测抗体结果和小鼠粪便高通量测序结果显示,dsDNA 阳性组TC 小鼠的物种群落多样性显著低于dsDNA 阴性组;同时,两组TC 小鼠肠道微生物分别在门水平Chloroflexi(绿弯菌门);纲水平Betaproteobacteria(β 变形菌纲)?Deltaproteobacteria(δ 变形菌纲) 和Ktedonobacteria(纤线杆菌纲);目水平Burkholderiales( 伯克氏菌目)?Desulfovibrionales ( 脱硫弧菌目) 和Ktedonobacterales ( 纤线杆菌目); 科水平Alcaligenaceae(产碱菌科)和Desulfovibrionaceae(脱硫弧菌科);属水平Parasutterella(副萨特氏菌属)和Desulfovibrio(脱硫弧菌属)上差异有显著性( P <0.05)?结论 狼疮TC 小鼠肠道微生物菌群结构与抗dsDNA 抗体高度相关,本研究为进一步阐明肠道微生物菌群与系统性红斑狼疮发病机制的关系提供依据?

摘要:目的 比较Zmu-1:DHP 与DHP 两品系豚鼠眼球相关生物学特性,并初步探索Zmu-1:DHP 豚鼠自发性近视产生的视网膜相关机制?方法 通过对Zmu-1:DHP 近交系豚鼠和DHP 豚鼠屈光度?角膜曲率与眼轴长度的测定,进行两品系眼球相关生物学特性比较,并对筛选出的自发性近视Zmu-1:DHP 豚鼠和DHP 豚鼠进行视网膜组织结构观察和视网膜信号因子mRNA 的表达测定?结果 3 周龄时,Zmu-1:DHP 豚鼠近视率90.21%,DHP豚鼠近视率18.00%; 4 ~12 周,随周龄增长,Zmu-1:DHP 豚鼠左右眼近视度数与眼轴长度大于DHP 豚鼠,角膜曲率小于DHP 豚鼠,两者比较差异有显著性( P <0.01)?视网膜组织结构观察显示,Zmu-1:DHP 豚鼠较DHP 豚鼠视网膜外核层薄,细胞体积小,分布数目少,脉络膜萎缩变薄,色素上皮细胞层未见明显色素颗粒,而DHP 豚鼠色素上皮细胞层内分布有大量棕黄色色素颗粒?PCR结果显示,Zmu-1:DHP 豚鼠酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)表达降低( P <0.01),酪氨酸激酶(tyrosine kinases,TK)表达增强( P <0.01),诱导型NO 合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)?神经型NO 合成酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)?碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast cell growth factor,bFGF)和转化生长因子β(transforming growth factor β,TGFβ)的表达增强( P < 0.05),视黄醛脱氢酶(retinal dehydrogenase,RALDH)和醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)虽然表达增强,但差异无显著性?结论 Zmu-1:DHP 豚鼠自发性近视高发,为轴性近视,其分子机制与视网膜近视信号因子的调控有关?

摘要:目的 建立一种高效的应用TaqMan 探针荧光定量PCR 技术对Lepr ^{db/ +} 小鼠子代基因分型的方法?方法 提取228 例Lepr ^{db/ +} 小鼠子代鼠尾DNA,针对Lepr 基因的突变位点(rs1801133)设计1 对PCR 引物和2 条TaqMan 探针?设定条件进行实时荧光PCR 扩增,用SDS 软件对SNP 位点进行分型?通过2 月龄动物的肥胖表现型验证并进行Hardy-Weinberg 平衡检验?结果 用建立的TaqMan 探针荧光定量PCR 方法对228 份样本进行检测,其中GG 基因型64 份,基因型频率为0.1929;GT 基因型123 份,基因型频率为0.5395; TT 基因型41 份基因型频率为0.2807?TaqMan 探针荧光定量PCR 方法分型结果与通过肥胖表现型分型结果比较,灵敏度为97.56%,特异度为99.47%?结论 应用TaqMan 探针荧光定量PCR 技术可实现对Lepr ^{db/ +} 小鼠子代基因位点的早期分型检测,方法简便,高效?

摘要:目的 结合免疫磁珠分离技术和流式细胞术两种方法,对大鼠外周血突变型红细胞进行富集和检测,优化大鼠外周血Pig-a 基因突变试验方法?方法 用20?40 和80 mg/ (kg·bw)剂量的N-乙基-N-亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea, ENU)连续3 d 给予SD 大鼠,在染毒前?染毒后第7?14 和28 天分别采集大鼠外周血,经免疫磁性分离柱富集RET ^CD59- 和RBC ^CD59- ,用流式细胞术分别对免疫磁珠分离柱前和柱后的外周血红细胞进行计数?结果 与对照组相比,ENU 各剂量组的RETCD59- 和RBCCD59- 发生率均显著升高( P < 0. 05);采用免疫磁珠分离技术后,可以在3 min 内完成一个样品的Pig-a 基因突变检测,分析的RET ^CD59- 或RBC ^CD59- 细胞数量分别最高可达2 ×10 ⁴ 个或9 ×10 ⁴ 个?结论 本研究联合运用免疫磁珠分离术和流式细胞术,建立并优化了大鼠体内Pig-a 基因突变试验方法,实现了高通量检测,提高了试验的准确性和效率?

摘要:目的 以基因工程技术制备猴免疫缺陷病毒(SIV)的SIV30 蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法(IC)用于特异性检测实验猴血清中抗SIV 的抗体IgG?方法 应用原核表达载体pGEX -4T -1 构建SIV SIV30基因的重组表达质粒,并在感受态细胞BL21 中表达,将该重组蛋白纯化后作为诊断抗原,建立免疫梳标准化检测程序,并应用于临床检测?文字结果 最佳抗原包被量为0.02 mg/ mL;制备好的IC 均能够特异性检测到相应的SIV 阳性血清而不与其他病毒血清间发生交叉反应,表明该检测方法特异性强;敏感性分析结果表明,SIV30 蛋白能够敏感地检测到1∶ 400 倍稀释的SIV 阳性血清;稳定性和重复性试验结果表明,同一样品重复检测3 次,变异系数(CV)均小于10%;利用该检测方法在对10 份可疑猴血清样品进行检测,IC 与ELISA 检测结果一致率为100.0%,Kappa=1.000?文字结论 原核表达了SIV30 蛋白,制备了IC,并应用于临床检测?该检测方法灵敏度高?特异性强?重复性好,具有良好的实用性?

摘要:目的 探讨盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)所致脓毒症大鼠模型凝血功能的变化?方法 采用CLP 诱导SD 大鼠脓毒症,术后8?16 和48 h 时检测相关的凝血功能指标,采用HE 染色观察肺?肾?肝?脾的组织病理学变化?结果 CLP 诱导的脓毒症大鼠12 d 生存率为30%,发病急且死亡率较高?在疾病发展的急性期内,CLP 大鼠8 h 时出现APTT 时间延长( P <0.05),16 h 时出现PT 时间延长( P <0.05),内源凝血途径的XII 活性及外源性凝血途径的VII 活性出现一过性抑制?TT 在48 h 出现延长( P <0.01)?FIB 的含量从16 h 开始逐渐增多( P <0.001)?与凝血和抗凝功能有关的其他重要指标中PLT 数量从8 h 逐渐下降( P <0.01);vWF:Ag 量从8 h 逐渐增多( P <0.001);D-D 量从16 h 逐渐升高( P <0.05);PS:Ag 量直到48 h 出现明显下降( P <0.001);而AT-III 含量无明显变化?病理检查发现肺?肾?肝?脾组织存在不同程度的损伤,但未显示明显的静脉血栓和出血特征?结论 大鼠脓毒症模型在急性期内存在凝血功能紊乱,但未观察到凝血功能引起的组织病理变化?

摘要:目的 探讨噪声污染对大鼠血激素水平和热休克蛋白-70(Hsp-70)表达的影响?文字 40 只雄性Wistar 大鼠随机分为对照组(正常饲养)和实验组(分为35?65?85 dB 三个组),每组10 只动物?每天刺激1 次,每次刺激30 min,连续刺激20 d?第21 天采血用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血液中去甲肾上腺素(NA),睾酮(T),多巴胺(DA),Hsp-70 水平?结果 ELISA 法检测发现,实验组(35?65?85 dB 组)大鼠体重比对照组分别减轻了23.45%,30.13%,35.64%,T 和DA 水平分别降低了9.12%?20.06%?37.99% 和15.49%?18.31%?24.88%;血NA 和Hsp-70 水平分别升高了35.08%?171.52%?197.86%和39.34%?195.09%?285.25%,差异均有显著性(均 P <0.01)?结论 噪声污染能显著影响大鼠血激素水平和热休克蛋白-70 的表达?

摘要:多模态融合的分子影像技术整合了多种分子影像技术的优势,已成为当前分子影像领域研究的热点和发展趋势?新近报道的七甲川菁(heptamethine cyanine)染料是一类具有肿瘤靶向性的近红外荧光(near-infrared fluorescence,NIRF)制剂?该染料独特的光学特征使其在肿瘤分子影像?靶向治疗和药物传递系统方面具有广阔的应用前景?纳米材料包裹该类染料可用于NIRF/ MRI 双模成像,标记核素后可实现NIRF/ PET 双模成像,共轭结合化疗药物后,可实现抗肿瘤药物的靶向传递,多个七甲川菁染料的复合物已被用作多模态成像,成为光热?光动力学和组合治疗肿瘤的新策略?

摘要:高效联合抗反转录病毒治疗(highly active anti-retroviral therapy, HAART)是艾滋病治疗的主要方法,但也是导致骨质疏松和骨量减少的重要因素之一,目前该治疗方法可能的发病机制尚不明确?其中,核苷类反转录酶抑制剂(nucleotide reverse transcriptase inhibitor,NRTI)和蛋白酶抑制剂(protease inhibitors,PI)在诱发骨质疏松症上具有重要作用?本文就NRTI 和PI 引发骨质疏松的流行病学?可能的相关机制做一综述?

摘要:大便失禁属于肛肠科疑难病,严重影响着患者的生活质量?目前大便失禁治疗方法繁多,疗效尚不肯定,作用机制尚不明确,因其动物模型尚不成熟导致动物实验等基础研究欠缺?本文总结?整理国内外几种典型的大便失禁动物模型的造模方法,进行了深入阐述,为今后大便失禁的深入研究奠定基础?

摘要:猫作为实验动物在医学研究中占有越来越重要的地位,尤其是对于神经学?生理学和毒理学的研究?与啮齿类动物相比,猫的生理学特性?解剖学特点?病理及生化反应,更接近于人类;与灵长类动物相比,具有经济?资源丰富等优点?因此,猫在人类疾病动物模型方面有广泛的应用前景?本文主要回顾和总结了近年来猫在眼科?神经系统?肿瘤等领域作为人类疾病动物模型的制作方法与研究概况?

摘要:Wolbachia 是一类存在于包括绝大多数昆虫在内的节肢动物以及线虫体内的细胞内共生菌,通过母系传递给子代?该菌能以多种方式调控宿主的生殖活动,包括诱导细胞质不亲和?孤雌生殖?杀雄?雌性化和增加雌性生殖力?本文对Wolbachia 的基础生物学及其分布?以及该菌对宿主果蝇的影响等进行了评述,并对与果蝇相关的Wolbachia 的研究现状及趋势进行了讨论?

摘要:卵巢癌是导致女性癌症死亡的第五大原因,其中75% 的卵巢癌患者检出时即为晚期?目前该病缺乏有效的早期筛查手段,同时临床治疗效果较差,已经成为严重威胁妇女健康的重大疾病?借助卵巢癌动物模型开展相关研究工作,是阐明其发病机制或者筛选有效的诊断?治疗措施的重要手段?目前,按照制备方法分类,该疾病模型主要分为有自发型?诱发型?移植型?基因干预型等四类造模方法?该模型所选择的动物主要有小鼠?大鼠?鸡?东方田鼠?长爪沙鼠等?本文结合近年来的文献报道,综述了卵巢癌动物模型制备方法,并介绍了各种方法制备的动物模型的评价标准及主要特点?