摘要:目的 研究益生菌干预下力竭性运动大鼠胃肠道功能的影响?方法 40 只SD 雄性大鼠随机分为安静对照组(NC),运动对照组(ME),安静给药组(NCY),运动给药组(MEY)?ME 与MEY 组进行6 周力竭训练,速度为19. 3 m/ min,坡度为5o,每天训练1 次,每周6 d?NCY 与MEY 组每日灌胃浓度为107 CFU/ mL 益生菌溶液10. 0 mL/ (kg·d)?6 周力竭训练结束后,检测大鼠血清中胃肠激素ghrelin?PYY?CCK?GLP -1?MTL 和GAS 指标含量,并采用RT?PCR 和Western blot 法检测大鼠胃和结肠组织中AQP4 的表达?结果 ME 组大鼠血清ghrelin 和PYY 含量均高于NC 组( P < 0. 01),而ME 组CCK?GLP -1?MTL 和GAS 含量均低于NC 组( P < 0. 01);NCY 组大鼠血清ghrelin?PYY 均低于ME 组( P < 0. 01),而CCK?GLP -1?MTL 和GAS 含量均高于ME 组( P < 0. 01);MEY组大鼠血清ghrelin 高于NC 组( P < 0. 05)而低于ME 组( P < 0. 01);MEY 组大鼠血清PYY 的含量低于ME 组( P < 0. 01);MEY 组大鼠血清CCK 含量低于NC 组( P < 0. 05)而高于ME 组( P < 0. 05);MEY 组大鼠血清GLP -1?MTL 和GAS 含量均高于ME 组( P < 0. 01)?ME 组大鼠胃肠组织AQP4 mRNA 和蛋白表达均低于NC 组( P <0. 01 或 P < 0. 05);NCY 和MEY 组大鼠胃肠组织AQP4 mRNA 和蛋白表达均高于ME 组( P < 0. 01 或 P <0. 05)?结论 力竭性运动引起大鼠胃肠激素含量发生变化以及AQP4 表达的上升与补充益生菌溶液密切相关,提示益生菌可能参与了胃肠激素的分泌和水代谢的过程?

摘要:目的 测定SPF 级CBA/ CaJ 小鼠的基础生物学指标,为更好利用该品系小鼠,从事生物医药等研究工作奠定基础?方法 选取6 周龄和12 周龄的CBA/ CaJ 雌性和雄性小鼠,分别称量不同性别小鼠的主要脏器重量,应用全自动血液生理?生化分析仪检测血液生理?生化指标并利用流式细胞仪检测外周血免疫细胞比例?结果 主要脏器重量显示同周龄(6 周或12 周)雌雄小鼠相比较,雄鼠体重?心脏?肝?肾重量均显著高于雌鼠( P < 0. 01);同性别CBA/ CaJ 小鼠,12 周龄雄鼠体重显著高于6 周龄( P =0. 000)?血液学生理指标显示6 周龄雄鼠MCV?RDW?PLT?P?LCR?BUN 及CHOL 均显著高于雌鼠( P < 0. 01),而雄性的MCHC 显著低于雌鼠( P =0. 000)?血液学生化指标显示12 周龄雄鼠的ALKP 显著低于雌鼠( P = 0. 001),CHOL 显著高于雌鼠( P = 0. 000)?12 周龄同性别CBA/ CaJ 小鼠MCV?RDW?MCH 及ALKP 明显低于6 周龄( P < 0. 01),而BUN 显著高于6 周龄( P < 0. 01)?外周血免疫细胞比例显示该品系小鼠B 细胞?T 细胞?NK 细胞和粒细胞都占有一定比例?结论 建立了CBA/ CaJ 小鼠的基础生物学数据?CBA/ CaJ 小鼠是具有免疫活性的小鼠,其龄期和性别因素对其基础生物学指标都有一定的影响?

摘要:目的 通过分析高脂高胆固醇饲喂的不去势(SHAM)?去势(CAS)和去势+ 睾酮处理(CAS + T)小型猪肝表达谱,探讨雄激素缺乏对高脂高胆固醇饲喂小型猪肝mRNA 可变剪接(alternative splicing,AS)的影响?方法 利用转录组测序(RNA?Seq)技术对SHAM?CAS 和CAS + T 小型猪肝表达谱进行测序,使用TopHat 软件筛选三组小型猪肝中差异AS 基因,并对三组样本中共有的差异AS 基因进行基因注释和代谢通路富集分析?结果 (1)去势和睾酮处理能够引起高脂高胆固醇饲喂小型猪肝mRNA 可变剪接发生变化;(2)SHAM vs. CAS 和CAS + Tvs. CAS 之间有113 个共有差异AS 基因,其中包括AGPAT6?NR1H4?PPARD 和GK 等糖脂代谢有关基因;(3)GO 和KEGG 分析结果表明,上述113 个差异AS 基因主要参与脂肪酸代谢?甘油酯代谢?葡萄糖反应以及脂肪细胞因子信号等生物学过程和通路?结论 雄激素缺乏可导致高脂高胆固醇饲喂小型猪肝mRNA 可变剪接发生改变,并且可能通过调控肝糖脂代谢进而影响高脂诱导的脂肪肝发病?

摘要:目的 观察宣肺方对内毒素诱导大鼠急性肺损伤mTOR/ S6K1 信号通路的影响,并探讨其作用机制?方法 选取Wistar 雄性大鼠30 只,动物随机分为正常组?模型组?地塞米松组和宣肺方组(高?低剂量组),尾静脉注射LPS 制备ALI 模型?采用ELISA 法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子TNF - α?IL -1β 和IL -6含量,免疫组化测mTOR 蛋白表达,Western blot 测肺组织p?mTOR 蛋白表达,RT?PCR 测肺泡灌洗液巨噬细胞RPS6KB1 基因表达,并观察大鼠肺组织病理变化?结果 与正常组比较,模型组TNF - α?IL -1β?IL -6?RPS6KB1均显著升高( P < 0. 05),mTOR 蛋白阳性面积率?p?mTOR 蛋白表达显著降低( P < 0. 01, P < 0. 05);与模型组比较,地塞米松组TNF - α?IL -1β?IL -6 均明显降低( P < 0. 05);宣肺方高剂量组TNF - α?IL -6?RPS6KB1 基因表达明显降低( P < 0. 01, P < 0. 05),mTOR 蛋白阳性面积率?p?mTOR 蛋白表达显著升高( P < 0. 01, P < 0. 05),宣肺方低剂量组TNF - α 含量明显降低( P < 0. 01)?HE 染色示模型组肺组织内可见局部肺出血?坏死,肺小静脉扩张?血管内白细胞数显著增多,肺间质水肿?炎细胞浸润;与模型组比较,各治疗组呈轻度间质性肺炎?结论 宣肺方对内毒素诱导大鼠急性肺损伤有保护作用,其机制可能与其能够下调TNF - α?IL - 6 含量?RPS6KB1 基因表达和上调mTOR?p?mTOR 蛋白表达有关?

摘要:目的 探讨阿尔茨海默病转基因小鼠极早期嗅觉工作记忆损害特征?方法 选用5 周龄雄性5XFAD 转基因及野生型小鼠各9 只,9 周龄雄性5XFAD 转基因与野生型小鼠各8 只,采用嗅觉广度测验进行测试,以嗅觉广度?气味辨别错误数和准确率评估嗅觉工作记忆能力?结果 与同龄野生型小鼠相比,9 周龄转基因小鼠嗅觉广度明显降低( P < 0. 05),错误次数明显增高( P < 0. 05),气味辨别准确率显著降低( P < 0. 05)?此外,与5 周龄转基因小鼠相比,9 周龄转基因小鼠嗅觉广度明显降低( P < 0. 05)?而5 周龄5XFAD 小鼠的嗅觉广度?错误次数以及气味辨别准确率与野生型之间差异无显著性( P > 0. 05)?结论 9 周龄5XFAD 转基因小鼠出现显著嗅觉工作记忆损害,提示嗅觉工作记忆损害可能是AD 小鼠模型极早期认知损害的敏感指标?

摘要:目的 构建大鼠胃炎癌转化模型,探索新的胃癌早期血清学诊断指标?方法 采用N - 甲基?N′ -硝基?N′ - 亚硝基胍饮水(MNNG)协同高盐饲料喂养的方法诱导大鼠胃炎癌转化模型?核磁共振成像及组织病理学观察大鼠胃部恶化过程?qRT?PCR 检测不同时间点(造模第0,12,24,36,48 周)大鼠血清miR - 17 - 5p 和miR-374 -5p 表达水平?结果 MNNG 饮水协同高盐饲料喂养成功诱导大鼠胃炎癌转化,经历萎缩性胃炎(造模第24 周)和不典型增生(造模第48 周)的过程?血清中miR -17 -5p 和miR - 374 - 5p 的表达水平与大鼠胃部恶化程度正相关?与正常对照组相比,第36?48 周时,miR -17 -5p 表达水平分别增加约8 倍(t = 4. 12, P < 0. 001)和10 倍(t =5. 33, P < 0. 001);第48 周时,miR -374 -5p 表达水平增加约6 倍(t =3. 62,0. 001 < P < 0. 002)?结论MNNG 饮水协同高盐饲料喂养构建的大鼠胃炎癌转化模型为研究胃癌发病机理提供了良好的动物模型,血清miR-17 -5p 和miR -374 -5p 是潜在的胃癌早期无创诊断指标?

摘要:目的 探究抗阻训练抵抗低氧诱导骨骼肌萎缩的效果,为解决高原训练期间运动员骨骼肌丢失问题提供理论依据?方法 8 周龄雄性Sprague?Dawley(SD)大鼠24 只,平均体重约230 g,随机分为4 组:常氧安静组 (C)?常氧抗阻训练组(R)?低氧安静组(H)和低氧抗阻训练组(HR)?H 和HR 组在模拟海拔4000 m,R 和HR 组则进行抗阻训练,进行4 周的低氧及抗阻训练干预后测试各组大鼠体成分,比目鱼肌?趾长伸肌?腓肠肌?肱二头肌的湿重和肌纤维横截面积?结果 观察到HR 组瘦体重显著高于H 组,H 组瘦体重显著低于C 组; HR 组的肱二头肌湿重和肌纤维横截面积显著高于H 组?结论 抗阻训练有助于预防低氧诱导骨骼肌萎缩的发生,爬梯形式的抗阻练习可刺激大鼠肱二头肌的肥大?

摘要:目的 研究13 - 甲基十四烷酸(13?methyltetradecanoic Acid, 13?MTD)对大鼠脑皮质星形胶质细胞氧反常的保护作用?方法 传代培养新生SD 乳鼠大脑皮质星形胶质原代细胞,以氧糖剥夺/ 再复氧糖(OGD/ R)方法复制氧反常模型,OGD 10 h/ R 24 h,于再复氧糖即刻分别给予13?MTD 20,40,80 μg/ mL(M20,M40,M80)干预,倒置显微镜动态观察星形胶质细胞形态,细胞免疫化学鉴定角质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP),MTT 法检测线粒体活性,免疫组化法检测星形胶质细胞的水通道蛋白4(aquaporin 4, AQP4)蛋白表达?结果 OGD 10 h/ R 24 h 损伤后,体外培养的SD 乳鼠脑皮质星形胶质细胞出现明显损伤,线粒体活性显著下降( P <0. 01),星形胶质细胞膜AQP4 蛋白表达量明显增加( P < 0. 01);与模型组比较,13?MTD 20,40,80 μg/ mL 可减少损伤,使线粒体活性上升?AQP4 蛋白表达减少,以80 μg/ mL 效果最好( P < 0. 01)?结论 13?MTD 可通过降低AQP4的表达,提高线粒体活性,减轻细胞水肿,进而保护氧反常诱导的星形胶质细胞损伤?

摘要:目的 通过构建Ⅱ型糖尿病大鼠模型,研究该模型心肌纤维化和心肌AGEs/ RAGE 水平的变化情况?方法 雄性SD 大鼠高脂饲料饲喂6 周后,过夜空腹12 h,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,30 mg/ kg)?注射3?7 d 后检测大鼠随机血糖浓度,两次随机血糖≥16. 7 mmol/ L 为Ⅱ型糖尿病大鼠建模成功?在建模成功后第4?8和12 周,检测大鼠血FBG?insulin 和左心室AGEs?Hyp 含量及Masson 染色?RAGE 表达的变化?结果 造模成功后第4?8 和12 周,糖尿病对照组(4D,8D,12D)血FBG 水平均较同周次正常对照组(4C,8C,12C)显著升高,体重显著下降;造模成功后第12 周时,糖尿病对照组(12D)大鼠Insulin 显著高于同周次正常对照组(12C)和4 周时糖尿病对照组(4D);从造模成功后第8 周开始,糖尿病对照组(8D,12D)心肌Hyp?CVF?AGEs 和RAGE 与正常对照组 (8C,12C)相比均显著升高;2 型糖尿病大鼠心肌AGEs/ RAGE 水平与CVF 呈显著正相关?结论 高脂饮食饲喂加腹腔注射小剂量STZ,能够成功复制Ⅱ型糖尿病大鼠模型?随着病程的延长,心肌纤维化和心肌AGEs 含量?RAGE蛋白表达均呈逐渐上升趋势,且Ⅱ型糖尿病大鼠心肌AGEs/ RAGE 水平与心肌纤维化存在有正相关关系?

摘要:目的 探讨自主神经在兔动脉粥样硬化(AS)中的作用及蜂王浆干预效果?方法 取雄性日本大耳白兔18 只,随机分为正常对照(NC)组?高脂高糖饮食(HFHSD)组?蜂王浆治疗(RJ)组,每组6 只?采用高脂高糖饮食12 周诱发AS 模型,同时RJ 组每次口服200 mg/ kg 蜂王浆,2 次/ 日?造模结束后,取血测定血脂[总胆固醇 (TC)?三酰甘油(TG)?低密度脂蛋白胆固醇(LDL?C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL?C)]?超氧化物歧化酶(SOD)?丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)水平;并测量心电图和血压,分别测量心率变异性(HRV)和心血管压力反射敏感性(BRS)反应;取血管进行HE 病理观察和苏丹IV 染色评估AS 程度?结果 与NC 组比,HFHSD 组血脂升高( P < 0. 05),主动脉有明显的脂质沉积和AS 斑块( P < 0. 05, P < 0. 01),血浆SOD 活性和NO 水平下降且MDA 含量升高( P < 0. 05, P < 0. 01),心功能降低的同时伴有HRV 和BRS 值降低( P < 0. 05, P < 0. 01);与HFHSD 组比,蜂王浆治疗组能明显改善上述指标?结论 高脂高糖饮食能导致兔心脏自主神经功能紊乱,并促进AS 发生,蜂王浆干预后能调整自主神经功能,延缓AS 病变?

摘要:目的 采用高脂高盐饮食建立巴马小型猪高血压模型,并探讨其可能的发病机制?方法 取雄性巴马小型猪18 只,随机分成3 组:正常对照(NC)组?高脂(HF)组和高脂高盐(HFHS)组,每组6 只?NC 组饲喂普通饲料,HF 组和HFHS 组分别饲喂高脂饲料和高脂高盐饲料,连续24 周?在造模8 周?16 周和24 周时测量小型猪的收缩压(SBP)和舒张压(DBP),在造模24 周时测定血糖血脂和肝肾功能,以及血浆内皮素1(ET - 1)?肾素 (Renin)?血管紧张素II(Ang II)?水通道蛋白-2(AQP -2)?血管加压素(AVP)和血管内皮生长因子(VEGF)等指标,并取肝?肾进行组织病理学观察?结果 与NC 组比,HF 组和HFHS 组在造模8 周后SBP 和DBP 明显升高,并呈持续上升趋势,且HFHS 组高于HF 组;同时,造模24 周后HF 组和HFHS 组小型猪的体重和肝?肾指数均显著增加( P < 0. 05),且血浆TC?CREA 和ET -1 水平亦显著升高( P < 0. 05, P < 0. 01);而HFHS 组BUN 水平显著降低 ( P < 0. 05),但renin?Ang?II?AQP -2?AVP 含量均显著升高( P < 0. 05, P < 0. 01)?油红“O”染色结果显示,HF 组和HFHS 组肝?肾出现脂质沉积,且出现肾小动脉管壁增厚等病理改变?结论 高脂高盐饮食诱导8 周可建立小型猪高血压模型,其发病机制可能与影响肾脏功能进而激活RAS 系统和AVP?AQP -2 有关?

摘要:目的 研究比较南极磷虾油对实验性高血脂大鼠预防和治疗给药辅助降血脂作用效果?方法 喂养高脂肪高胆固醇饲料建立SD 大鼠高脂血症模型?预防组于造模前给予磷虾油14 d 及造模期间继续给予磷虾油12 d?治疗组则于造模期间给予高脂肪胆固醇饲料和磷虾油12 d?造模结束后采血检测大鼠血清总胆固醇 (TC)?甘油三脂(TG)?高密度脂蛋白胆固醇(HDL?C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL?C),病理学检查观察各组肝组织的病变?分析比较磷虾油对于高血脂大鼠辅助降血脂的预防和治疗的功效?结果 南极磷虾油预防给药组大鼠的血清TC 和LDL?C 显著降低( P < 0. 05),肝组织的脂肪变性程度较轻,但对血清TG?HDL?C 的影响不明显( P > 0. 05)?虾油治疗给药未见大鼠血清TC?TG?HDL?C?LDL?C 明显下降( P > 0. 05),辅助降血脂作用效果不明显?结论 南极磷虾油辅助降血脂作用预防性给药效果明显,具有显著降低血脂TC 的作用?

摘要:黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)是进行生物医学研究的理想模型,但研究过程往往受到遗传工具和品系资源的限制,无法有效地调控目的基因表达,阻碍实验的深入开展?为了方便果蝇领域的实验室开展研究,我们首先开发并优化了基于CRISPR/ Cas9 的基因组编辑技术,随后研发了转录激活系统和新一代转基因干扰技术,最终可以简单高效?准确特异地调控目的基因表达?同时,利用这些遗传学新技术,我们构建了相应的基因敲除?转基因转录激活?转基因干扰的果蝇品系资源库,使清华大学果蝇中心成为世界上最重要的果蝇技术和资源中心之一?这些新技术以及相应的果蝇资源,正在被国内外果蝇研究领域的实验室所应用,对发育和疾病等相关研究发挥着广泛的促进作用?

摘要:诸氏鲻虾虎鱼是我国特色海洋鱼类,具有诸多实验动物培育与应用优势?本文概述了诸氏鲻虾虎鱼的生物学特性?封闭群和近交系培育?质量控制等实验动物化研究进展,并介绍了诸氏鲻虾虎鱼作为海洋实验鱼类在海洋环境监测?水生态毒理等研究中的应用?结合目前研究和应用现状,对诸氏鲻虾虎鱼的质量标准化?近交系培育及其在功能基因组等领域的应用进行了展望?

摘要:目的 分析四带无须鲃封闭群及近交群的遗传质量?方法 筛选多态性丰富的四带无须鲃微卫星序列,通过构建两个多重PCR 反应体系再利用毛细管电泳技术进行分型,开展群体遗传多样性分析?结果 野生群?WT 封闭群?BT 封闭群及近交群的平均等位基因数分别为6. 5833?3. 1667?3. 0833 和3. 1818,平均多态信息含量分别为0. 5969?0. 3748?0. 4159 和0. 4241?群体遗传质量检测分析表明:4 个群体间遗传分化结果和近交群由野生群?封闭群逐渐筛选获得的过程相符?结论 筛选的微卫星标记可用于四带无须鲃不同群体的遗传质量分析,为其遗传质量控制及监测提供方法基础?

摘要:长爪沙鼠是具有糖尿病潜质的实验动物,但普通群体中糖尿病发病率很低,远远不能满足研究需求?我们在前期进行长爪沙鼠近交系培育过程中偶然发现其中一个分支具有高血糖的特性,因此对其进行了定向培育?经过20 代全同胞近亲繁殖,获得一个自发性Ⅱ型糖尿病模型近交系,该品系动物具有空腹血糖升高?糖耐量受损?胰岛素抵抗?多器官病变和多个糖尿病相关基因表达异常等糖尿病典型特征,其糖尿病特征模型比率达到60%左右?我们利用该模型进一步开展发病机制研究,发现肥胖型糖尿病和非肥胖型糖尿病具有脂肪组织分布和细胞大小水平等多方面的差异?这些研究结果证明糖尿病长爪沙鼠近交系是理想的Ⅱ型糖尿病模型,将为糖尿病发生机制?脂肪组织在糖尿病发生中的作用?糖尿病敏感药物筛选等诸多糖尿病相关的研究提供新材料和新思路?

摘要:长爪沙鼠具有脑血管变异缺失的特性,是脑缺血研究良好的模型动物?普通长爪沙鼠群体中模型成功率低,影响研究结果稳定性,不符合实验动物福利要求?我们团队在证实脑血管Willis 环(circle of Willis, COW)变异缺失具有遗传性的基础上,首先通过定向选育建立了脑缺血高发群体,进而通过全同胞近亲繁殖的方式,建立了脑缺血模型近交系,其COW 缺失率达76. 62%,模型成功率达到88. 89%?此外,建立了近交系微卫星DNA 和生化位点遗传检测方法,分析了长爪沙鼠脑缺血模型近交系动物的生长发育和血液生理生化等指标,为该模型的推广应用奠定了基础?我们还发现,VEGFA 基因?AKT/ PI3K 和Notch 信号通路在长爪沙鼠脑血管发育中发挥重要作用?通过抑制消减杂交方法筛选获得4 个与长爪沙鼠脑血管发育相关的基因?长爪沙鼠脑缺血模型近交系的培育成功解决了模型发生率低的问题,减少了动物使用量,提高了研究结果可信度和稳定性,促进了相关机制研究?

摘要:裸鼹鼠具有抗肿瘤?耐低氧?耐疼痛?寿命长等优势特性,引起了国内外广泛关注,其实验动物化及应用推广迫在眉睫?本团队围绕裸鼹鼠实验动物化及标准化开展了系统研究?通过对裸鼹鼠繁殖?遗传?微生物及营养学的研究,解决了了裸鼹鼠繁殖率低下,遗传背景不明确和携带病原微生物不明等问题,成功建立了普通级封闭群裸鼹鼠种群,现种群已繁殖至第6 世代?同时对所建立种群生物学特性,如耐低氧?抗肿瘤?抗衰老等开展了系统研究,为相关疾病的研究和药物研发提供了新的动物模型材料和研究策略?

摘要:肿瘤组织异种移植(PDX)模型在遗传学?病理学和生物学特性等方面与患者的原发肿瘤具有较好的相似性,药物临床反应一致性高,在肿瘤个体化治疗领域显示出良好的应用前景?利用PDX 模型开展肿瘤靶向药物筛选可有效指导临床用药?本文针对用于化疗药物筛选的PDX 模型评价策略进行综述,总结了建模标准和质量控制要求,提出组织形态学?测序分析?特异性标志物和STR 检测四种模型溯源性评价方法,综合衡量药物毒性作用?肿瘤体积变化趋势和TGD 数学模型结果进行疗效评价,为PDX 模型指导肿瘤个体化治疗提供良好的应用策略?

摘要:单克隆抗体(单抗)因其专一性?高效价?低耐药性等显著优势,已成为生物制药业行业发展最快的领域之一,并成功用于治疗多种癌症?自身免疫病和其他疾病等?从最初的鼠源性单抗发展至现今的全人源单抗,新的制备技术不断涌现,如单细胞分选和测序技术等?同时,通过改变全人源单抗的糖基化水平?优化单抗亲和力成熟技术等,有助于进一步提高其稳定性?亲和力?目前,全人源单抗的疗效和安全性仍受到行业关注,也面临很多挑战,如何平衡在降低其免疫原性的同时,进一步提高其亲和力等,仍寄希望于新的技术或策略?

摘要:碘乙酰胺是蛋白组学中半胱氨酸和组氨酸的烷基化试剂,可抑制蛋白酶活力下降甚至消失而不使蛋白变性,具有诱导细胞缺氧?黏膜损伤?焦虑和抑郁等作用,可基本模拟消化系统疾病如慢性胃炎?功能性消化不良?溃疡性结肠炎的病理生理机制,故目前广泛应用于慢性胃炎?功能性消化不良?溃疡性结肠炎动物模型的建立和研究?现就对其在消化系统疾病动物模型建立中的作用机制?造模方法等研究综述如下?