摘要:目的 基于Masquelet 诱导膜技术,比较内固定钢板?髓内针和外固定架三种固定方式建立的大鼠胫骨大段骨缺损(MTBD)模型及诱导膜形成特点,从而选择较优的模型构建方法?方法 60 只10 周龄SPF 级雄性SD 大鼠随机分为3 组:内固定钢板组(IFP)?髓内针组(IMP)和环形外固定架组(CEF)?在右侧胫骨中段构建4 mm骨缺损模型,分别应用自制六孔不锈钢钢板?直径1 mm 克氏针?自制环形外固定架固定?记录造模用时?出血量及肢体肿胀持续时间;行X 线检查,观察骨水泥?固定装置稳定情况;诱导膜行HE 染色,观察组织形态结构特点?结果 在造模用时?出血量及模型成功率方面,IMP 和CEF 两组明显优于IFP 组( P < 0. 05)?②CEF 组肿胀时间最短,但三组之间肿胀持续时间差异无显著性( P > 0. 05)?③IFP 组出现1 例螺钉松动和3 例骨水泥松动,CEF 组出现1 例骨水泥松动,而IMP 组固定良好?④在感染方面,IFP 组出现3 例钢板外露,IMP 组出现2 例脓性包块,而CEF 组无感染发生?⑤诱导膜组织厚度在460 ~520 μm,三组差异无显著性( P > 0. 05)?结论 三种方式均可成功构建MTBD 模型,但综合考虑CEF 为模拟Masquelet 技术构建大鼠MTBD 模型较优的方式?

摘要:目的 通过追赶生长饮食诱导C57 小鼠出现代谢综合征并发脑衰老样病变动物模型,并研究其可能的机制?方法 40 只C57 小鼠随机分为4 组,正常对照组10 只,低能量饮食组10 只,高能量饮食组10 只,追赶生长组(先低能饮食喂养6 周再开放高能量饮食)10 只,各组动物均连续喂养12 周,记录体重?血糖,于实验末检测代谢综合征相关生化指标,计算胰岛素抵抗指数,Western blot 技术检测衰老相关蛋白P53 和磷酸化P53(ser15)表达水平,电镜下观察海马区脂褐素沉积情况?结果 低能量组小鼠体重?血糖?代谢综合征相关生化指标(血清胆固醇?三酰甘油?胰岛素样生长因子1?胰岛素)以及P53 和磷酸化P53 蛋白表达水平低于正常对照组,脂褐素沉着较少;高能量组和追赶生长组代谢综合征指标显著高于对照组,并出现明显P53 和磷酸化P53 蛋白表达量增多以及脂褐素沉积;其中追赶生长组表现出更为明显的胰岛素抵抗倾向和脑衰老样变?结论 追赶生长饮食喂养可诱导小鼠代谢综合征模型并发脑衰老样病变,本研究为饮食方式改变引起的代谢综合征及其并发症神经变性样变动物模型的构建提供研究新思路?

摘要:目的 建立高脂饮食诱导的果蝇心衰模型?方法 选择野生型果蝇w1118 果蝇作为实验对象,采用含不同浓度椰油(0%,7. 5%,15%,30%)食物喂食果蝇5 d,检测果蝇体内的三酰甘油含量?后续实验以非高脂喂食组(0%椰油)作为对照,30%椰油高脂喂食组作为实验组?负向趋地性实验检测果蝇运动能力?果蝇成体心脏功能分析平台,拍摄果蝇在半解剖条件下的心脏跳动情况(30 s),软件分析获得成体心脏功能指标,包括心跳周期,收缩和舒张直径,心脏收缩力指数等?实时定量PCR 检测高脂喂食果蝇心脏的RNA 表达变化?结果 与非高脂喂食果蝇相比,不同比例高脂喂食果蝇的三酰甘油含量随椰油浓度呈剂量递增( P < 0. 05);高脂饮食显著影响果蝇活动力( P < 0. 001);高脂喂食果蝇的心跳周期缩短( P < 0. 01),心脏收缩力减弱( P < 0. 001);实时定量PCR发现高脂喂食果蝇中,参与脂代谢相关的一些基因fa2h, CG6277,CG3699, CG9914,lip2 的表达明显下调( P <0. 05)?结论 高脂饮食严重影响果蝇运动能力和成体心脏功能,成功建立了高脂饮食诱导的果蝇心衰模型?

摘要:目的 探讨艾滋病急性期炎症因子?脂类代谢及葡萄糖代谢对体重的影响?方法 检测SIVmac239感染北平顶猴急性期炎症因子(TNF-α?IL-6)?脂类代谢(胆固醇?三酰甘油?高密度脂蛋白胆固醇?低密度脂蛋白胆固醇)及葡萄糖代谢参数(胰岛素?胰岛素抵抗指数), 比较体重增加组和体重减少组SIV 感染北平顶猴之间的差异,运用 Pearson 相关分析探讨胰岛素抵抗与血浆病毒载量的相关性?结果 在SIVmac239 感染北平顶猴急性期,炎症因子和血脂四项在体重增加组与体重减少组之间无明显差异;体重增加组胰岛素水平明显下降,体重减少组胰岛素水平明显升高,并出现胰岛素抵抗表现; Pearson 分析显示,感染后第5 周及第11 周胰岛素抵抗指数变化与血浆病毒载量呈正相关?结论 SIVmac239 感染急性期,葡萄糖代谢异常可能是导致北平顶猴体重变化的主要原因?

摘要:目的 观察在体外培养条件下,慢病毒载体介导的HCV 受体基因 OCLN / CD 81 转染对树鼩骨髓间充质干细胞生物学特性的影响及基因的表达情况?方法 利用本室分离鉴定保存的树鼩BM-MSCs,构建含人 OCLN / CD 81 基因的慢病毒载体,并分别将 CD 81 和 OCLN 基因转染到BM-MSCs 中,荧光倒置显微镜和流式细胞仪检测转染效率,CCK8 法检测转染后BM-MSCs 的细胞增殖情况,成骨成脂细胞诱导分化检测其多向分化潜能?采用实时荧光定量及WB 方法检测HCV 受体( OCLN / CD 81)基因mRNA 和蛋白表达情况和转染后BM-MSCs 干性基因的表达?结果 以MOI 为100 转染含人 OCLN / CD 81 基因的慢病毒载体后,LV- CD 81 转染效率达99. 4%,LV- OCLN 转染效率22. 6%?细胞增殖趋势与未转染基因的BM-MSCs 相似,转染后的BM-MSCs 仍可以向成骨成脂细胞分化,但能力有所下降?干性基因NANOG mRNA 表达增高,差异有显著性( P < 0. 05),LIN28A mRNA 表达下降,差异有显著性( P < 0. 05)?转染后树鼩BM-MSCs 能高效表达所转入的外源基因?结论 构建的含人 OCLN / CD 81基因的慢病毒载体可以成功转染树鼩BM-MSCs,并高效表达所转入的基因,转染后对树鼩BM-MSCs 的多向分化潜能有一定的影响?

摘要:目的 在兔急性心肌梗死模型上应用心肌声学造影视觉评估方法评价急性心肌梗死后梗死节段的血流灌注状况?方法 将20 只清洁级日本大耳兔随机分组,建立急性心肌梗死模型组(A 组)和假手术对照组(S组)?采集术前及术后10?45 min 心电图,并在术前及术后20 min?2 h?6 h 进行常规超声及超声造影,综合评估分析兔急性心肌梗死后造模节段血流灌注情况?实验结束后取出造模节段心肌组织进行病理学检查?结果 常规超声心动图均表明缺血后不同时间点造模节段运动幅度显著改变,心肌组织学有显著改变,表明成功建立了日本大耳兔急性心肌梗死模型;同时心肌声学造影视觉评估表明A 组造模节段心肌血容量及灌注速度均显著低于非梗死节段及S 组对应节段,与常规超声心动图和病理组织学的检查结果一致?结论 心肌声学造影的视觉评估能够准确判定急性心肌梗死后梗死心肌节段的血流灌注的状况,是一种有效的诊断手段?

摘要:目的 开发256 层螺旋CT 大鼠活体胸部CT 扫描中减少图像呼吸?心跳伪影的序列?方法 采用飞利浦Brilliance-iCT 对10 只SD 大鼠进行胸部CT 成像?每只大鼠均采用A?B 两种扫描方式, A 方式为常规胸部CT 扫描序列,为非心电门控螺旋扫描模式,B 方式为非心电门控轴扫模式?两组均在120 kV 条件下扫描,扫描长度为8 cm?对所得CT 数据进行横断位与冠状位肺窗与软组织窗重建,观察图像并进行测量,比较两组图像的平均CT 值?图像噪声?信噪比(SNR)?和主观图像质量评分的差异,并对不同观察者间主观图像质量评分的一致性进行检验?结果 分析10 例大鼠胸部CT 扫描数据?A?B 两种扫描序列的剂量长度乘积(dose length product,DLP)值分别为144. 7 mGy/ cm 与72. 2 mGy/ cm?两组间肺组织CT 值与肝组织CT 值差异无显著性(t 值分别为- 0. 205?0. 545, P >0. 05),两组图像噪声差异无显著性( t 值为-0. 865, P >0. 05),两组图像肺组织的SNR 差异无显著性(( t 值为0. 903, P >0. 05),但肝组织的SNR 值B 组高于A 组,差异有显著性( t 值为- 2. 885, P < 0. 05)?两位医师的评分结果的相关系数为0. 763,诊断结果一致性良好?A?B 两种扫描方式的图像主观质量评分为(2. 5 ± 0. 53)分?(4. 3 ±0. 67)分,差异有显著性(χ² 值为14. 76, P < 0. 05)?结论 大鼠胸部CT 扫描采用非心电门控轴扫模式可获得与胸部常规CT 扫描(非心电门控螺旋扫描模式)大致相当的CT 值与噪声?信噪比,但采用非心电门控轴扫模式可以有效减少大鼠胸部图像的呼吸心跳伪影,降低辐射剂量,提高图像质量,提高观察者的诊断信心?

摘要:目的 观察体重增减影响血糖水平变化的规律特点?方法 8 周龄雄性C57BL/6 小鼠高热量饲料(脂肪热量占60%)喂养8 周呈肥胖模型,随机分入体重干预组(intervention group, IT)和肥胖组(obesity group,OB),肥胖组维持高热量饲料至终点?正常对照组(control group,CON)喂食普通饲料?限制热量摄入使IT 组体重先减至CON 组水平( P > 0. 05),后恢复高热量饲料再次诱导体重反弹至OB 组水平( P > 0. 05)时终止?采用腹腔注射葡萄糖耐量试验反映葡萄糖代谢水平,胰岛素耐受试验评价胰岛素敏感性?胰腺病理HE 染色观察胰岛形态学改变?结果 IT 组体重反弹时体重增速是干预前的2. 27 倍,空腹血糖则高达5. 13 倍?与OB 组相比,实验终点葡萄糖耐量试验血糖曲线下面积显著增加( P < 0. 05),胰岛素敏感性显著下降( P < 0. 05),内脏脂肪增加( P <0. 05),胰岛面积显著减小( P < 0. 05)?结论 体重波动导致内脏脂肪量增加?胰岛素敏感性降低和葡萄糖耐量受损?

摘要:目的 研究调控细胞程序性坏死(necroptosis)的关键分子———受体相互作用蛋白激酶3(receptorinteracting protein 3, RIP3)在甲型流感病毒H1N1 PR8 感染中的作用?方法 用5. 25 ×10³ 半数组织细胞感染剂量(50% tissue culture infective dose, TCID₅₀ )的流感病毒H1N1 PR8 通过滴鼻方式感染RIP3 敲除(RIP3 ^{- / -} )小鼠和野生型(WT)C57BL/6 小鼠,连续14 d 每天称量小鼠体重,观察小鼠生存状态,并记录死亡情况?分别在感染后第3 天(day post infection, d. p. i)和第7 天处死解剖小鼠?取整个肺称重,左叶肺用4%多聚甲醛固定后进行HE 染色,检测感染后肺组织的病理变化;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肺组织病毒载量;流式微珠阵列术(CBA)检测肺匀浆上清中部分炎症相关细胞因子?结果 5. 25 ×10³TCID₅₀ 流感病毒感染后,各组小鼠均出现一定程度临床症状:RIP3 ^{- / -}组小鼠感染后死亡率(50%)较WT 组小鼠(87. 5%)显著降低( P < 0. 05)?分别对比每天两组小鼠体重,发现从第3 天开始,WT 组小鼠的体重降低比率大于RIP3 ^{- / -}组,但两组小鼠体重总体改变趋势无统计学差异?病毒学方面,两组小鼠在相同时间点(3?7 d. p. i)病毒载量差异均无显著性?炎症应答方面:两组小鼠肺指数(肺重与体重比值)差异无显著性?病理方面:肉眼观察大体病理及HE 病理切片显示:RIP3 ^{- / -}组小鼠肺组织损伤较轻,炎症浸润较少;小鼠肺部炎症细胞因子也较WT 组相对减少?结论 RIP3 敲除的条件下,流感病毒H1N1 PR8 感染小鼠时因减弱了炎症应答导致肺部病理损伤减轻,提示RIP3 可能在H1N1 PR8 流感病毒感染中发挥促炎症病理作用?

摘要:目的 探讨抗氧化剂N - 乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对2 型糖尿病大鼠肝氧化应激及FoxO1 活性的影响?方法 24 只雄性SD 大鼠随机分为正常对照组(C)?糖尿病非治疗组(D)及NAC 治疗组(D +NAC)(n =8)?通过小剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)及高脂饮食建立2 型糖尿病大鼠模型?D + NAC 组每天灌胃给予NAC 1. 5 g/ kg 治疗,C 与D 组灌胃给予同体积生理盐水?8 周后,全自动生化分析仪检测血浆三酰甘油(TG)?游离脂肪酸(FFA)?谷草转氨酶(AST)?谷丙转氨酶(ALT)水平,试剂盒检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)?过氧化氢酶(CAT)?谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)?三磷酸腺苷(ATP)水平及血浆与肝组织脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量;Western blot 分析肝组织Caspase-3 表达水平,并分析细胞质与细胞核中FoxO1 蛋白表达水平,从而间接反映FoxO1 活性水平?结果 与C 组相比,D 组大鼠血浆TG?FFA?AST?ALT?MDA 及肝组织MDA 含量?Caspase-3 表达水平?FoxO1活性水平均明显增加,而肝组织中的SOD?CAT?ATP 水平及GSH-Px 活性均显著降低;NAC 治疗8 周后均可以抑制糖尿病大鼠中上述指标的变化,差异具有统计学意义?结论 抗氧化剂NAC 可以减轻糖尿病相关肝功能损害,其机制可能与其抑制糖尿病氧化应激水平?减轻线粒体功能紊乱及FoxO1 过度活化有关?

摘要:目的 观察电针联合甲强龙与单独使用电针或甲强龙对椎间盘脱出24 h 后大鼠模型的肢体运动功能和神经细胞尼氏小体的影响,为临床合理应用提供依据?方法 将112 只SD 大鼠随机分为假手术组(Sham)?模型组(Model)?预先电针联合甲强龙组(EA + MP)?电针组(EA)和甲强龙组(MP),采用自制硅胶垫片压迫法制备椎间盘脱出模型,各组分别进行处理,并在不同时间点进行BBB 肢体运动功能评分或采集脊髓组织Nissl 染色观察神经细胞尼氏小体的变化,以及副作用和死亡率?结果 1)BBB 评分,各组在治疗后均呈上升趋势,EA + MP 组在第3?7 天时压迫侧后肢与EA 组和MP 组相比显著升高( P < 0. 05),第14 天时各组均显著高于Model 组( P <0. 05),并与Sham 组接近( P > 0. 05)?(2)Nissl 染色可见,与模型组相比各治疗组神经细胞损坏程度轻,尼氏小体数量多,其中EA + MP 组优于其他两组?(3)副作用发生率,MP 组为30%,EA + MP 组为4. 16%,EA 组为0;死亡率,MP 组为20%,EA + MP 组和EA 组为0?结论 3 种治疗方案均可不同程度增加尼氏小体数量,维持神经细胞形态,改善椎间盘脱出24 h(超过甲强龙作用时间窗)大鼠的肢体运动功能?其中,EA + MP 效果最佳,且显著降低了MP 疗法的副作用和死亡率的发生,也优于单独EA 的疗效?

摘要:目的 初步评估七甲川菁染料衍生物(IR-783)和化疗药物吉西他滨(gemcitabine)的缀合物(NIRG)对肝癌模型荧光成像及靶向治疗效果?方法 首先使用肝癌细胞系Hep3B 验证肝癌细胞对NIRG 的特异性吸收,并制备该细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,观察NIRG 在CDX 模型中的近红外荧光成像效果;制备三例肝癌(C64003?C34566 和B66873)裸鼠皮下PDX 模型,研究NIRG 在此模型中的肿瘤靶向荧光成像效果以及治疗效果,同时通过免疫组织化学法观察肝癌特异性抗原AFP 在三例肝癌PDX 模型的肿瘤组织中的表达,以及观察与NIRF 染料特异性吸收相关的抗原HIF1α 和OATP 的表达?结果 通过肝癌细胞系Hep3B 观察到NIRG 在肿瘤细胞内结合的部位分别为线粒体和溶酶体,在肝癌CDX 皮下模型中发现NIRG 特异性聚集肿瘤部位,随着肿瘤的生长NIRF 信号增强,并与生物发光信号具有良好的相关性(R² =0. 99716);免疫组织化学检测显示在三例肝癌PDX 模型中的AFP?HIF1α 和OATP 均高表达;NIRG 在三例肝癌PDX 模型中荧光成像结果表明具有很好的肿瘤靶向性,同时能够抑制肿瘤的生长,显示了良好的治疗效果?结论 化合物NIRG 兼具荧光成像和肿瘤靶向转运化疗药物的能力,可作为人类肝肿瘤的新型影像探针和靶向制剂?

摘要:目的 研究茄病镰刀菌感染树鼩角膜过程中甘露糖受体和炎症因子的表达变化,探讨真菌感染性角膜炎发生机制?方法 通过接触镜辅助法用茄病镰刀菌感染树鼩角膜,前段照相?病理切片及活体共聚焦显微镜观察结果对动物模型进行评价?qPCR 检测树鼩角膜炎病发过程中的甘露糖受体?dectin-1?IL-1β?IL-6?TNF-α 的表达;体外培养树鼩原代角膜细胞并进行感染实验?结果 树鼩真菌性角膜炎模型建立成功率为84%?MR 与dectin-1 在感染初期有高拷贝数阳性表达,引起炎症因子IL-1β?IL-6?TNF-α 的表达峰值,这些因子的表达与病症的严重程度呈正相关?角膜细胞体外感染前后IL-1β?IL-6?TNF-α 的表达差异无显著性( P > 0. 05)?结论 建立的真菌性角膜炎树鼩模型,其病理表现相与人类真菌性角膜炎症状接近?甘露糖受体可能参与调控机体对真菌感染的免疫应答反应,机体自身的免疫能力可能对角膜炎病发与转归有重要作用?

摘要:目的 探讨双歧杆菌(Bifidobacterium,BIFI) 对慢性酒精性肝损伤(chronic alcoholic liver injury,CALI)大鼠肝功能的保护或影响作用,并初步探讨其机制?方法 将SD 大鼠随机分为CALI 组,美他多辛(90 mg/kg)组,BIFI 低(500 mg/ kg)?中(1000 mg/ kg)?高(2000 mg/ kg) 剂量组,沉默信息调节蛋白1(silent information regulatory protein 1,SIRT1)抑制剂Tenovin-6(25 mg/ kg)组?CALI 组及空白对照组给予等体积生理盐水灌胃?8 周后,分析各组大鼠肝功能;检测肝组织和血清中TG?TC 水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;蛋白印迹(WB)法分析肝组织中SIRT1?chREBP 表达情况?结果 与对照组比较,CALI 组大鼠肝功能明显下降,血液中ALT?AST 水平明显升高( P < 0. 05),肝组织呈脂肪性病理损伤,肝组织和血清中TG?TC 水平明显升高( P <0. 05),SIRT1 蛋白表达明显降低( P < 0. 05),chREBP 蛋白表达明显增高( P < 0. 05);与CALI 组比较,BIFI 低?中?高剂量组大鼠CALI 组大鼠肝功能明显增强,血液中ALT?AST 水平明显降低( P < 0. 05),肝组织病理损伤明显减轻,肝组织和血清中TG?TC 水平明显降低( P < 0. 05),SIRT1 蛋白表达明显升高( P < 0. 05),chREBP 蛋白表达明显降低( P < 0. 05)?以上效应均可被SIRT1 特异性抑制剂Tenovin-6 逆转?结论 BIFI 可能通过调控SIRT1/ChREBP 表达抑制脂质堆积,实现对慢性酒精性肝损伤大鼠的保护?

摘要:目的 探讨维生素D 受体(VDR)基因敲除小鼠的最优繁育方式与鉴定方法,为进一步研究VDR 功能及相关疾病提供动物模型?方法 针对课题组前期构建的VDR 敲除小鼠,采用4 种不同的交配方式产生子代小鼠,统计子代的表型和基因型,比较VDR 基因敲除纯合子(VDR^{- / -} )和杂合子(VDR^{+ / -} )小鼠的繁殖能力,同时在mRNA 和蛋白水平分析VDR 表达情况?结果 VDR^{- / -} 小鼠与VDR^{+ / +} 小鼠在表型上具有显著差异,主要表现在脱毛?体型小和活动能力下降等方面;4 种繁育方式所产子代小鼠的基因型分布基本符合孟德尔遗传定律;VDR^{- / -} 互交方式小鼠的生殖能力差,不能直接用于扩大VDR^{- / -} 敲除鼠品系,而VDR^{+ / -} 互交方式可成功获得VDR^{- / -} 小鼠,并且检测到VDR 基因敲除性状能稳定遗传至子代小鼠,因此该方法是扩大品系的最佳途径?结论 本实验成功鉴定出子代小鼠基因型并建立VDR 基因敲除小鼠品系,为后续VDR 功能研究奠定基础?

摘要:目的 探索性早熟痰湿壅滞证大鼠模型的系统评价方法?方法 通过观察性早熟痰湿壅滞组?性早熟非痰湿壅滞组?空白对照组及亲代模型组?亲代对照组雌性SD 大鼠的证候表现,结合旷场实验数据,探究该病证结合动物模型的系统评价方法?结果 亲代模型组雌鼠较亲代对照组体重增长量未见明显差异( P > 0. 05),4 周龄雌性仔鼠中,性早熟痰湿壅滞组雌鼠较空白组体重明显减轻( P < 0. 05),较性早熟非痰湿壅滞组体重减轻( P < 0. 05)?亲代模型组雌性SD 大鼠在总运动距离?运动速度上较亲代对照组明显减少( P < 0. 05),在静止次数与静止时间上明显高于亲代对照组( P < 0. 05),而三组仔鼠在运动距离?运动速度?静止次数和静止时间上未见显著性差异( P >0. 05)?结论 高脂饮食未增加雌性SD 大鼠体重,体重指标可能并非痰湿壅滞证候动物模型系统评价关键指标;痰湿壅滞证候大鼠模型行为学改变与该证候临床表现具有相似性,可进一步运用旷场实验研究痰湿壅滞证动物模型评价的方法,未发现雌性仔鼠各组间行为学方面的差异性,性早熟痰湿壅滞证在行为学方面有待继续研究?

摘要:目的 探讨黄芪三七合剂是否可通过改善结肠机械屏障结构紊乱而发挥治疗慢性肾病大鼠的作用?方法 雄性SD 大鼠30 只随机分为5 组:假手术组(Sham 组)?模型组(I/ R 组)?黄芪三七合剂低剂量组(LHSM组)和高剂量组(H-HSM 组)?尿毒清组(NDQ 组),采用右肾切除左肾缺血再灌注法建立慢性肾病(CKD)模型,分别于2 周?4 周?8 周取血液测肌酐?尿素氮值,于第4 周按照分组给予不同的灌胃处理,其中L-HSM 组和HHSM组分别给予黄芪三七合剂生药量18 g/ (kg·d)和36 g/ (kg·d),NDQ 组给予尿毒清颗粒1. 56 g/ (kg·d),Sham组和I/ R 组给予等体积的蒸馏水,于第8 周处死大鼠,取肾和结肠组织;检测肾功(血肌酐和尿素氮)?肾纤维化指标蛋白的表达(TGF - β1 和α-SMA)?结肠组织炎症因子IFN - γ 和IL - 6 的表达和结肠上皮紧密连接蛋白ZO-1?Occludin 和Claudin-1 的表达?结果 与模型组相比,高剂量黄芪三七合剂可有效恢复受损的肾功能,并能降低TGF-β1 和α-SMA 的蛋白表达,减轻肾纤维化;各组结肠炎症因子表达检测结果显示,模型组结肠组织中高表达的炎症因子IFN-γ 和IL-6,在低剂量和高剂量黄芪三七合剂作用下均可有效降低;结肠上皮紧密连接蛋白的免疫组化和Western blot 检测结果显示,与对照组相比,模型组中紧密连接蛋白ZO-1 和Occludin 的表达均明显降低,表明黄芪三七合剂可在一定程度上恢复结肠机械屏障结构?结论 黄芪三七合剂可能通过改善结肠机械屏障结构紊乱?减少炎症因子表达而起到防治慢性肾病大鼠的作用?

摘要:目的 应用高通量测序技术分析野生树鼩粪便菌群的结构与组成,为进一步开发利用这种新型实验动物奠定基础?方法 在云南昆明野外捕捉3 只野外成年雄性树鼩,采取粪便,用细菌16SrRNA 通用引物扩增V3 ~V4 区,采用Illumina MiSeq 测序平台对树鼩粪便微生物进行研究?结果 共测序获得181 657 条有效序列与624 个OTU,shannon 稀释曲线证明此次测序量能够覆盖样本中的绝大部分物种?树鼩粪便中的细菌共鉴定出9 个门?17 个纲?31 个目?56 个科?124 个属和172 个种?其中,(1)优势门是厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes),分别为68. 38%和20. 52%;(2)丰度最高的纲为为芽孢杆菌纲(Bacilli)54. 81%和拟杆菌纲(Bacteroidia)20. 52%;(3)乳杆菌目(Lactobacillales) 和拟杆菌目(Bacteroidales) 的丰度最高,为50. 01% 和20. 52%;(4) 优势菌科为链球菌科(Streptococcaceae)和普雷沃氏菌科(Prevotellaceae),为40. 52% 和12. 13%;(5)乳杆菌属(Lactobacillus)和链球菌属(Streptococcus)的丰度最高,分别为20. 03%和19. 62%;(6)有益菌群如乳酸杆菌属?乳球菌属丰度相对较高,双歧杆菌属丰度较低,但在所检测样本中都含有;(7)16 s 功能预测发现:氨基酸转运与代谢?碳水化合物转运与代谢等功能丰度较高?结论 应用高通量测序技术,第一次较全面的检测了野生树鼩粪便菌群,野生树鼩粪便细菌组成具有丰富的多样性,其中还有许多未被分类鉴定且相对丰度较高的细菌,需要进一步研究?

摘要:目的 探讨PLCζ 作为激活剂的可行性及对ROSI 后卵母细胞受精及胚胎发育的影响?方法 在体外构建重组质粒pCRII-TOPO- PLCζ,诱导表达后采用质谱鉴定和Western blot 检测抗原性?重组PLCζ 蛋白作为小鼠ROSI 卵母细胞的激活剂,记录受精及胚胎发育情况并统计分析?结果 成功构建了重组质粒pCRII-TOPO- PLCζ,体外表达后经质谱鉴定为小鼠PLCζ 蛋白,并具有良好的抗原性?重组PLCζ 蛋白激活卵母细胞后的受精率?2 - 4 细胞率?8 细胞率及成囊率与空白组之间的差异均无显著性(P > 0. 05)?结论 本研究中重组PLCζ 蛋白对卵母细胞受精及胚胎发育无显著影响,作为小鼠ROSI 后的卵母细胞激活剂的可行性值得商榷?

摘要:目的 探讨干预措施对精神依赖药物(海洛因)成瘾生理生化机制的影响?方法 连续给予Wistar大鼠海洛因135 mg/ kg 14 d, 建立海洛因成瘾大鼠模型,或给予利血平2. 5 mg/ kg 后再给予海洛因,观察利血平对海洛因成瘾的干预作用?用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血液中去甲肾上腺素(NA)?环磷酸腺苷(cAMP)?环磷酸鸟苷(cGMP)和脑组织中氨基丁酸(GABA)?多巴胺(DA)含量?结果 大鼠海洛因组和利血平组血液中cAMP 水平比对照组分别升高了18. 87%和35. 27%,cGMP 水平降低了10. 15%和17. 69%;海洛因组NA 水平比对照组升高了34. 05%,利血平组降低了45. 34%;海洛因组大脑额叶皮质(PFC)?伏隔核(NAc)?丘脑(thalamus)和杏仁核(amygdala)GABA 水平比对照组分别降低了36. 55%?40. 35%?42. 34%?45. 76%( P < 0. 01),利血平组分别升高了31. 06%?25. 91%?49. 32?17. 97%( P < 0. 05, P < 0. 01),海洛因组和利血平组DA 水平比对照组分别升高了82. 83%,68. 19%?87. 26%?82. 46%( P < 0. 01)和8. 79%,19. 06%?21. 65%?19. 49% ( P < 0. 05)?给予海洛因和利血平后,大鼠的脑电图?心电图的频率均出现了明显的差异?结论 去甲肾上腺素和多巴胺是体内引起海洛因成瘾的影响因素,利血平使去甲肾上腺素耗竭,干预了海洛因成瘾的生化过程?

摘要:将患者的肿瘤组织移植于免疫缺陷小鼠体内建立的肿瘤移植模型(patient-derived xenograft, PDX)较好地保留了原发瘤的生物学特性,但瘤组织基质成分会在小鼠体内传代过程中逐渐被鼠源性基质代替,缺乏免疫系统的小鼠体内环境也会改变肿瘤的微环境,原发肿瘤的异质性会逐渐丢失,从而限制了该类模型的应用;将人的造血干细胞(hematopoietic stem cells, HSCs)移植于低剂量X 线全身照射或其他方法清理骨髓的重度免疫缺陷小鼠,然后再将患者的瘤组织移植于该小鼠建立的人源化肿瘤模型(humanized patient-derived xenograft, Hu-PDX),具有与人相似的免疫系统,可以更好的保留原发瘤的异质性?研究证实人的HSCs 在小鼠体内可以产生各种免疫细胞,使肿瘤生长微环境与人体更相似,更好的保留了肿瘤的异质性,为肿瘤的个体化研究提供了良好的动物模型?

摘要:经颅超声辅助溶栓,简称“超声溶栓”,是一种使用超声技术辅助治疗缺血性脑卒中的方法,可以促进血栓的溶解,加快堵塞血管的再通,提高溶栓成功率,并且不增加症状性颅内出血等并发症的发生率?该溶栓技术进入临床试验已有十余年,但尚未得到普遍的认可?一个重要的原因是对该方法的安全性和有效性缺乏系统?严谨的研究和评估?本文总结了近十多年来国内外使用缺血性脑卒中动物模型进行超声溶栓的研究,并探讨了目前超声溶栓研究存在的一些问题及解决思路?