摘要:目的　构建脾虚湿蕴证溃疡性结肠炎小鼠模型及探明T 淋巴细胞在该模型中的特征。 方法C57BL/6 小鼠,随机分为Control 组、FXY 组、3%DSS 组、FXY + 3%DSS 组和FXY + 2%DSS 组。采用DSS 联合番泻叶(FXY)建立脾虚湿蕴证溃疡性结肠炎小鼠模型,造模结束后,HE 染色观察结肠组织结构变化;ELISA 法检测结肠组织炎性细胞因子的浓度,流式细胞术测定CD4/ CD8 T 淋巴细胞、Th1/ Th2、Th17/ Treg 细胞水平。 结果 　FXY组小鼠的临床症状以腹泻为主,3%DSS 组的小鼠以便血为主,而FXY + 3%DSS 组和FXY + 2%DSS 组小鼠表现出腹泻和便血同行,但FXY + 3%DSS 组小鼠生存率低至50%。与Control 组相比,3%DSS 组、FXY + 3%DSS 组和FXY + 2%DSS 组体重、结肠长度及抗炎性细胞因子IL-10、TGF-β1 浓度均显著降低,而DAI、结肠重量、促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6 浓度均显著上升;FXY + 3%DSS 组和FXY + 2%DSS 组肠系膜淋巴结中的CD4、Th1、Th17细胞百分比显著上升,而CD8、Th2、Treg 细胞显著下降。 结论 　番泻叶联合2%DSS 诱导能成功构建脾虚湿蕴证溃疡性结肠炎小鼠模型,并表现出典型的CD4/ CD8 T 细胞、Th1/ Th2、Th17/ Treg 细胞失衡特征。

摘要:目的　探讨铁筷子对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)模型大鼠的抗炎作用及对OPG/ RANK/ RANKL 信号通路的影响。 方法　雌性Wistar 大鼠60 只分为:正常组、模型组、阳性药物组(甲氨蝶呤,MTX)、低剂量组、中剂量组和高剂量组。采用胶原抗体诱导法于大鼠尾根部注射牛Ⅱ型胶原蛋白建立CIA 大鼠模型,模型建立成功后进行灌胃给药,正常组:给予10 mL/ (kg·d)生理盐水;模型组:给予10 mL/ (kg·d)生理盐水;阳性药物组每次给予2. 0 mL/ (kg·d) MTX,每周3 次;铁筷子低、中、高剂量组每次分别给予0. 25 g/ (kg·d)、0. 5 g/ (kg·d)、1. 0 g/ (kg·d);连续灌胃治疗25 d。通过记录大鼠体重;观察大鼠足肿胀程度;大鼠踝关节炎指数评分;micro-CT 观察踝关节骨组织病理改变;苏木素-伊红(HE)染色对大鼠踝关节骨组织和滑膜病理变化;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法检测观察破骨细胞数量的改变;PCR 检测骨保护素(OPG)、核因子-κB 受体激活剂(RANK)、RANK 配体(RANKL)、肿瘤坏死因子(TNF-α) 和骨形成蛋白2(BMP-2) 的mRNA 水平,OPG、RANK、RANKL、TNF-α 和BMP-2 蛋白相对表达量检测用蛋白免疫印迹法(Western Blot),以确定铁筷子对类风湿关节炎大鼠的治疗作用及其对骨关节保护的潜在药理机制。 结果 　数据统计结果表明,与正常组相比,CIA 大鼠体重增长减慢(P< 0. 05),足底厚度增加(P< 0. 05),踝关节出现关节腔变窄,骨组织啃噬样骨质破坏、滑膜的病理性变化,如炎性细胞增生和滑膜异常增生浸润;Micro-CT结果显示:与正常组相比,模型组、低剂量组、中剂量组,踝关节表面凹凸不平、外形不完整,踝关节表面出现啃噬样骨质破坏,高剂量组与正常组相比,各项指标变化都不明显;HE染色发现模型组大鼠踝关节出现关节腔变窄,骨组织啃噬样骨质破坏、滑膜组织增生和炎性细胞浸润等病理改变;与模型组相比,低、中、高剂量组大鼠踝关节骨组织增生和炎性浸润显著改善;TRAP 染色观察与正常组比,模型组破骨细胞数量最多,低、中、高剂量组干预下TRAP 染色阳性破骨细胞数量逐渐减少;qRT-PCR 的结果,与模型组相比,低、中、高剂量组OPG、BMP-2 mRNA 相对表达量升高(P< 0. 05),RANK、RANKL、TNF-α mRNA 相对表达量降低(P< 0. 05);Western Blot结果,与模型组比,低、中、高剂量组OPG、BMP-2 蛋白相对表达量升高(P< 0. 05),RANK、RANKL、TNF-α 蛋白相对表达量降低(P< 0. 05)。 结论 　铁筷子可能通过调节OPG/ RANK/ RANKL 信号通路缓解RA 大鼠体内炎症反应,发挥其抗类风湿关节炎机制的作用。

摘要:目的　本研究拟探讨肠道菌群代谢物TMAO 对脾虚高脂血症大鼠肝脂质代谢的影响,并进一步探讨香砂六君子汤干预肝脂质代谢紊乱的可能机制。 方法　SD 大鼠分为:空白对照组(C 组);空白对照组+ DMB(C + D 组),DMB 为TMAO 抑制剂;脾虚高脂血症组(PG 组);脾虚高脂血症+ DMB 组(PG + D 组);脾虚高脂血症+ 香砂六君子汤组(PG + XS 组)。除C 组、C + D 组外各组构建以劳倦过度和高脂饲料相结合建立脾虚高脂血症模型(造模12 周),模型建立后C + D 组、PG + D 组每天饮用水中给予1%DMB,PG + XS 组每天灌胃香砂六君子汤(每天11. 34 g 生药/ kg),其余给予等量生理盐水,4 周后进行取材检测。全自动生化仪检测大鼠血脂含量;HE 染色、油红O 染色观察大鼠肝变化及脂质沉积情况;ELISA 法检测大鼠肝FFA 变化;试剂盒法检测各组大鼠TG、TC含量;LC-MS 法检测大鼠血浆TMAO 含量;qRT-PCR 法检测大鼠肝PERK、FOXO1、SREBP-2、ABCA1、miR-33 mRNA相对表达水平;Western Blot 检测大鼠肝SREBP-2、ABCA1 蛋白表达。 结果 　(1) PG 组大鼠血清中TC、TG 和LDL-C 含量较C 组升高明显,HDL-C 含量较C 组下降显著;PG 大鼠肝组织中FFA、TG、TC 含量较C 组增加显著;肝脂质沉积较C 组加深,脂肪空泡数量大幅度增加;以上指标中C + D 组较C 组比较无显著性差异;PG + D 组、PG +XS 组与PG 组相比可显著降低大鼠血清中TC、TG 和LDL-C 含量,升高HDL-C 含量,降低肝组织中FFA、TG、TC 含量,缓解肝组织脂质沉积现象,减少肝空泡;PG + D 组与PG + XS 组之间比较无显著性差异。(2)与C 组比较,PG组大鼠血浆中TMAO 含量增加显著,肝PERK 和FOXO1、miR-33a mRNA 相对含量明显增加,肝SREBP-2、ABCA1 mRNA 和蛋白表达均降低显著;以上指标中C + D 组较C 组比较无显著性差异;PG + D 组及PG + XS 组与PG 组相比可显著降低大鼠血浆中TMAO 含量,降低肝PERK 和FOXO1、miR-33a mRNA 表达,升高肝SREBP-2、ABCA1基因mRNA 和蛋白表达;PG + D 组与PG + XS 组之间无显著性差异。 结论 　TMAO 可能通过PERK/ FOXO1 轴调控SREBP-2/ miR-33a/ ABCA1 信号通路引起大鼠肝脂代谢紊乱,香砂六君子汤可能通过抑制TMAO 含量达到抑制肝脂代谢紊乱。

摘要:目的　建立与评价慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并慢性肾病(CKD)大鼠模型。 方法　将40 只雌雄各半SPF 级SD 大鼠随机分为对照组(Control 组)、COPD 组、CKD 组、COPD 合并CKD 模型组(COPD + CKD 组),每组10 只。采用香烟烟雾暴露联合细菌滴注法制备COPD 大鼠模型,利用腺嘌呤诱导建立CKD 大鼠模型,两种方法协同制备COPD 合并CKD 的大鼠模型,8 周后取材检测肺、肾功能,观察组织形态学及血清炎症因子的表达水平。 结果 　造模成功后COPD + CKD 组大鼠肺功能指标FVC、FEV_{0. 1}及FEV_{0. 1} / FVC 显著降低(P< 0. 01),肺组织病理学表现为肺泡壁断裂、融合的肺气肿改变及炎细胞浸润;血Cr、BUN 及24 h 尿蛋白显著升高(P< 0. 01),肾组织病理学表现为肾小球系膜增生,基底膜增厚,肾小管扩张及间质纤维化,超微结构显示肾小球毛细血管襻部分闭合,足突融合,肾小管线粒体融合崩解,溶酶体增多;血清IL-6、IL-13、IL-1β 和TGF-β1 水平显著升高(P< 0. 01),且明显高于单一模型组(P< 0. 01)。 结论 　采用香烟烟雾暴露联合细菌感染合并2. 5%腺嘌呤诱导的方法可成功构建COPD 合并CKD 的大鼠模型,炎性反应可能在COPD 合并CKD 过程中起关键作用。

摘要:目的　通过血清非靶向代谢组学技术研究黄连解毒汤对健康SD 大鼠生理功能的影响。 方法　大鼠24 只适应性喂养7 d 后,随机分为空白组(N 组)、黄连解毒汤高剂量组(H 组)、中剂量组(M 组)、低剂量组(L组),每组6 只。N 组灌胃生理盐水,H 组、M 组、L 组分别按照每次6. 250 g/ kg、3. 125 g/ kg、1. 560 g/ kg 剂量灌胃1 mL、每天2 次、连续21 d。采取大鼠血清样本前禁食禁水12 h,经麻醉后腹主动脉取血并分离血清。通过GCTOF-MS 检测各组大鼠血清中代谢产物的变化,采用多元分析OPLS-DA 以及单变量统计学方法筛选其差异代谢物,再经过MetaboAnalyst 平台进行代谢通路分析。 结果 　与N 组相比,H 组、M 组、L 组大鼠血清中显著改变的代谢小分子主要有胆固醇、胆酸、核糖、白皮杉醇、皮质醇、油酸、琥珀酸、亚麻酸、醋酸和丙酮醇等(P< 0. 05)。相关分析表明黄连解毒汤能显著影响机体的初级胆汁酸代谢、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、α-亚麻酸代谢、甘油磷脂代谢,且其发挥体内作用可能与摄入的剂量有关,为深入揭示黄连解毒汤促进胆汁酸代谢的作用机制提供一定参考。 结论 　黄连解毒汤能促进体内初级胆汁酸生成并增强胆汁酸代谢通路的作用。

摘要:目的　强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种免疫介导的累及中轴关节、周围关节和肠道的慢性疾病,但外周膝关节和肠道的病因病机未明。本研究旨在研究AS 食蟹猴膝关节和肠道主要病理变化及机制。 方法　通过组织形态学分析及免疫组化实验,研究AS 外周膝关节及肠道组织的关键特征并初步分析其发病机制。 结果 　AS 食蟹猴外周膝关节病理特征在早期主要表现为关节表面软骨侵蚀、软骨下骨暴露、关节表面呈锯齿状;晚期主要表现为软骨表层肥大软骨细胞异位增生,通过软骨成骨和纤维成骨形成骨赘,软骨基本丢失。软骨和血管中MMP-3 的表达上调,引起软骨破坏并刺激血管增生。AS 食蟹猴小肠绒毛严重萎缩且隐窝增生明显,空肠和回肠的黏膜肠腺中可见大量γδT 细胞。 结论 　本研究通过对AS 食蟹猴膝关节和肠道的病理分析,获得了该自发模型膝关节与肠道组织的关键特征,并提出可能的发病机制。为探讨AS 的骨骼病变与外周疾病间的潜在关联,以及AS 的治疗提供新的见解。

摘要:目的　探讨胶原蛋白肽(collagen peptide,CP)联合海藻酸钠(sodium alginate,SA)对子宫内膜损伤的修复作用及机制。 方法　将48 只SPF 级雌性C57BL/6N 小鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组各16 只。模型组采用微创法经小鼠子宫颈向宫腔注射95%乙醇造成子宫内膜损伤,制备小鼠宫腔粘连模型;假手术组向宫腔注射0. 9%生理盐水;治疗组向宫腔注射95%乙醇后给予宫腔注射CP + SA 混合液。于造模7 d 后每组分别取8 只小鼠采集样本用于各项检测。HE 染色观察小鼠子宫组织病理形态学变化;改良Masson 三色染色观察子宫内膜纤维化情况;Western Blot 检测子宫组织中炎症因子NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18 蛋白表达水平;ELISA 检测小鼠血清中炎症因子IL-1β、IL-18 的表达。各组剩余的8 只小鼠按照雄雌比例为1∶2合笼,记录各组小鼠妊娠数量,于妊娠第14 天处死妊娠小鼠,记录胚胎数量。 结果 　(1)与假手术组相比,模型组小鼠子宫内膜厚度变薄,子宫内膜纤维化增加,并有炎症细胞浸润。此外,模型组子宫组织中炎症因子NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β 和IL-18蛋白表达水平以及血清中炎症因子IL-1β 和IL-18 水平均显著高于假手术组(P< 0. 05)。(2)与模型组相比,治疗组小鼠子宫内膜损伤程度、子宫内膜纤维化程度及炎症细胞浸润均减轻;此外,治疗组子宫组织中炎症因子NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β 和IL-18 蛋白表达水平及血清中炎症因子IL-1β 和IL-18 水平均显著低于模型组(P< 0. 05)。(3)与假手术组相比,模型组小鼠生殖能力下降(P< 0. 01);与模型组相比,治疗组小鼠生殖能力明显改善(P< 0. 01)。 结论 　CP 和SA 联合应用可有效改善宫腔粘连模型小鼠子宫组织病理改变,减轻子宫内膜损伤、炎症反应及纤维化程度,改善小鼠生殖能力,其作用机制可能与下调NLRP3 炎症小体表达有关,为CP 和SA 联合应用治疗宫腔粘连提供可靠的实验依据。

摘要:目的　建立小鼠血浆中黄卡瓦胡椒素B 的高效液相色谱-质谱联用(HPLC/ MS-MS)定量分析方法,并研究其在小鼠体内的药代动力学特征。 方法　KM 小鼠采用尾静脉注射(20 mg/ kg)、腹腔注射(20、40 和60 mg/kg)和灌胃(200、400 和600 mg/ kg)给药后,在0、5、30 min 及1、2、4、6、8、12、16 和24 h 眼底静脉丛取血,分离血浆样品,HPLC-MS/ MS 分析样品中黄卡瓦胡椒素B 的浓度,计算药代动力学参数,并评价不同途径给药下黄卡瓦胡椒素B 的生物利用度。 结果 　在0. 2 ~ 800. 0 ng/ mL 浓度范围内,黄卡瓦胡椒素B 线性关系良好(r = 0. 9995),定量下限为0. 2 ng/ mL,准确度在-8. 50% ~ 12. 50%,精密度在1. 73% ~ 12. 03%,且无明显基质效应(88. 68% ~ 102. 04%),确证该方法适用于小鼠血浆中黄卡瓦胡椒素B 的定量分析。药代动力学结果显示,黄卡瓦胡椒素B 腹腔注射和灌胃给药后在体内吸收迅速,血药浓度在给药0. 083 h 即为峰值,在腹腔注射20 ~ 60 mg/ kg 和灌胃200 ~ 600 mg/ kg 给药范围内呈现良好的线性药代动力学过程。黄卡瓦胡椒素B 的绝对生物利用度腹腔注射给药为53. 29%,灌胃给药为1. 38%。 结论 　本研究建立的HPLC-MS/ MS 定量分析方法,操作简便、准确、灵敏度高,成功应用于小鼠血浆中黄卡瓦胡椒素B 的药代动力学特征研究。

摘要:目的　本研究拟对比两种不同高脂饮食方式诱导的高脂血症大鼠肠道菌群变化与短链脂肪酸代谢特征,以宿主-肠道菌群-代谢角度探讨高脂血症可能的微观机制。 方法　SPF 级SD 大鼠分为:正常饮食组(CG组):饲喂大鼠维持饲料;高脂饮食组(HFD1 组):每天足量饲喂高脂饲料;限饲高脂饮食组(HFD2 组):每天限量饲喂高脂饲料80 g,不限量饲喂维持饲料。8 周后检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肝组织和肾周脂肪病理学变化;取结肠内容物进行16S rDNA 高通量测序,观察肠道菌群结构与功能的变化,并检测结肠内容物中短链脂肪酸的含量。 结果 　与CG 组相比,HFD1 组和HFD2 组大鼠摄食量下降,体重升高;血清中TC、TG、LDL-C 均显著升高;肝组织发生明显脂肪变性,肾周脂肪出现炎性病变;高脂干预后大鼠肠道菌群相对丰度显著变化,其中乳杆菌属相对丰度明显降低,菌群结构和功能变化明显,总短链脂肪酸、乙酸、丁酸、异丁酸下降显著。 结论 　两种高脂饮食方式均能引起大鼠高脂血症,且发病机制基本一致,均与脂质代谢以及肠道菌群紊乱有关。每日限制一定的高脂饲料饲喂量不仅能够降低高脂饲料对大鼠食欲的影响,还能提高大鼠高脂血症模型制备的稳定性,是一种值得推广应用的大鼠高脂模型制备方法。

摘要:目的　研究卵巢癌动物模型的特点及应用现况,为当下卵巢癌模型的规范化制备提供参考指导。 方法　通过从中国知网、万方、维普以及PubMed 数据库中以“卵巢癌”和“动物模型”为主题词,PubMed 数据库中检索建库至2023 年3 月1 日的卵巢癌动物实验性期刊文献,均进行建库至今的文献搜索,共收集相关文献共1428篇。从实验动物种类、年龄、实验造模方法、检测指标等方面进行总结,建立数据库进行系统分析。 结果 　筛选后共获得符合标准的实验性研究文献178 篇。构建建立卵巢癌动物模型多选用BALB/ c 品种的雌性鼠;大部分周龄选择4 ~ 6 周龄、6 ~ 8 周龄;造模方法使用最普遍的是异位移植,多接种在腋部皮下;在卵巢癌动物模型造模方法的使用上,以移植性模型使用最多,其中异位移植远高于原位移植的使用量;使用的细胞株或卵巢癌组织多为人源。检测指标检测最多的是肿瘤组织的外观指标、肿瘤病理及免疫组化。 结论 　卵巢癌动物模型在卵巢癌研究中应用广泛,但缺少专业规范的制备和评价标准,本文通过文献整理、数据归类分析,对卵巢癌的动物模型应用现状进行了详细分析,以期为构建规范化卵巢癌动物模型提供参考。实验多选用BALB/ c 品系鼠,以浓度为1 × 10⁷ / mL的人卵巢癌SKOV3 细胞注射于腋部皮下进行为期10 d 异位移植造模,短时间内能获得大量模型,成瘤率高且个体差异小,可为研究卵巢癌提供参考。

摘要:动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是常见心脑血管疾病的潜在危险因素,严重威胁着人类的健康和生命。AS 的防治和抗AS 新药的研发是医药学界一直关注的热点。选择理想的AS 动物模型是研究AS 防治措施及新药研发的关键。理想的AS 动物模型应是与人类AS 发病机理相似,病理及生化反应一致,且AS 模型复制的重复性高、操作简便、易于推广。小鼠具有繁殖性强、遗传性高、可塑性好、AS 成模性快等特点,成为了AS 研究的理想动物。本文就不同干预因素建立小鼠AS 模型的复制方法进行了比较分析,以期为开展AS 防治和中药新药研发提供参考和思路。

摘要:功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)是以胃和十二指肠区域功能障碍为主的非器质性疾病,中医学将其归为“痞满”和“胃脘痛”等范畴,并分为脾虚气滞、肝郁(肝胃不和、肝郁脾虚、肝郁气滞)、脾胃湿热、脾胃虚寒(弱)与寒热错杂等证型。中医药治疗FD 效果明显且接受度高,而病证结合的动物模型是开展相关研究的基础和前提。因此,本文对现有的FD 病证结合动物模型的研究进行整理和归纳,对具体造模方式和评价指标的选择原因进行探讨,同时提出目前研究的不足之处,以期为今后FD 病证结合动物模型的研究提供支持。

摘要:胃溃疡是一种常见的消化系统疾病,中医药治疗该病效果显著,但其治疗机制至今尚未明确。建 立一套科学客观的胃溃疡中医证候动物模型及模型评价体系,对促进中医药在此领域的发展以及进一步的研究具有重大意义。笔者对近10 年中医药治疗胃溃疡相关文献进行整理,总结和分析了胃溃疡中医证候动物模型的制作与评价方法,对肝胃不和证、脾胃湿热证、胃络瘀阻证、脾胃虚寒证、胃阴不足证、肝郁脾虚证等动物模型的制作方法进行总结,发现目前的胃溃疡动物模型存在中医辨证分型不够统一、造模思路与证型局限、造模方法标准不一、模型病证结合不紧密、模型评价体系不规范等问题,并提出模型改进意见,以期为此领域的研究提供参考。

摘要:随着老龄化社会的进程加快,神经退行性疾病发病率呈现逐年上升趋势。斑马鱼因拥有其他模式动物所不具备的优点,作为模式动物被广泛应用于医学和生命科学的各个研究领域。本文就近年来斑马鱼在常见的神经退行性疾病,如阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿舞蹈症、肌萎缩侧索硬化、脊髓性肌萎缩、遗传性痉挛性截瘫及其他神经系统相关疾病的研究应用进行综述。

摘要:支气管肺泡灌洗术是研究呼吸系统疾病的一项重要技术,已经在疾病研究中得到广泛运用。目前,临床患者的支气管肺泡灌洗操作流程已经逐步规范化,而小鼠作为研究肺部疾病重要的模型动物之一,尚缺乏针对小鼠的支气管肺泡灌洗液标准采集和检测流程,不规范的流程会导致该技术在研究中的推广和应用受阻,同时也会影响实验结果的准确性和可靠性。本文对国内外研究中小鼠支气管肺泡灌洗方法进行了系统总结,以期为今后运用并建立规范的灌洗流程提供参考和指导。

摘要:许多肽或蛋白质药物治疗的一个主要挑战是血浆半衰期短。通过将该类药物与白蛋白结合获得的药物称为白蛋白相关药物,有效延长血浆半衰期。动物模型作为研究药物药代动力学的重要工具是药物研究中不可或缺的一部分。本综述概括了两大类动物模型:啮齿类(野生型小鼠、大鼠模型,基因修饰小鼠模型)与非啮齿(猴)在白蛋白相关药物药代动力学研究中的应用与发展,为其进一步研究发展提供参考。