摘要: 目的　以U251 细胞和原位胶质瘤小鼠模型为研究对象,观察miR-328-3p 对脑胶质瘤细胞生长和凋亡的影响,探讨miR-328-3p-Akt/ mTOR 轴在雷公藤甲素抑制脑胶质瘤细胞生长中的作用及机制。 方法　在U251细胞中过表达miR-328-3p,再结合雷公藤甲素的处理,采用qRT-PCR、CCK8、克隆形成实验、流式细胞术、Western Blot 等方法检测miR-328-3p 在雷公藤甲素抑制脑胶质瘤细胞U251 生长中的作用;构建miR-328-3p 稳定过表达的原位胶质瘤小鼠模型,采用qRT-PCR 和小动物活体成像体内验证miR-328-3p 在雷公藤甲素抑制脑胶质瘤细胞生长的作用。结果　miR-328-3p 在脑胶质瘤细胞和组织中表达降低,其表达水平与原发性和复发性脑胶质瘤患者总生存率呈正相关;miR-328-3p 与雷公藤甲素可以协同作用抑制脑胶质瘤细胞的生长,促进脑胶质瘤细胞的凋亡,抑制Akt/ mTOR 信号通路的激活。结论　miR-328-3p 在脑胶质瘤细胞中起到抑癌基因的作用,雷公藤甲素可能通过miR-328-3p 促进脑胶质瘤细胞凋亡,抑制Akt/ mTOR 信号通路的激活,进而抑制脑胶质瘤细胞的生长。

摘要: 目的　观察高脂、高盐、高糖饲料等多种危险因素结合高血压大鼠(SHR)造成认知障碍复合模型大鼠的脑组织病理形态和铁沉积的变化。 方法　14 周龄SPF 级大鼠,每组8 只,正常对照组(同遗传背景WKY 大鼠,WKY 组),SHR 大鼠随机分4 组:对照组(SHRs 组)、高脂组(HFAT-SHRs 组)、高盐组(HSAIL-SHRs 组)、高糖-脂组(DM-SHRs 组,同时给予1%的链脲佐菌素腹腔注射,以血糖含量检测在11. 1 mmol/ L 以上作为糖尿病模型标准),WKY 组和SHRs 组予普通饲料,模型组分别予高脂、高盐和高糖饲料,干预32 周。检测大鼠血清及脑组织铁含量的变化、光镜下观察大鼠脑组织病理形态和亚铁含量(普鲁士蓝染色)变化,ELISA 法检测大鼠炎症因子水平、胆碱能水平和β-AP 的含量。结果　与WKY 组比较,各模型组大鼠脑组织存在细胞排列紊乱,细胞核固缩,尼氏小体减少或消失的情况,铁染色显示铁的面积增加,以DM-SHRs 组更为显著;SHRs 组与3 个模型组大鼠乙酰胆碱(ACh)、乙酰胆碱酯酶(AChE)水平降低,白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平升高(P< 0. 05,P<0. 05),血清和脑组织铁含量不同程度增加(P< 0. 05,P< 0. 05),组间比较无统计学意义(P> 0. 05)。结论　高脂、高盐和高糖因素能改变脑细胞组织形态,促使铁沉积,抑制内源性抗氧化活性,铁含量超载是高血压脑损害中导致认知障碍的可能因素之一。

摘要: 目的　研究姜黄素(curcumin,Cur)联合单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAOA)抑制剂氯吉灵(clorgyline,Clo)对肺癌细胞增殖的影响及作用机制。 方法　CCK-8 法检测不同浓度Cur 和Clo 对肺癌细胞H460增殖的作用;Western Blot 检测Cur、Clo、Cur 联合Clo 对H460 细胞MAOA 表达水平的影响;裸鼠移植瘤模型研究Cur、Clo、Cur 联合Clo 对H460 细胞体内增殖的抑制作用;免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测裸鼠移植瘤组织中各治疗组的Ki67 蛋白表达变化,TUNEL 染色检测裸鼠移植瘤组织中各治疗组细胞的凋亡水平。结果　Cur、Clo、Cur 联合Clo 对H460 细胞增殖均有抑制作用,且呈现剂量依赖性;并且能够抑制H460 细胞裸鼠移植瘤的生长(P< 0. 01),降低Ki67 的表达水平,增加细胞凋亡,且联合组呈现更显著的抑制效果(P< 0. 01)。结论Cur 联合Clo 抑制H460 肺癌细胞的增殖,其机制可能与降低细胞增殖蛋白Ki67 的表达、增加细胞凋亡有关。

摘要: 目的　通过尿液非靶向代谢组学方法,从代谢差异标志物及代谢通路方面,探讨成年SD 大鼠2 型糖尿病气阴两虚证的中医证候内在的生物物质基础。 方法　将SD 大鼠随机分为正常组和2 型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)气阴两虚证组,采用高脂高糖饲料饲喂、小剂量链脲佐菌素(streptozocin,STZ)35 mg/ kg 腹腔注射结合青皮附子散颗粒剂灌胃的方法建立T2DM 气阴两虚证模型。利用液质联用(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry,LC-MS)技术进行尿液非靶代谢组学分析,运用主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)和偏最小二乘法判别分析(Partial Least Squares Discriminant Analysis,PLS-DA),KEGG 数据库、HMDB 数据库、LIPIDMaps数据库和液相色谱与串联质谱联用(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/ MS)等鉴定潜在的生物标志物进行通路富集分析。结果　发现与糖尿病发生相关的代谢物变化涉及碳水化合物代谢9 条,脂质代谢12条,氨基酸代谢9 条,能量代谢2 条。结论　糖尿病气阴两虚证生物模型存在碳水化合物代谢、脂质代谢、氨基酸代谢、生物能量代谢紊乱,代谢组学研究方法有助于揭示中医证候的微观物质基础。

摘要: 目的　初步探讨绝经后脂质代谢紊乱是否参与抑郁症状的形成。 方法　24 只LDLR^{-/ -} 和16 只WT C57BL/6J 雌鼠,分为5 组(n = 8),分别为:WT + 普通饮食组(WT)、WT + 高脂饮食组(WT-H)、LDLR^{-/ -} 去卵巢+普通饮食组(LDLR^{-/ -} )、LDLR^{-/ -} 去卵巢+ 高脂饮食组(LDLR^{-/ -} -H)、LDLR^{-/ -} 去卵巢+ 高脂饮食+ 辛伐他汀组(XF),连续喂养3 个月。LDLR^{-/ -} 雌鼠双侧卵巢摘除联合高脂饮食建立绝经后脂质代谢紊乱模型。检测小鼠体重、脑总胆固醇(TC)及海马ERα、ERβ 水平、抑郁行为、脑内5-HT 水平;对脑TC 水平和抑郁相关指标进行相关性分析。结果　(1)LDLR^{-/ -}-H 组可复制绝经后脂质代谢紊乱特征,表现为小鼠体重显著增加、脑TC 水平显著升高、海马ERβ 表达明显下降;(2)LDLR^{-/ -}-H 组小鼠水平和垂直运动均显著降低,TST 静止时间显著增加,脑5-HT 水平显著降低;(3)XF 组小鼠脑TC 水平显著下降、抑郁行为明显改善、5-HT 水平明显提高;(4)小鼠脑TC 水平与5-HT 水平及抑郁样行为显著相关。结论　绝经后脂质代谢紊乱能诱导抑郁症状发生,通过调节脂质代谢可以显著改善抑郁症状。

摘要: 目的　肥胖抑郁大鼠模型建立并对比研究肠道菌群多样性的变化。 方法　采用高脂饲料喂养和CUMS 经典造抑郁方法建立肥胖抑郁模型。将SD 大鼠随机分为正常组(C 组)、单纯肥胖组(F 组)、单纯抑郁组(Y组)和肥胖抑郁组(FY 组),整个造模持续5 个月,通过糖水偏好实验、旷场实验和强迫游泳实验来评估大鼠抑郁样行为,检测模型鼠血清雌激素水平和血脂4 项,并采集各组大鼠粪便样品,通过16S rDNA 高通量测序法和生物信息分析软件分析测序结果,比较各组大鼠肠道菌群多样性的变化。结果　高脂饮食和CUMS方法成功制作肥胖抑郁鼠模型,肥胖和肥胖抑郁雌性大鼠雌激素水平明显升高,而雄性各组间雌激素水平无显著性差异。雌雄鼠的FY组肠道菌群α 多样性具有显著差别,拟杆菌门和厚壁菌门B/ F 比值下降,且雄鼠肥胖抑郁B/ F 值只有雌鼠的一半左右。在属水平,研究结果表明雌雄鼠FY 组和F 组肠道菌群中Blautia 等8 个菌群变化一致,但是雌性与雄性在拟杆菌属等各有少量菌群的变化不一致。雌雄肥胖抑郁模型中,肠道菌群革兰氏阳性菌和阴性菌的组成出现差异,G⁺的构成,雌性和雄性均由由厚壁菌门和放线菌门构成,但构成比例不一样。G-雄性主要由厚壁菌门、拟杆菌和脱硫杆菌构成,雌性的G^-主要由拟杆菌门、疣状体菌门和脱硫杆菌构成,构成比也不一样。结论　通过高脂饮食和CUMS 联合孤养可以建立肥胖抑郁模型,但雌雄肥胖抑郁大鼠肠道菌群的组成不一致。

摘要: 目的　建立妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy,HDCP)孕鼠模型,观察HDCP 对不同胎龄早产大鼠甲状腺形态及功能的影响。 方法　SD 孕鼠随机分为对照组和HDCP 组,HDCP 组自妊娠期(gestational day,GD)第13 天起注射左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME;250 mg/ (kg·d)),对照组注射等量生理盐水。早产大鼠于GD18 ~ 21 行剖宫产术获得,记录两组仔鼠体重及身长;分离肝及甲状腺,肝组织匀浆用于检测甲状腺激素水平,甲状腺组织用于观察甲状腺形态及超微结构。结果　与对照组相比,HDCP 组孕鼠血压及尿蛋白明显升高(P< 0. 05);HDCP 组早产大鼠体重及身长明显低于对照组(P< 0. 01)。与对照组相比,HDCP 组19 ~21 d 早产大鼠TSH 水平明显升高(P< 0. 01),T3、T4 水平差异无显著性;HE 染色显示,对照组仔鼠滤泡腔于GD18出现,而HDCP 组于GD19 出现,且数量明显减少;透射电镜下,HDCP 组粗面内质网明显肿胀、脱颗粒,伴储积物。结论　成功建立HDCP 孕鼠模型;与对照组相比,HDCP 组早产大鼠宫内生长受限,甲状腺功能减退,甲状腺组织形态发育延迟,且可能由内质网功能障碍导致。

摘要: 目的　探讨白藜芦醇保护大鼠运动性肝损伤的可能机制。 方法　7 周龄雄性SD 大鼠32 只,SPF级,随机分为安静对照组(C 组)、白藜芦醇对照组(R 组)、运动性肝损伤模型组(M 组)和白藜芦醇干预组(RM组),每组8 只。C 组、R 组不进行运动干预,其余两组进行4 周大强度跑台训练(坡度10°,以10 m/ min 速度起始,每5 min 速度递增5 m/ min,至35 m/ min 不再增加,运动至力竭)。每次训练前1 h,R 组、RM 组灌胃白藜芦醇溶液(150 mg/ (kg·bw),5 mL/ (kg·bw)),其余两组灌胃等体积溶剂。末次训练结束后24 h,取大鼠血及肝。全血生化仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性;HE 染色后观察肝组织形态;免疫组化法检测肝核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)、凋亡相关蛋白B 淋巴细胞瘤因子-2(Bcl-2)和Bcl-2 相关X 蛋白(Bax)蛋白质表达水平;TUNEL 法检测肝细胞凋亡水平;比色法检测肝超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平。结果　与M 组相比,RM 组大鼠肝损伤标志物血清ALT、AST 活性及肝MDA 和细胞凋亡水平显著降低(P<0. 05 或P< 0. 01),肝Nrf2 与HO-1 蛋白质表达水平、SOD 活性及Bcl-2/ Bax 比值显著升高(P< 0. 05 或P<0. 01),且肝病理性改变有效改善。结论　4 周白藜芦醇干预可有效改善大鼠运动性肝损伤,其机制可能是通过激活肝Nrf2 信号通路,拮抗氧化应激诱导的细胞凋亡过度发生。

摘要: 目的　探讨阿片μ 受体(μ opioid recepters,μRs)阻滞剂对习得性无助小鼠运动能力及行为的影响。 方法　将小鼠随机分为学习-消退组、共轭组、对照组。在小鼠学习逃避电击刺激实验前进行μRs 阻滞剂β-FNA 或生理盐水(Sal)预处理。将小鼠在旷场实验中的运动距离进行t 检验以观察小鼠的运动能力,通过穿梭箱、强迫游泳、高架十字迷宫、旷场等实验探究阻滞μRs 后小鼠无助行为的变化。结果　两组小鼠较对照组运动距离无显著性差异;两组小鼠在3 d 学习期内的被电击时间无差异;两组小鼠第2 天与第3 天的鼻触器触碰总次数具有显著性差异(P< 0. 001)。结论　阿片μ 受体阻滞剂对习得性无助小鼠的运动能力无影响,μRs 在对小鼠的逃避厌恶刺激的行为形成过程中有着重要调节作用。

摘要: 目的　系统梳理并整合基于细胞/ 动物模型开展的药物筛选(简称药筛)和药物评价相关文献,提取关键字段,构建动物模型药筛数据库。 方法　制定动物模型药筛数据采集表及采集规范,按照检索策略检索动物模型药筛文献,提取关键文字及数据信息,对药筛实验数据进行预处理、整合、分析和可视化展示。结果　动物模型药筛数据库以基于细胞/ 动物模型的药物评价实验为主,涵盖基本信息、实验分组、实验方法、动物表型及药物评价信息,并对表型信息进行可视化展示。共获得691 套动物模型药筛实验数据,可实现动物模型药筛实验数据的集成共享。结论　构建以细胞/ 动物水平实验数据为主的动物模型药筛数据库,为药物筛选提供数据支持,促进数据驱动下的生物医药创新研究与新药研发。

摘要:动脉粥样硬化(arteriosclerosis,AS)是常见的心脏病和中风等心脑血管疾病的病理基础,其诱因具有复杂、多样的特点。小鼠模型凭借成熟的基因改造优势,为研究AS 发病机制和药物疗效验证等方面提供了重要依据。本文基于脂蛋白代谢及组织病理学变化情况,综述了传统转基因与新型小鼠模型的病理特点及其在药物开发中的临床前应用潜力和局限性,以便今后该疾病相关机制研究可以有针对性地选择模型。

摘要:人类可以模仿他人行为并产生相同的情感体验,这一现象被称为情绪传染。作为医学研究中常用的实验动物,啮齿类动物(主要为大鼠和小鼠)同样存在情绪传染现象,并与恐惧、焦虑、抑郁等负面情绪有关。为了进一步了解动物间不同情绪的传播过程,本文将情绪传染的定义和过程、影响因素、主要类型及其生理学机制进行综述,以期为后续研究提供参考。

摘要:动物行为学是用于评价动物学习记忆的基本实验手段,广泛应用于生理病理机制研究及药效评价。评价大小鼠学习记忆行为检测方法根据实验原理可分为惩罚性、自发性和奖励性三类,其中奖励性操作条件反射实验是基于奖励性原理和斯金纳条件反射原理的行为学检测方法,为检测动物学习记忆中的高级认知功能提供了一种更全面更精细的检测手段,尤其适合于现代高科技条件下执行复杂操作任务时的认知作业能力评价。本文对奖励性操作性条件反射实验的发展历程、实验装置、实验方法及应用领域等方面进行了概述,为此类方法今后在国内学习记忆行为学领域的研究与应用提供参考。

摘要:抑郁症是影响范围广、人数多的精神/ 心境障碍,其经典致病机制假说包括HPA(hypothalamicpituitary-adrenocortical axis)轴功能异常、单胺类和神经可塑性缺陷等。要充分阐明抑郁症多种致病因素,及不同病因之间复杂的相互作用关系,仍需更加深入的研究。慢性应激是抑郁症主要临床诱因,利用此动物模型可充分揭示发病过程中复杂的病理机制及其变化趋势,且利于将转化医学研究结果快速有效地向临床转化,对疾病预防和治疗有重要意义。目前现有相关综述主要围绕经典的HPA 轴异常、单胺类和神经可塑性缺陷、大脑神经元结构功能、中枢神经递质和因子及其受体等方面异常展开。本文综述了近年抑郁症研究热点和新发现,包括基因变异和表观遗传修饰、神经胶质细胞(星形胶质细胞和小胶质细胞)结构功能异常、线粒体功能障碍、机体系统水平异常(氧化应激、免疫炎症反应和微生物-肠-脑轴),旨在系统呈现慢性应激诱导动物抑郁样行为机制研究进展,为后续有针对性地深入研究致病机制,及其临床预防和治疗提供新思路。

摘要:咬合力是动物生存能力的重要指标。测量犬咬合力,对犬牙修复、犬食物与玩具评估以及警方筛选并使用犬、评估警犬武力性质等都有积极意义。我国学者对犬咬合力测试的研究更多的是警方人员,且更多以产品研发为主,很少开展实际的测量工作。本文综述了咬合法、肌电法、杠杆模型法和有限元分析测量法等各种犬咬合力测试方法,以期为我国犬类咬合力研究提供参考。

摘要:皮瓣缺血再灌注损伤(flap ischemia-reperfusion injury,FIRI)动物模型可以为皮瓣移植术后坏死的发病机制和治疗提供有价值的信息,建立合适FIRI 动物模型是了解FIRI 病理生理学和实验新防治方法的必要前提。在设计FIRI 动物模型时,重要的是要了解各种动物模型的特点、造模方法和独特表现,以及了解所选动物模型哪些部位的组织结构或功能与人类皮瓣相似。半个多世纪以来,研究者们运用大鼠分别构建了腹部和背部岛状皮瓣模型、大鼠背部随意皮瓣模型以及一些新型FIRI 模型。然而,到目前还没有一个理想的模型能够完全模拟人类皮瓣移植术后坏死这种复杂机制以及对其防治的方法。因此,本文总结了目前用来制作FIRI 模型最常用的大鼠模型,有助于研究者根据研究设计来选择大鼠合适的部位和方法进行造模,更有助于实验的顺利开展。