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2024, 32(3):275-285. DOI: 10. 3969 /j.issn.1005-4847.2024.03.001
摘要: 目的 通过复合因素建立射血分数保留心力衰竭(HFpEF)大鼠模型,评估其特征,并探讨心肌应变参数与心肌肥厚及纤维化的相关性。 方法 8 只 WKY 大鼠和 8 只自发性高血压大鼠( SHR)作为对照组,给予普通饲料至实验结束。 32 只 SHR 大鼠平均分 SHR + S 组、SHR + F 组、SHR + SF 组及 SHR + 复合组,分别给予高盐饲料、高脂饲料、高盐-脂饲料、高盐-脂-糖饲料联合腹腔注射链脲霉素 30 周。 造模结束后,测量心重/ 体重(HW/BW)、收缩压( SBP) 及舒张压 ( DBP);行超声心动图测量左心室 ( LV) 舒张末内径 ( LVIDd)、 LV 前壁厚度(LVAWd)、LV 后壁厚度(LVPWd)、LV 射血分数(LVEF)、等容舒张时间( IVRT)、LV 舒张早期二尖瓣流入峰值速度(E) / 二尖瓣环运动速度(e’);斑点追踪超声心动图测量全纵向应变(GLS)及应变率(GLSr)、全径向应变(GRS)及应变率(GRSr)、全周向应变(GCS)及应变率(GCSr);血清学检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、葡萄糖(GLU)及糖化血清蛋白(GSP),ELISA 法检测血清 B 型利钠肽(BNP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及半乳糖凝集素 3(Gal-3);心肌进行苏木精-伊红(HE)及 Masson 染色观察心肌细胞及纤维化,并计算心肌细胞横截面面积(CSA)及胶原体积分数(CVF);此外,分析心肌应变参数和 CSA 及 CVF 的相关性。 结果 与对照组比较,各模型组,尤其是 SHR + 复合组的 HW/ BW、SBP、DBP、血清指标(TC、TG、LDL-C、GLU、GSP、BNP、AngⅡ及 Gal-3)和超声心动图参数(LVIDd、LVAWd、LVPWd、IVRT 及 E/ e’)显著升高;斑点追踪超声心动图参数 GLS、GLSr、GRS、GRSr、GCS 及 GCSr 的绝对值显著下降;心肌组织 HE 及 Masson 染色提示明显心肌细胞肥大及纤维化,并且 CSA 及CVF 显著增加(P< 0. 05)。 相关性分析显示,GLSr、GCS 及 GCSr 与 CSA 密切相关;GLS、GLSr 和 GCSr 与 CVF 密切相关(P< 0. 01)。 结论 本研究模拟高血压及糖脂代谢紊乱诱导的 HFpEF 大鼠模型在病因、临床表现及心肌病理改变上复刻了 HFpEF 的基本特征,可能是代谢综合征相关 HFpEF 的可靠动物模型。 此外,心肌应变参数与心肌肥厚及纤维化密切相关,可能间接反应心肌细微病变和功能障碍。
2024, 32(3):286-296. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 002
摘要: 目的 利用 RNA-seq 技术比较运动组与对照组小鼠股四头肌中差异表达的 lncRNA 和 mRNA,探讨抗阻运动作用于 SAMP8 小鼠的潜在调控机制。 方法 12 只 28 周龄雄性 SAMP8 快速衰老小鼠分为模型组(M组)、抗阻运动组(R 组),每组 6 只;另设 6 只同龄 SAMR1 抗衰老小鼠作对照组(C 组)。 R 组经递增负重爬梯运动训练 8 周。 每 1 周测定相对抓力、每 2 周测转棒测试时间。 取材后取右侧股四头肌进行苏木素-伊红(HE)染色观察其组织学变化;并取左侧股四头肌进行 RNA-seq,筛选出差异表达的 lncRNA( long non-coding RNA,lncRNA)和mRNA,然后对这些基因进行基因本体(Gene Ontology,GO)、京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析。 结果 (1)干预前,SAMP8 小鼠相比较于自然衰老的 SAMR1 小鼠表现出相对抓力以及加速转棒测试时长显著下降(P< 0. 01);干预后,与 M 组相比,R 组相对抓力以及转棒时长均出现显著增加(P< 0. 01)。 (2)HE 染色结果显示,M 组肌纤维横截面积与 C 组比较显著下降(P< 0. 01);R 组肌纤维横截面积与 M 组比较显著增加(P< 0. 01)。 (3)通过差异表达分析,相比于 M 组,R 组有 182 个表达水平上调和 218个表达下调的 lncRNA 以及 454 个表达上调和 289 个表达下调的 mRNA。 R 组与 M 组之间差异 lncRNA 的靶基因KEGG 显著富集的通路有产生 IgA 的肠道免疫网络、NF-κB、炎症性肠病等信号通路。 结论 (1)本研究证明了抗阻运动能够改善 SAMP8 小鼠肌少症的骨骼肌机能,利用 RNA-seq 分别鉴定出 M 组、R 组小鼠的差异 lncRNA 和mRNA。 这些差异基因可能是肌少症的潜在治疗靶点。 (2)通过分析差异表达 lncRNA 的靶基因以及 mRNA 的生物学信息,从而为进一步了解抗阻运动改善肌少症的机制提供了可能。
2024, 32(3):297-306. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 003
摘要: 目的 探讨母体葡萄膜炎暴露对子代小鼠受光感受器间视黄醇结合蛋白(interphotoreceptor retinoidbinding protein,IRBP)诱导的实验性自身免疫性葡萄膜炎( experimental autoimmune uveitis,EAU)免疫效应的影响。 方法 从本课题组前期获得的受双亲 EAU 暴露的子代 C57BL/ 6J 小鼠眼球的 RNA 测序转录组数据中,筛选免疫相关差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。 利用基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)的富集分析,确定这些免疫相关的差异表达基因生物学途径。 通过蛋白质互作网络(protein-protein interaction networks,PPI)分析交集基因以此鉴定出枢纽基因。 进一步通过荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,qPCR)确定筛选出的异常表达的枢纽基因是否也在受母体葡萄膜炎影响的子代小鼠中差异表达,最后通过视网膜抗原 IRBP651-670 诱导受母体活动期炎症影响的子代以评价母体葡萄膜炎对子代患葡萄膜炎的易感性以及相关免疫效应的影响。 结果 从受双亲葡萄膜炎影响的子代小鼠眼球组织中鉴定出 72 个免疫相关差异基因。 这些基因主要富集参与 Toll 样受体信号通路、MAPK 信号通路以及 B 细胞受体信号通路等。 进一步进行 PPI 网络互作分析,筛选出 proteasome 26S subunit, ATPase 5 ( Psmc5)、proteasome 26S subunit, ATPase 3 ( Psmc3)、 proteasome 26S subunit ubiquitin receptor, non-ATPase 4 ( Psmd4) 和proteasome 26S subunit, non-ATPase 8 (Psmd8) 这 4 个枢纽基因。 qPCR 检测证实受母体葡萄膜炎影响的子代小鼠中也上调表达这 4 个枢纽基因。 而且与健康子代相比,150 μg IRBP 抗原诱导可增加受活动期炎症影响的子代EAU 临床表现的严重程度和病理组织学损伤(P= 0. 0087,P= 0. 0410);另外,受母体活动期炎症影响的子代在IRBP 诱导的 EAU 中脾 T 细胞增殖功能增强,其血清中产生的细胞因子 IL-17 和 IL-6 增加(P= 0. 0450,P=0. 0300)。 结论 母体活动性炎症暴露加剧子代小鼠受 IRBP 诱导的 EAU 疾病的严重性,增强抗原特异性 T 细胞增殖以及血清中 IL-17、IL-6 的产生,可能与受影响的子代上调表达的 4 个枢纽基因 Psmc5、Psmc3、Psmd4、Psmd8 相关。
2024, 32(3):307-316. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 004
摘要: 目的 建立一种核定位人源 α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)转基因小鼠,并探究人源 α-syn 核输入对小鼠行为的影响。 方法 构建 hSNCA-NLS 和 EGFP 的慢病毒载体,利用显微注射法建立转基因小鼠模型,通过 PCR 和 Western Blot方法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型和蛋白表达情况。 采用免疫荧光鉴定人源 α-syn 在小鼠脑组织中的共定位情况,同时采用旷场、转棒、O 迷宫实验评价转基因小鼠的行为改变情况。 结果 hSNCANLS 基因成功插入小鼠基因组中,人源 α-syn 成功表达,并且有明显的核定位现象。 进一步研究发现,核定位人源α-syn 转基因小鼠在 2 月龄时开始表现出了运动功能障碍,发生了星形胶质细胞增生和炎症反应,于 9 月龄时表现出了明显的焦虑样症状,γ-氨基丁酸(GABA)基因表达减少,这些表现一直持续到小鼠 12 月龄。 结论 成功构建了核定位人源 α-syn 转基因小鼠,小鼠表现出明显的运动功能障碍和焦虑样症状。 该模型的成功建立可以为研究 αsyn 核定位现象在帕金森病中的作用提供一定的研究基础。
赖碧玉,洪梦颖,李兴,何永嘉,陈瑶,李新伍,石佳,田子寒,李丹,聂晶,佘畅
2024, 32(3):317-328. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 005
摘要: 目的 建立理想的大鼠肝郁脾虚型腹泻型肠易激综合征( diarrhea predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)的造模方法,为 IBS-D 伴焦虑抑郁状态的临床研究提供动物模型基础。 方法 本研究共用 60 只大鼠:(1)首先将 20 只大鼠随机分为空白组、3%乙酸灌肠组、4%乙酸灌肠组、5%乙酸灌肠组,造模及观察期结束后,通过腹泻相关指数、结肠病理组织学等观察不同造模浓度引起的腹泻状态及结肠损伤程度。 (2)评估出较优造模浓度后,将另外 40 只大鼠随机分为对照组(a 组)、单纯乙酸灌肠组(b 组)、乙酸 + 束缚组(c 组)、乙酸 + 束缚 + 夹尾组(d 组),分别予以不同干预,共干预 8 d。 干预结束后对大鼠一般情况、腹泻相关指数、旷场实验( open-field test,OFT)评分、结肠病理组织学等指标进行评价。 结果 (1)与空白组比较,4%乙酸灌肠组干预后第 1 ~ 3 天粪便性状评分升高(P< 0. 001),干预后第 4 ~ 7 天粪便性状评分逐渐降低,1 周后,与空白组相比,粪便性状评分无显著性差异(P> 0. 05),体重相对较低(P< 0. 01),粪便含水量升高(P< 0. 001);与空白组相比,5%乙酸灌肠组体重较低(P< 0. 001),粪便性状评分、粪便含水量、腹泻指数升高(P< 0. 01);3%乙酸灌肠组与空白组相比,无显著性差异(P> 0. 05)。 结肠病理组织显示,与空白组相比,4%乙酸灌肠组黏膜结构完整,有少量炎症细胞浸润,病理组织评分无显著性差异(P> 0. 05),5%乙酸灌肠组有中量-大量炎症细胞浸润,病理组织评分升高(P< 0. 01)。(2)与 a 组比较,b 组体重较低(P< 0. 001),粪便性状评分、粪便含水量、腹泻指数升高(P< 0. 01),与 a 组及 b 组比较,c 组和 d 组,体重较低(P< 0. 001),粪便性状评分、粪便含水量、腹泻指数升高(P< 0. 01),结肠运转时间减少(P< 0. 01);与 c 组相比,d 组粪便含水量较高(P< 0. 001)。 在 OFT 评分方面,与 a 组及 b 组相比,c 组及 d 组OFT 评分在总距离、站立次数、直立次数均减少(P< 0. 05);与 c 组相比,d 组在 OFT 评分总距离、站立次数、直立次数均减少(P< 0. 05)。 结肠病理组织显示,4 组黏膜结构均完整,有不同程度的炎症细胞浸润,病理组织评分上,与a 组及 b 组相比,c 组和 d 组较高(P< 0. 05)。 结论 4%乙酸浓度为 IBS-D 造模适宜浓度,叠加束缚后,能更好地模拟 IBS-D 腹泻、内脏高敏感特征性状态,叠加夹尾后能成功制备出肝郁脾虚型 IBS-D 模型。
2024, 32(3):329-336. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 006
摘要: 目的 比较肿瘤细胞注射和肿瘤组织块移植方法建立小鼠肝癌原位模型的差异,为小鼠肝癌原位模型的建立提供技术参考。 方法 取健康雄性 KM 小鼠,随机分为 4 组:A 组注射小鼠肝癌 H22 细胞;B 组注射腹水型肝癌 H22 细胞;C 组采用小鼠肝癌组织块移植法;D 组肝部注射生理盐水作为假手术组。 定期观察各组小鼠活动情况、体重变化。 记录 4 组小鼠的生存时间。 观察各组小鼠肝部成瘤状况、肿瘤程度、与腹腔脏器粘连程度和转移情 况, 并 进 行 B 超 成 像, 检 测 血 清 中 甲 胎 蛋 白 ( alpha-fetoprotein, AFP )、 异 常 凝 血 酶 原 ( des-gammacarboxyprothrombin,DCP)的浓度及苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化。 结果 A 组、B 组、C 组小鼠造模操作时间分别为(3. 36 ± 0. 44)min、(3. 30 ± 0. 41)min、(5. 68 ± 0. 65)min。 建模第 25 天,A 组、B 组、C 组小鼠成瘤率均 100. 0%,A 组腹腔重度粘连率为 40. 0%,B 组腹腔重度粘连率为 60. 0%,C 组与 D 组均未出现重度腹腔粘连。 A 组、 B 组、C 组小鼠腹水出现率分别为 40. 0%、100. 0%、0. 0%;腹壁瘤出现率分别为 30. 0%、60. 0%、0. 0%。B 组小鼠还存在肝转移情况(40. 0%)。 B 超成像、血清 AFP 和 DCP 水平检测、组织病理学检查结果显示,与 D 组小鼠相比,A 组、B 组、C 组小鼠肝边缘均不光滑,回声欠均匀,可见稍低回声包块;保持 AFP、DCP 高分泌;存在大量炎症细胞与肿瘤细胞。 结论 在第 25 天时,3 种方法均可以建立肝癌原位移植模型,其中,相较于肝癌组织块移植,肿瘤细胞注射具有操作简单、肝内存在多个转移结节的特点。 而肝癌组织块移植相较于肿瘤细胞注射,则具有对腹腔等脏器影响较小等特点。
2024, 32(3):337-346. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 007
摘要: 目的 研究冠心宁片(Guanxinning,GXN)对扩张型心肌病( dilated cardiomyopathy,DCM)的保护作用,并从 NLRP3 / ASC/ Caspase-1 通路深入探讨其对心肌细胞焦亡的作用机制。 方法 随机将大鼠分为 GXN 低剂量组、GXN 高剂量组、地高辛组、模型对照组和正常对照组,通过阿霉素(doxorubicin,DOX)累积注射 17. 5 mg / kg 诱导大鼠 DCM 模型,同时连续给药 10 周。 超声心动图检测心功能指标,ELISA 检测血清 IL-1β 和 IL-18 水平,RTPCR 法检测心肌组织 NLRP3、ASC、Caspase-1、NF-κB、TXNIP、IL-1β 和 IL-18 的 mRNA 表达,免疫组化、免疫荧光染色和 Western Blot 检测 NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18、GSDMD、GSDMD-NT 的蛋白表达及 TUNEL 染色结果,透射电镜观察心肌细胞显微结构的变化。 结果 与正常对照组比,模型对照组的 IVSs、IVSd、LVPWs、FS、SV、EF 和HR 显著降低,LVIDs、ESV 及血清 IL-1β、IL-18 显著增加,NLRP3、ASC、Caspase-1、NF-κB、TXNIP、IL-1β 和 IL-18 的mRNA 表达均显著增加,NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18、GSDMD-NT 的蛋白表达及 TUNEL 染色面积明显增加,显微结构明显改变。 与模型对照组相比,冠心宁片可显著增加 IVSs、SV、FS、EF 和 HR,显著降低 LVIDs、ESV 和血清 IL-1β、IL-18 水平,降低心衰大鼠的 NLRP3、ASC、Caspase-1、NF-κB、TXNIP、IL-1β、IL-18 的 mRNA 和 NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18、GSDMD-NT 的蛋白水平及 TUNEL 染色面积,显微结构明显改善。 结论 冠心宁片可以有效改善阿霉素诱导的扩张型心肌病,可能是通过抑制 NLRP3 / ASC/ Caspase-1 通路改善扩张型心肌病大鼠的心肌细胞焦亡实现的。
2024, 32(3):347-354. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 008
摘要: 目的 对目前已有心肌纤维化染色方法进行优化,弥补目前心肌纤维常用染色方法在定量分析中存在的胶原纤维漏读及误读等问题,为心肌纤维化半定量及诊断提供参考。 方法 利用实验室前期构建的心肌组织特异性 cTnT R141W 基因突变致扩张型心肌病转基因小鼠模型,制备心脏组织石蜡切片,分别进行马松三色(Masson’s trichrome,Masson)染色法、天狼星红(picric sirius red,PSR)染色法、天狼星红-品红(van Gieson,VG)染色法、天狼星红-固绿(sirius red / fast green staining,SR/ FG)染色法染色,利用 Image J 2. 1. 0 软件对胶原纤维面积进行定量比较,并从染液浓度、染色时间、酸性溶液预染 3 个方面对 SR/ FG 染色法进行优化,对后续的胶原纤维定量分析进行应用验证。 结果 4 种特染方法均可实现胶原纤维的分布观察,其中,优化后的 SR/ FG 染色法,即 0. 1%天狼星红-苦味酸酸性溶液预染 5 min,随后于 0. 1%天狼星红-苦味酸与 0. 04%固绿的混合液中染色 1 h,在软件识别中具有更低的漏读率和遗失率。 结论 本文优化后的 SR/ FG 染色法较其他传统胶原纤维特染方法,胶原纤维与心肌组织着色鲜亮、颜色对比明显、稳定性佳、方便快捷,更适用于后续胶原纤维占比定量分析应用。
2024, 32(3):355-361. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 009
摘要: 目的 通过对犬脊柱解剖形态的测量及分析,建立透视下犬椎体成形术穿刺模型,并通过术后影像学分析,评估该模型建立方法的有效性和安全性。 方法 测量 6 只 12 ~ 24 月龄犬腰椎标本形态及其参数:L1 ~L7 椎体高度、椎体基底宽度、椎间盘上缘距椎体最狭部距离、脊椎乳突垂直线距椎间盘上缘距离、横突中点与椎间盘下缘垂直距离,以明确犬椎体解剖特点,确定骨水泥注射的最佳位置、注射方向以及注射深度后,对 6 只健康比格犬(体重 20 ~ 25 kg)L4、L5、L6 椎体建立椎体成形术用穿刺模型。 术后 4 周处死后行影像学检查,主要观测指标包括:手术时间、术后植入骨水泥分布、椎管及椎体前缘完整性。 结果 通过犬解剖观测,椎体高度从 L1 ~ L5 逐渐增大,从 L5 ~ L7 逐渐减小,椎体基底部宽度从 L1 ~ L7 逐渐增大。 脊椎乳突垂直线距椎间盘上缘距离呈 L1 ~L7 逐渐增加趋势(1. 9 ~ 4. 0 mm)。 横突根部中点和椎间盘下缘的距离由 L1 ~ L5 逐渐增加(4. 7 ~ 6. 9 mm),L4、L5、L6 节段每只犬横突根部中点和椎间盘下缘的距离之间(P= 0. 925)无统计学意义。 以脊椎横突根部中点为穿刺点,置入向和水平面呈 20° ~ 30°,头倾方向 5° ~ 15°,穿刺深度 1. 2 ~ 1. 5 cm。 若向椎体尾侧穿刺,穿刺针尾的倾角度为 30° ~ 35°,进针深度为 1. 5 ~ 1. 8 cm,可以构建犬椎体穿刺手术模型。 共成功制作 15 个犬椎体穿刺手术模型,单节段平均手术时间 22. 7 ± 4. 6 min(15 ~ 30 min)。 术中 1 个椎体节段出现脊髓损伤导致下肢瘫痪、大小便失禁等症状,2 个椎体骨皮质破裂,未出现麻醉或感染导致死亡。 术后 4 周的 Micro-CT 三维重建均显示骨水泥在犬椎体松质骨内分布,新生骨组织包裹植入材料,无渗漏,无椎管及椎体前壁破损等并发症。 结论 在犬 L4 ~ L6解剖基础上,以横突根部中点为骨性标志,可以成功建立一种安全可靠的犬椎体成形术用穿刺模型。
史晓伟,陈静静,余国彦,张艺尹,陈丽霞,赵莉莉,杨永明,王靖,阎磊,杨喜花
2024, 32(3):362-368. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 010
摘要: 目的 研究冬虫夏草来源的猫棒束孢(Isaria felina,IF)联合环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对肝癌 H22 荷瘤小鼠的治疗作用。 方法 建立 H22 荷瘤小鼠模型,随机分组,设正常对照组(NC group,蒸馏水)、模型对照组(MC group,蒸馏水)、CTX 组(CTX group,25 mg / kg)、IF 组( IF group,400 mg / kg)和 IF + CTX 组( IF + CTX group,IF 400 mg / kg + CTX 25 mg / kg),每组 5 只小鼠;蒸馏水、IF 灌胃给药,CTX 腹腔注射给药,连续给药 10 d。 实验结束后,计算各组小鼠平均肿瘤体积和瘤重、抑瘤率、q 值、免疫器官脏器指数;检测血常规和血清细胞因子含量;观察肿瘤组织苏木精-伊红(HE)染色病理形态变化。 结果 各给药组小鼠的肿瘤体积和重量均显著低于 MC 组(P< 0. 05)。 CTX 组、IF 组、IF + CTX 组小鼠的抑瘤率分别为 49. 3%、34. 2%、72. 8%,q 值为 1. 09。 IF + CTX 组白细胞(WBC)、淋巴细胞(Lymph)、血小板(PLT)数量显著高于 CTX 组(P< 0. 05)。 MC 组小鼠的脾指数显著高于NC 组,IF + CTX 组小鼠脾指数显著低于 MC 组(P< 0. 05)。 MC 组小鼠的血清 IFN-γ 水平显著低于 NC 组,IF 组和IF + CTX 组的 IFN-γ 水平显著高于 MC 组和 CTX 组(P< 0. 05)。 MC 组肿瘤细胞生长状态良好,数量多,排列紧密;CTX 组、IF 组和 IF + CTX 组肿瘤组织可见肿瘤细胞排列松散,多处肿瘤细胞灶性坏死,坏死细胞核固缩碎裂。 结论 IF 和 CTX 联用对 H22 荷瘤小鼠有相加的抑瘤作用,可减轻小鼠的免疫功能抑制,具有免疫调节功能。
2024, 32(3):369-377. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 011
摘要: 目的 研究小肠过表达鸟类癌基因( virus sloan-kettering institute,v-ski)的细胞内同源物( Ski)蛋白对醋酸致扭体小鼠的抑炎镇痛作用。 方法 选取 8 周龄雄性 ICR 小鼠,给予腹腔注射现配的 0. 7%醋酸溶液(0. 1mL/ 10 g)诱发扭体反应。 实验小鼠分为假手术( sham) 组、醋酸( acetic acid) 组、醋酸( acetic acid) + 布洛芬(ibuprofen)组、醋酸(acetic acid) + 腺病毒空质粒(ad-EGFP)组、醋酸(acetic acid) + 腺病毒 ski 质粒(ad-ski)-1 组、醋酸(acetic acid) + 腺病毒 ski 质粒( ad-ski)-2 组和醋酸( acetic acid) + 柳氮磺胺吡啶( sulfasalazine)组,每组 10只。 观察并记录第 1 次扭体出现的潜伏期,同时记录 15 min 内的扭体次数。 获取标记的小肠组织,鉴定腺病毒转染效果,检测促炎因子、疼痛生物标志物的蛋白表达量,进一步分析核转录因子-κB(NF-κB)通路蛋白表达及其与Ski 蛋白的结合情况。 结果 腹腔注射 ad-ski 腺病毒后,小肠成功过表达 Ski 蛋白。 过表达的 Ski 蛋白延长了小鼠发生扭体的潜伏期,同时减少了扭体反应的频率,与布洛芬的效果相当(P> 0. 05)。 与醋酸组比较,过表达的 Ski蛋白显著抑制了促炎因子和疼痛生物标志物的蛋白表达(P< 0. 05)。 而且 NF-κB p65 与 Ski 有复合物形成。 结论过表达 Ski 蛋白对醋酸引起的炎性疼痛有抑炎镇痛作用,且与 Ski 调节 NF-κB 信号通路有关。
2024, 32(3):378-384. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 012
摘要: 目的 研究奥拉帕尼(olaparib)诱导乳腺癌 MCF-7 细胞衰老作用的表现及其相关分子水平作用机制。 方法 利用实时细胞分析(real-time cell analysis,RTCA)技术实时动态检测抗增殖和抗迁移活性;应用衰老相关 β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase,SA-β-gal)染色法观察诱导细胞衰老活性;通过 qPCR 分析奥拉帕尼对衰老相关基因 p16、p21、C/ EBP 同源蛋白(C/ EBP homologous protein,CHOP)、白细胞介(interleukin,IL)-6、IL-8、纤溶酶原激活物抑制剂-1( plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1)、磷酸酶和张力蛋白同源物( phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN)、p27、视网膜母细胞瘤基因( retinoblastoma gene,RB1)、Ki67 和E2F1 表达的影响;根据 Western Blot 分析奥拉帕尼对衰老相关蛋白 p21、γH2AX、胰岛素样生长因子结合蛋白 3 (insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP3)、cyclin D1、pRB 和 Ki67 表达的影响。 结果 奥拉帕尼能够抑制乳腺癌 MCF-7 细胞增殖、迁移并诱导 MCF-7 细胞的衰老;奥拉帕尼作用 96 h 的 MCF-7 细胞中 p16、p21、p27、CHOP、IL-6、IL-8、PAI-1、PTEN 和 RB1 的基因表达水平显著上调(P< 0. 01),Ki67 和 E2F1 的基因表达水平显著下调(P< 0. 01);MCF-7 细胞中 p21、γH2AX 和 IGFBP3 蛋白的表达水平显著升高(P< 0. 01,P< 0. 01,P< 0. 05),cyclin D1、pRB 和 Ki67 蛋白的表达水平显著降低(P< 0. 05,P < 0. 01,P< 0. 05)。 结论 奥拉帕尼能够通过抗增殖、迁移和诱导细胞衰老产生抗乳腺癌 MCF-7 细胞作用。
张永龙,马唯刚,钱星羽,赵素红,李姗姗,郭永明,徐枝芳,潘兴芳,邱继文,郭义,李忠正
2024, 32(3):385-396. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 013
摘要:中医症候实验动物模型的构建在中医药作用机理研究方面起到重要支撑作用,近年来脾虚证动物模型的构建和评价文献报道越来越多,但是构建方法标准不一,评价指标客观化不足,本文将从动物选取、模型建立、宏观表征、行为学实验、脾虚的客观指标等方面总结脾虚动物模型的构建和评价方法,以期为脾虚证实验动物模型的构建提供理论指导,为脾虚动物模型平台的选取提供文献参考。
2024, 32(3):397-403. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 014
摘要:愤怒这一负面情绪会对人体产生诸多影响。 与愤怒情绪产生有关的脑部区域主要与中央灰质、杏仁核、下丘脑有关。 近些年关于愤怒动物模型的研究逐渐增多,愤怒机制的研究也不断深入。 关于愤怒模型的研究大部分集中在中缝背核、下丘脑和海马区域,相关的神经递质研究主要与 GABA 的表达和单胺类神经递质含量相关。 本文通过检索愤怒有关的动物模型,总结愤怒发生的脑内神经机制,旨在为愤怒情绪的研究提供参考借鉴。
2024, 32(3):404-410. DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2024. 03. 015
摘要:通过对肌少症相关文献检索,总结出肌少症小鼠造模方法与模型评价方案。 对药物注射、衰老、肌肉萎缩和转基因 4 种造模方式的操作、优缺点、适用范围进行综述,总结肌肉功能、肌肉力量、肌肉耐力 3 种肌少症小鼠模型的评价方式,对比其优缺点,以期为肌少症的后期研究提供参考。