摘要: 目的 构建不同血瘀证型的胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠模型,并对不同造模方法进行评价,为建立稳定可靠的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)血瘀证大鼠模型提供一定的依据。 方法 在 CIA 大鼠模型的基础上,分别叠加肾上腺素注射、冰水浴刺激、饥饿、脂多糖及高脂饲料喂养等多种因素,建立六种不同血瘀证模型。 采用关节肿胀度测量、AI 评分、Micro-CT、苏木素-伊红(HE)染色,同时检测血常规、血流动力学,并通过 ELISA 法检测炎症指标、凝血指标、血瘀相关指标等,对各造模方法进行综合评价。 结果 与空白组相比,单 CIA 组表现出炎症指标、血液学指标、血流动力学参数、凝血指标均明显升高,CT 显示骨破坏明显,HE 染色可见关节间隙面粗糙及炎性细胞浸润。 在此基础上,不同叠加刺激均加重血瘀证相关表现,但程度有所差异:CIA + Adr 组和 CIA + LPS 组表现为炎症、凝血及血管活性物质全面升高;CIA + Adr + 冰水浴组除炎症加重外,血流动力学指标出现部分下降;CIA + Adr + 冰水浴 + 饥饿组则在炎症和凝血指标异常的同时,部分因子降低;CIA + LPS + 高脂饲料组、CIA + 高脂饲料组则主要表现为血液学和血管内皮指标的异常。 结论 多种刺激因素可在 CIA 模型大鼠中成功诱导出不同血瘀证型,并呈现一定差异性。 本研究从多维度对 RA 血瘀证不同造模方式进行了全面评估,为进一步研究该疾病证型的发病机制和治疗策略提供了一定的实验依据。

摘要: 目的 比较苯扎氯铵溶液滴眼、氢溴酸东莨菪碱皮下注射、苯扎氯铵溶液滴眼联合干燥箱培养及单纯干燥箱培养 4 种方式诱导小鼠干眼模型的异同。 方法 采用随机数表法将 50 只 SPF 级 C57BL / 6J 小鼠分为 5 组。 空白对照组小鼠不予以任何干预;氢溴酸东莨菪碱组小鼠每日采用氢溴酸东莨菪碱溶液皮下注射;苯扎氯铵组小鼠每日予以苯扎氯铵溶液滴眼;干燥箱组小鼠置于干燥环境的可控干燥系统中饲养;苯扎氯铵加干燥箱组小鼠每日予以苯扎氯铵溶液滴眼并置于干燥箱中饲养。 造模前、造模后观测并记录各组小鼠的体质量、体温、行为学变化、基础泪液分泌实验(SIT)、泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素染色(CFS)、苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠角膜泪腺形态;TUNEL 染色检测角膜及泪腺组织细胞凋亡情况;RT-qPCR 法检测小鼠泪腺中 NF-κB、IL-1β、TNF-α 等炎症因子表达情况。 结果 与空白对照组相比,苯扎氯铵组在造模后 SIT 和BUT 有明显降低(P<0. 01),小鼠体温升高(P<0. 01),体质量减轻,细胞凋亡数量增多,炎症因子含量升高(P<0. 01);与空白对照组相比,氢溴酸东莨菪碱组造模后,SIT 和 BUT 有明显降低(P<0. 01),小鼠呈现高度紧张焦躁状态,且全身干燥症状明显,毛发干枯、粪便少而干燥,旷场实验得分升高(P<0. 05),高架十字迷宫实验中 OE%和 TE%值降低(P<0. 01),炎症因子含量升高(P<0. 05);与空白对照组相比,苯扎氯铵加干燥箱组在造模后体质量增加量减少,体温升高(P<0. 01),SIT 和 BUT 有显著性差异(P<0. 01),角膜损伤严重,泪液分泌显著减少,炎症因子含量升高(P<0. 05);干燥箱组造模后,各项指标与空白对照组相比,差异小。 结论 苯扎氯铵溶液滴眼、氢溴酸东莨菪碱皮下注射及苯扎氯铵加干燥箱培养 3 种方式均可诱导小鼠干眼模型,单纯干燥箱培养 28 d 差异无显著性,诱导小鼠干眼模型效果不明显。 氢溴酸东莨菪碱法诱导的干眼小鼠模型全身干燥症状较眼表症状更重,更适合干燥综合征模型的构建;苯扎氯铵溶液滴眼联合干燥箱培养法诱发的小鼠干眼模型更为稳定、持久,干眼眼表临床症状典型,操作可行性高且重复性好,是干眼教学、临床与科研实验较为理想的干眼动物模型复制方法。

摘要: 目的 探究 5 × FAD 小鼠中神经递质动态变化与 β-淀粉样蛋白(amyloid-beta,Aβ)沉积及神经炎症的时序关联。 方法 选取 1. 5 月龄(病理早期)、3 月龄(病理中期)和 6 月龄(病理晚期)的 5 × FAD 小鼠及 C57BL / 6J(WT)小鼠,建立阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)进展的时间窗模型。 每个年龄点及基因型组别均使用 8 只小鼠。 通过 Y 迷宫、新物体识别及旷场进行行为学表型量化。 利用免疫荧光检测海马和前额叶皮层(prefrontal cortex,PFC)的 Aβ 表达和胶质细胞激活水平,苏木素-伊红(HE)染色观察海马神经元形态,并采用高效液相色谱法测定海马和 PFC 的神经递质水平。 结果 研究发现,1. 5 月龄 AD 模型组小鼠海马中 γ-氨基丁酸水平较 WT 组小鼠下降;与 WT 组相比,3 月龄 AD 模型组小鼠海马部分神经递质如乙酰胆碱、谷氨酸、5-羟色胺和 5-羟吲哚乙酸水平发生显著变化,此时海马和 PFC 已有少量 Aβ 沉积,并伴随小胶质细胞激活;在 6 月龄时,AD 模型组小鼠海马和 PFC 中神经递质水平持续降低,并伴随海马和 PFC 大量的 Aβ沉积,海马神经元损伤以及胶质细胞激活水平的显著增加;同时出现认知行为障碍。 结论 5 × FAD 小鼠在 3月龄即出现部分神经递质水平紊乱,并随疾病进展进一步加剧,这一变化与 Aβ 沉积、神经炎症和神经元损伤密切相关。

摘要: 目的 建立超氧化物歧化酶 1 ( SOD1) 基因敲除大鼠,解析其行为学表型。 方法 采用CRISPR/ Cas9 技术构建 SOD1 敲除型大鼠,通过 PCR 及 Sanger 测序进行基因型鉴定,Western Blot 验证 SOD1蛋白表达情况。 与野生型大鼠交配,评估基因型遗传稳定性。 动态监测体质量变化、生存率,系统评估组织病变、行为学异常、脊髓运动神经元数量变化及炎症变化情况。 结果 基因型鉴定确认 SOD1 敲除型大鼠模型制备成功。 SOD1 基因缺失影响大鼠发育及体质量。 行为学显示敲除型大鼠表现出渐进性的运动共济失调,最终导致后肢瘫痪,伴随有脊髓 L4 区运动神经元丧失,小胶质细胞显著增多、腓肠肌肌细胞数量与横截面积减少等肌萎缩侧索硬化症(ALS)疾病特征。 结论 本研究成功构建 SOD1 敲除型大鼠模型,该模型能重现ALS 疾病的一些核心病理特征,为深入研究 SOD1 基因在 ALS 中的功能提供了重要动物模型。

摘要: 目的 本研究旨在建立颞叶癫痫小鼠模型,观察小鼠进食习惯,并在此基础上探究生酮饮食(ketogenic diet,KD)干预下小鼠体质量、毛发状态和血酮水平差异,进而探究 KD 对小鼠癫痫样发作及抑郁、焦虑相关行为学的影响。 方法 取 31 只 4 周龄 20 ~ 22 g 雄性 SPF 级 ICR 小鼠,取 11 只小鼠随机分配至常规饮食对照组(CON + ND 组,n= 5)和生酮饮食喂养组(CON + KD 组,n= 6);取 20 只小鼠通过腹腔注射匹罗卡品诱导癫痫持续状态(status epilepsy,SE),根据 Racine 分级评估每只小鼠癫痫发作级别,癫痫造模成功的小鼠随机平均分配至癫痫模型组(SE + ND 组)和癫痫模型生酮饮食干预组(SE + KD 组)。 实验周期设定为 28 d,CON + ND 组与 SE + ND 组接受标准饲料喂养,CON + KD 组与 SE + KD 组接受生酮饲料干预,构建规范的生酮饮食模型,监测小鼠体质量及尾静脉血酮值,采用视频监控系统记录癫痫发作次数,并通过旷场实验(open field test,OFT)、高架十字迷宫实验( elevated plus maze,EPM)及强迫游泳实验( forced swimming test,FST)比较不同组小鼠焦虑和抑郁样行为改变。 结果 (1)癫痫模型构建:20 只小鼠进行造模,4 只小鼠未达到 Racine 4 级,2 只小鼠死亡,14 只小鼠癫痫造模成功后随机平均分配至 SE + KD 组(n= 7)和 SE + ND 组(n= 7),SE + KD 组在生酮饮食喂养过程中 2 只小鼠死亡,SE + ND 组常规饲料喂养中无小鼠死亡;(2)生酮饮食模型构建:癫痫小鼠体质量低于正常小鼠,生酮饮食喂养和标准饲料喂养小鼠的体质量变化没有显著性差异(P>0. 05);CON + KD 组第 1、7、14、28 天血酮值均 ≥ 1. 0 mmol / L;CON + KD 组和 SE + KD 组小鼠在生酮饲料喂养第 2 天即出现毛发污染、排泄物附着及腹泻症状(n = 9),第 3 天腹泻严重的小鼠出现直肠脱垂(n =5);CON + ND 组和 SE + ND 组小鼠在常规饲料喂养期间保持毛发光泽且大便成形;(3)行为学实验:监测小鼠癫痫样行为发作频率,与 SE + ND 组比较,SE + KD 组发作次数减少;FST 中,与 CON + ND 组相比,CON +KD 组不动时间明显减少(P<0. 05)。 结论 规范化生酮饮食干预可有效维持治疗性酮症水平(血酮 ≥ 1. 0mmol / L),且对小鼠体质量未产生显著影响(P>0. 05)。 值得注意的是,生酮饮食显著抑制癫痫模型动物的异常放电活动(P<0. 05)。

摘要: 目的 探究酒黄精多糖对 AD 果蝇模型运动、记忆能力及抗氧化指标的影响,并评估其对 AD的治疗效果。 方法 将遗传背景相同的 w1118 果蝇作为对照组,过表达 Aβ42 蛋白的 AD 果蝇模型随机分为模型组,低、中、高剂量酒黄精多糖组。 干预 28 d 后,系统评估果蝇寿命、攀爬能力及嗅觉记忆能力;采用ELISA 和 qPCR 技术检测脑组织中 Aβ1-42 和 MDA 含量,SOD 与 CAT 的活性,以及 Keap1 / Nrf2 信号通路中抗氧化基因的表达水平。 结果 行为学结果显示,相较于对照组,模型组寿命显著缩短,攀爬与嗅觉记忆能力明显受损。 酒黄精多糖干预后,上述行为学指标较模型组均得到显著改善。 抗氧化指标分析表明,模型组脑组织中 Aβ1-42 和 MDA 含量显著升高,SOD、CAT 活性显著降低;中、高剂量酒黄精多糖组可显著降低脑组织中Aβ1-42 及 MDA 水平,提升 SOD 和 CAT 活性,增强抗氧化能力,低剂量酒黄精多糖组呈现改善趋势但无统计学意义。 Keap1 / Nrf2 通路抗氧化基因检测显示,模型组中 Keap1 表达升高,Nrf2、GCL、gsts1 表达降低;高剂量酒黄精多糖组能显著下调 Keap1 表达,并上调 Nrf2、GCL、gsts1 表达,而低、中剂量酒黄精多糖组虽呈现激活Keap1 / Nrf2 信号通路的趋势,但无统计学意义。 结论 酒黄精多糖通过调控 Keap1 / Nrf2 抗氧化通路,增强抗氧化酶 SOD 和 CAT 的活性,减少氧化产物 MDA 的蓄积,从而减轻 AD 果蝇模型脑中 Aβ 的沉积,同时改善其运动与记忆功能障碍,发挥治疗作用。

摘要: 目的 阐明多房棘球蚴感染对宿主能量代谢的重编程作用及其免疫调控机制。 方法 采用靶向代谢组学技术检测感染小鼠血清中 57 种中心碳代谢物水平;使用 Seahorse XF24 能量代谢分析系统,通过线粒体压力测试和糖酵解压力测试评估外周血单个核细胞(PBMC)和脾 CD4⁺T 细胞的能量代谢功能。 结果感染组小鼠血清中 L-精氨酸、琥珀酸、异柠檬酸、磷酸二羟丙酮和苹果酸水平显著降低(P<0. 05),KEGG 分析显示肿瘤中的中心碳代谢等 5 条通路显著改变。 感染组 PBMC 的线粒体呼吸功能和糖酵解能力均受到抑制(P<0. 05);脾 CD4⁺T 细胞虽未表现明显的线粒体功能异常,但糖酵解活性显著降低(P<0. 05)。 结论 多房棘球蚴感染可导致小鼠血清中心碳代谢紊乱,并显著抑制 PBMC 和 CD4+T 细胞的糖酵解功能,提示能量代谢重编程可能在寄生虫免疫逃逸中发挥重要作用。

摘要: 目的 本研究旨在通过动物实验,全面评估新型球囊扩张式经导管主动脉瓣膜在生物体内的生物相容性、抗钙化性及长周期植入稳定性。 方法 选取 27 只体质量约 45 kg 的健康普通实验白猪作为实验动物。 术前对其进行全面体检并给予相应预处理,包括药物治疗和消毒等。 在无菌手术条件下,经股动脉血管通路将装载于球囊导管输送系统上的瓣膜原位植入猪主动脉瓣位置,术后密切观察动物生命体征、饮食及活动情况,并给予持续药物治疗。 在即刻、30、90、180 d 等时间节点,通过超声心动检查、数字减影血管造影(digital subtraction angiography,DSA)检查评估瓣膜植入后的血流动力学指标、植入位置及对周边心脏结构是否有影响等情况;完成上述检查后,在相应的随访点对动物心脏及主要脏器组织进行取材,通过组织病理学染色,分析组织炎症反应、血栓评分、钙化程度以及内皮化程度。 通过 X 射线拍照和 Micro-CT 扫描,评价瓣膜支架结构完整性和瓣叶钙化情况。 结果 实验最终 23 只动物纳入有效分析。 成功植入瓣膜的动物术后恢复良好,生命体征平稳。 随访检查显示,主动脉瓣血流速度、跨瓣压差和瓣叶运动等指标正常或逐渐改善,支架位置稳定,血管保持通畅。 组织学分析表明,植入部位组织炎症细胞浸润程度较轻,无血栓形成,钙化面积占比低,支架完整性良好,瓣叶钙化程度低。 统计学分析结果显示,各项指标均符合预期,具有统计学意义(P<0. 05)。 结论 新型球囊扩张式经导管主动脉瓣膜系统在动物实验中展现出良好的生物相容性、抗钙化性及植入稳定性,为后续开展临床试验奠定了坚实基础,有望提升经导管主动脉瓣膜置入术( transcatheter aortic valve implantation,TAVI)对中国患者的治疗效果,推动国产 TAVI 器械的技术进步,为心血管疾病治疗领域带来新的突破和发展机遇。

摘要:冠状动脉微血管疾病(coronary microvascular disease,CMVD)指在动脉粥样硬化性或非动脉粥样硬化性致病因素作用下,冠状前小动脉、小动脉和毛细血管结构或功能异常引发心肌缺血的临床综合征。因 CMVD 发病机制复杂、临床诊断困难、发病率日益攀升,故构建能多方面反映疾病特征的动物模型并开发针对性治疗药物便显得尤为迫切。 目前构建 CMVD 动物模型主要通过增加压力负荷、扰乱代谢等方式以模拟高血压、糖尿病、动脉粥样硬化等疾病引起的继发性微血管病变,或通过手术结扎冠脉、注射致栓剂等方式直接诱导微血管栓塞。 本文系统综述了 CMVD 动物模型的物种特点,概述其造模方法、适应症及优缺点,以期为 CMVD 基础研究提供参考。

摘要:粪菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)是将健康供体粪便中的微生物移植到患者胃肠道中,直接改变患者肠道微生物群,使其成分正常化并达到治疗效果的一种治疗方法。 慢性腹泻与肠道微生物群密切相关,肠道微生物群失衡可导致慢性腹泻的发生和发展,FMT 是治疗慢性腹泻的重要有效手段。 本文综述了慢性腹泻与肠道微生物群之间的相互关系、FMT 技术在慢性腹泻中的研究及应用进展、存在的问题和对未来的展望,为 FMT 治疗慢性腹泻的进一步研究提供参考。

摘要:怒情志作为七情五志之一,是人体的正常情志反应,外部因素诱发产生刺激达到阈值就会使内脏、心理趋于各种不定变化之中,如若诱发因素较为突然、剧烈和持续就可能会导致系统疾病的产生。 国家发布的《22 个专业 95 个病种中医诊疗方案》将怒作为主症之一则表明了怒致病的普遍性。 怒情志动物模型可以模拟人类在不同诱因下所致的怒情志异常并进行症状的治疗性研究,因此对其诱导产生疾病的治疗研究包括发病机制、药物开发和临床疗效评价等都有着重要的参考价值,而目前对怒情志的造模方法尚缺少系统性研究。 文章基于病证结合动物模型对以攻击行为表现出来的怒情志展开综述,以期为怒情志相关模型制备、机制研究及药物研发提供参考。

摘要:原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC)是一种高发于中年女性的自身免疫性疾病,其特征是免疫介导的肝内汇管区淋巴细胞浸润和胆管破坏。 PBC 的发病机制复杂,病因尚不明确。 动物模型对于阐明 PBC 的发病机制及临床治疗具有重要意义。 现有的 PBC 动物模型虽表现出与人类疾病发展类似的特征,但并未完全模拟 PBC 的临床表现和病理变化。 本文系统比较了不同诱导方式构建的 PBC 小鼠模型在遗传背景、造模原理、致病细胞以及免疫学等方面的特征;比较了不同 PBC 小鼠模型免疫调控与疾病表型的差异;初步探讨了基于 PBC 动物模型的临床前治疗研究策略,有助于理解和优化动物模型,以进一步阐明人类 PBC 的复杂病理过程,为 PBC 的精准治疗提供新的思路。

摘要:研究近年国内外主要睡眠剥夺模型,并探讨其在我国四大慢性病中的应用。 大小鼠睡眠剥夺模型主要有改良多平台水环境法、轻度电击法、活动轮法、CPW 范式法、睡眠剥夺仪法、轻柔刺激法、睡眠片段化等;斑马鱼睡眠剥夺模型主要有光照法、温和刺激法、生态水流法等;果蝇睡眠剥夺模型主要有机械刺激法、重复光刺激法、基因编辑法等。 心脑血管疾病、癌症、慢性呼吸系统疾病、糖尿病四大慢病对人类健康的影响日益显著,了解睡眠剥夺模型在四大慢病的应用,为今后四大慢病的研究提供动物模型理论参考。

摘要:酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)已成为我国最主要的慢性肝病之一。 深入研究 ALD的发病机制以及治疗策略需要依靠动物模型的建立。 本文系统综述了国内外酒精性肝病动物模型的研究进展,重点对比分析了啮齿类动物模型(如 Lieber-De Carli 模型、NIAAA/ Gao-Binge 模型、二次打击模型等)和斑马鱼模型(急性和慢性模型)等常用模型的构建方法、优缺点及应用价值,并简要介绍了微型猪、鸡胚等新兴模型,以期为研究者选择合适的模型、优化现有模型以及开发新型模型提供参考。

摘要:脂肪源外泌体作为细胞间通讯的重要媒介,近年来在脂肪代谢调控中的作用逐渐成为研究热点。 脂肪代谢与能量平衡及多种代谢性疾病(如肥胖、糖尿病、心血管疾病)密切相关。 脂肪源外泌体通过调节脂肪细胞的分泌功能、能量代谢途径,并在脂肪组织与其他器官间传递信号,可能在维持代谢稳态中发挥重要作用。 它们在胰岛素抵抗和脂肪沉积调节中尤为关键,且在代谢疾病的发生发展中起到重要作用。 尽管已有大量研究探讨脂肪源外泌体的潜在机制,但其在不同生理和病理状态下的具体作用尚不明确。 本文综述了脂肪源外泌体在脂肪代谢性疾病中的研究进展,重点探讨其在脂肪细胞功能、能量代谢及代谢性疾病发生中的潜在机制。 这些研究为未来的基础研究与代谢性疾病干预策略提供了新的视角和思路。