摘要: 目的 探究阿格拉宾对创伤性脑损伤小鼠神经炎症的影响和机制。 方法 选雄性 C57BL / 6J成年小鼠将其随机分为:假手术组,假手术 + 阿格拉宾组,脑损伤组,脑损伤 + 阿格拉宾组。 采用控制性皮质冲击模型诱导脑损伤,造模成功后腹腔注射阿格拉宾 5 μg / kg,每天一次,直至取材。 水迷宫实验和 mNSS 评估神经功能;术后 4 周苏木素-伊红(HE)染色和尼氏染色观察组织病理变化;术后 3 d Western Blot 检测脑组织 NLRP3、ASC 和 Caspase-1 蛋白相对表达量,RT-qPCR 检测炎症因子 IL-1β、IL-18、IL-6、iNOS、IL-4 和 Arg1 的mRNA 相对表达量;术后 7 d 通过免疫荧光观察 M1 型和 M2 型细胞的表达情况。 结果 与假手术组相比,脑损伤组小鼠神经功能下降(P<0. 0001),脑组织损伤面积显著增大(P<0. 01),神经元大量丢失(P<0. 01),脑组织中 NLRP3、ASC 和 Caspase-1 蛋白表达显著升高(P<0. 05),促炎细胞因子 IL-1β、IL-18、IL-6 和 iNOS 的表达显著升高(P<0. 05),抑炎细胞因子 IL-4 和 Arg1 的表达显著降低(P<0. 01),M1 型细胞表达显著增加(P<0. 01)。 与脑损伤组相比,脑损伤 + 阿格拉宾组小鼠神经功能明显改善(P<0. 01),脑组织损伤面积显著缩小(P<0. 01),神经元丢失显著减少(P<0. 01),脑组织中 NLRP3、ASC 和 Caspase-1 蛋白表达显著降低(P<0. 05),促炎细胞因子 IL-1β、IL-18、IL-6 和 iNOS 的表达显著降低(P<0. 05),抑炎细胞因子 IL-4 和 Arg1的表达显著升高(P<0. 01),M2 型细胞表达显著增加(P<0. 01)。 结论 阿格拉宾通过抑制 NLRP3 炎症小体活化改善局部免疫微环境减轻创伤性脑损伤小鼠神经炎症。

摘要: 目的 检测化气消浊中药复方对肥胖 2 型糖尿病(zucker diabetic fatty,ZDF)大鼠血糖、血脂及细胞因子的影响,探讨化气消浊法对糖脂代谢的调节作用及机制。 方法 雄性 ZDF( fa / fa)大鼠采用高脂饲料饲喂造成糖尿病模型后,按血糖水平随机分为模型组(8 只)和化气消浊中药干预组(中药组,8 只);ZDF(fa / + )大鼠为正常组(8 只)。 采用化气消浊代表方“气化通调方”连续灌胃 6 周,给药期间监测大鼠血糖变化,第 6 周进行口服糖耐量实验。 6 周后取材并留取血清检测血脂四项、游离脂肪酸;ELISA 法检测胰岛素水平;苏木素-伊红(HE)染色观察胰腺病理改变;蛋白芯片法检测细胞因子表达并绘制聚类热图。 结果 与正常组相比,模型组血糖、血脂四项、游离脂肪酸、胰岛素、炎性细胞因子(CXCL3、IL-2、IL-1α 等)水平显著升高,中药组血糖、血脂四项、游离脂肪酸、胰岛素、炎性细胞因子水平较模型组降低。 模型组胰岛细胞脱颗粒,中药组胰岛病理损害较模型组缓解。 结论 化气消浊法代表方“气化通调方”可一定程度上调节 ZDF 大鼠的糖脂代谢,缓解慢性炎症损伤。

摘要: 目的 研究 3D 打印个性化钛网(3D printing individualized titanium mesh,3D-PITM)联合引导骨再生技术(guided bone regeneration,GBR)应用于兔颌骨放射性骨坏死(osteoradionecrosis of jaws,ORNJ)骨缺损模型的修复效果。 方法 18 只 ORNJ 骨缺损大白兔随机分为 3 组:a 组(行清创后缝合,待自行恢复);b 组(清创后行骨缺损常规 GBR 术修复);c 组(清创后行骨缺损 3D-PITM 联合 GBR 修复)。 4,8,12 周每组各处死 2 只,行免疫组化染色,检测成骨相关因子碱性磷酸酶( alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素( osteocalcin,OC)、骨形成蛋白 2(bone-forming proteins-2,BMP-2);炎性因子白细胞介素-6(interleuker-6,IL-6),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平,评价骨缺损修复效果。 结果 4 周时 ALP 各组表达水平无明显差异,甚至 c 组 4 周时 OC 表达水平低于 b 组,但 ALP、BMP-2、OC 在 8、12 周时,c 组的表达水平显著高于 a组和 b 组。 4、8、12 周时 IL-6 及 TNF-α 表达水平 c 组均小于 a、b 两组,但 4 周时 c、b 两组 IL-6 表达水平无统计学意义。 结论 3D-PITM 联合 GBR 对 ORNJ 骨缺损的修复效果显著优于单纯应用 GBR 或自行修复。

摘要: 目的 基于 LoxP-Cre 重组酶系统构建 NR4A1 前脑兴奋性神经元特异性敲除小鼠模型,并利用该敲除模型探究前脑兴奋性神经元特异性敲除 NR4A1 基因对小鼠认知及焦虑样行为的影响。 方法 将基因型为 NR4A1^{flox / +}小鼠自交,筛选鉴定得到基因型为 NR4A1 ^{flox / flox} 的小鼠并与 Camk2a-Cre 小鼠杂交,通过鉴定得到基因型为 NR4A1^{flox / +}-Camk2a-Cre 子一代小鼠,并将该基因型小鼠自交,利用尾部基因组 DNA 进行分型,筛选出基因型为 NR4A1^{flox / flox}-Camk2a-Cre 的小鼠,即为 NR4A1 前脑兴奋性神经元条件性敲除小鼠。 通过新物体识别和 Y 迷宫等行为学测试评估小鼠的认知功能,并通过黑白箱、旷场及高架十字迷宫等行为学测试来评价小鼠的焦虑样行为。 此外,采用 Western Blot 和免疫荧光等技术检测 NR4A1 在前脑重要脑区海马中的表达情况。 结果 (1)获得基因型为 NR4A1^{flox / flox}-Camk2a-Cre 的前脑兴奋性神经元特异性敲除小鼠;(2) WesternBlot结果显示敲除组小鼠海马 NR4A1 蛋白水平显著降低;免疫荧光结果也显示敲除组小鼠海马脑区 NR4A1的蛋白表达被有效敲低,免疫荧光信号强度低于对照组;(3)在认知行为学测试中,与对照组小鼠相比,敲除组小鼠新物体辨别指数,Y 迷宫新异臂中的进入次数、运动距离及停留时间均无显著性差异;(4)在焦虑样行为测试中,敲除组小鼠在黑白箱测试明箱中的停留时间高于对照组,而在明箱的进入次数及运动距离与对照组相比无显著性差异;敲除组小鼠在旷场中心区域停留时间高于对照组,但在中心区域的进入次数及运动距离无显著性差异;敲除组小鼠和对照组小鼠高架十字迷宫实验中结果未达到统计学意义。 结论 该研究成功构建了 NR4A1 前脑兴奋性神经元特异性敲除小鼠模型,该敲除小鼠认知水平无显著改变,但焦虑水平显著降低。 该模型的建立为深入探究 NR4A1 基因在前脑脑区生理功能及病理机制中的作用提供了重要的实验工具。

摘要: 目的 探讨针刺对创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后昏迷大鼠的促醒机制。 方法SD 大鼠随机分为空白组、模型组、溶剂对照组、针刺组、嘌呤能 P2X7 受体(P2X purinoceptor 7,P2RX7)拮抗剂组,每组 12 只。 用控制性皮质撞击造模法(electric controlled cortical impactor,eCCI)造模,溶剂对照组、针刺组和 P2RX7 拮抗剂组分别于中脑腹侧导水管周围灰质(ventral periaqueductal gray,vPAG)区注射 DMSO 溶液或P2RX7 拮抗剂 30 min 后造模,针刺组和 P2RX7 拮抗剂组造模后予百会、水沟穴针刺。 通过昏迷时间、意识状态、mNSS 评分评估行为学,苏木素-伊红 ( HE) 和尼氏染色观察 vPAG 区组织形态, ELISA 检测多巴胺(dopamine, DA) 水 平, 免 疫 荧 光、 Western Blot 和 RT-qPCR 检 测 P2RX7 和 多 巴 胺 转 运 蛋 白 ( dopamine transporter,DAT)表达。 结果 与空白组相比,模型组、溶剂对照组和 P2RX7 拮抗剂组昏迷时长延长、各时间点的意识状态和 mNSS 评分升高(P<0. 05),vPAG 区出现神经元变性、核固缩及尼氏小体增加等病理改变,且 vPAG 区 DA 水平、P2RX7 和 DAT 表达降低(P<0. 05);针刺组 TBI 术后 2. 5 和 4 h 的意识状态得分、TBI术后 12 h 的 mNSS 评分升高(P<0. 05),且 vPAG 区存在部分神经元变性、核固缩及尼氏小体增加等病理改变。 与模型组相比,针刺组的昏迷时长缩短、各时间点的意识状态和 mNSS 评分降低(P<0. 05),vPAG 区组织和神经元损伤减轻,DA 水平、P2RX7 和 DAT 表达升高(P<0. 05)。 与溶剂对照组相比,针刺组昏迷时长缩短,TBI 术后 12、24、48 h 的意识状态得分及 TBI 术后 24、48 h 的 mNSS 评分降低(P<0. 05),vPAG 区组织和神经元损伤减轻,DA 水平、P2RX7 和 DAT 表达升高(P<0. 05)。 与针刺组相比,P2RX7 拮抗剂组的昏迷时长延长、各时间点的意识状态得分和 mNSS 评分升高(P<0. 05),vPAG 区组织和神经元损伤增加,DA 水平、P2RX7 和 DAT 表达降低(P<0. 05)。 结论 针刺百会、水沟穴可能通过上调 P2RX7 表达以调控 DA 系统相关因子 DAT 和 DA,恢复 vPAG 区病理改变,改善意识状态和神经功能,进而促醒 TBI 后昏迷大鼠。

摘要: 目的 建立肺炎支原体和流感病毒 H1N1 共感染动物模型。 旨在阐明两种病原体共感染的协同致病机制,为呼吸道混合感染的临床干预提供理论基础。 方法 将 24 只叙利亚仓鼠分为对照(C)组、感染组(流感病毒 H1N1 单独感染(Flu)组、肺炎支原体单独感染(MP)组、流感病毒 H1N1 和肺炎支原体共感染(F+ M)组),采用滴鼻和气管注射的方式攻毒。 记录 14 d 临床指标,检测生理指标以及排毒情况,感染后 7 和14 dpi 选取动物进行组织病理学和病毒抗原与核酸检测。 结果 Flu 组、MP 组和 F + M 组的叙利亚仓鼠均出现类似人类流感或肺炎支原体感染的临床症状;在鼻拭子、咽拭子、肛拭子、血液和组织中均能检测到两种病原体的核酸;组织病理结果显示,感染组的不同部位均出现不同程度的病理损伤。 结论 从临床症状、病毒复制以及病理表现等结果表明成功构建了肺炎支原体和流感病毒 H1N1 共感染叙利亚仓鼠的动物模型,该模型可以为阐明呼吸道共感染机制及开展疫苗和药物研究、临床治疗策略提供了重要实验基础。

摘要: 目的 通过粪菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)方法建立无菌金黄地鼠糖尿病模型并对模型进行评价。 方法 25 只雄性 SPF 级 SD 大鼠分为对照(SD-CN)组和模型( SD-DM)组,SD-CN 组 10只,SD-DM 组 15 只。 分别饲喂正常饲料、高脂饲料 3 周后,动物禁食 12 h,SD-DM 组腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ),按 25 mg / kg,连续注射 3 d。 24 只雄性无菌金黄地鼠分为对照(CN)组和模型(DM)组,每组各 12 只,分别接种 SD-CN 组和 SD-DM 组 SD 大鼠粪便混悬液。 粪菌移植 10 周时安乐死动物,取血液、小肠、胰腺和大肠内容物,进行血生化、组织病理学检查和 16S rRNA 测序。 结果 粪菌移植后,血液生化指标检测显示 CN 组与 DM 组载脂蛋白 A1,载脂蛋白 B 存在显著性差异(P<0. 05)。 DM 组胰高血糖素、空腹血糖水平显著升高(P<0. 01),空腹胰岛素显著下降(P<0. 001),呈现明显糖脂代谢紊乱及胰岛素抵抗特征。 苏木素-伊红(HE)染色显示,与 CN 组比较,DM 组胰腺出现多灶性脂肪沉积,胰岛萎缩,胰岛细胞减少,胰岛形态不规则及肿胀坏死,胰岛细胞增生,毛细血管增多,基底膜增厚。 DM 组小肠绒毛上皮增生,小肠绒毛融合、排列错乱,细胞肿胀并伴有变性坏死,小肠黏膜固有层炎性细胞聚集。 16S rRNA 测序显示 CN 组与 DM 组肠道菌群的多样性及特定菌群丰度存在显著性差异。 DM 组 α 多样性指标中的 chao1 指数、shannon 指数、simpson 指数均显著降低(P<0. 05)。 Unweighted Unifrac 距离显著降低(P<0. 01),提示 β 多样性存在差异。两者肠道细菌群落组成存在显著性差异,DM 组疣微菌门(Verrucomicrobiota)显著增加(P<0. 05),厚壁菌门(Firmicutes)显著降低(P<0. 05)。 结论 通过粪菌移植技术成功建立无菌金黄地鼠糖尿病模型,动物出现与糖尿病相似的临床特征,为深入研究肠道微生物与糖尿病的发生发展关系提供了动物模型。

摘要: 目的 研究肉桂枝叶水提物不同极性部位对气虚大鼠的补气作用及机制,为肉桂补气的药效物质基础提供参考。 方法 将 90 只 SD 雄性大鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、给药组(乙酸乙酯部位高剂量组、乙酸乙酯部位低剂量组、正丁醇部位高剂量组、正丁醇部位低剂量组、水部位高剂量组、水部位低剂量组),每组 10 只。 除空白组外,其余各组均采用“饮食不节 + 疲劳”法构建气虚动物模型,造模同时,灌胃给药,每天 1 次,连续给药 21 d。 末次给药后,记录大鼠的体质量、负重游泳时间,测定血清中抗肿瘤坏死因子-α(anti-tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白介素(interleukin,IL)-2、IL-12、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、乳酸(lactic acid,LD)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶( superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)、白蛋白(albumin,ALB)及肝中二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)指标,测定胸腺指数、脾指数、肝指数,使用苏木素-伊红(HE)染色对各组大鼠的肝进行病理观察。 结果 与模型组比较,各给药组大鼠的气虚症状及肝组织损伤均得到了不同程度改善;乙酸乙酯部位、正丁醇部位均可显著延长气虚大鼠的负重游泳时间(P<0. 01);乙酸乙酯部位高剂量可显著提高其胸腺指数并显著改善 TNF-α、IL-2、IL-12、CK、LD、LDH、SOD、MDA、ALB、ATP、ADP 水平(P<0. 05,P <0. 01);乙酸乙酯部位低剂量可显著改善 IL-2、LD、LDH、MDA、ALB、ATP、ADP 水平(P<0. 05,P<0. 01);正丁醇部位高剂量可显著提高其胸腺指数并显著改善 TNF-α、IL-2、IL-12、CK、LD、LDH、SOD、MDA、ALB、ATP、ADP 水平(P<0. 05,P<0. 01);正丁醇部位低剂量可显著改善 IL-12、CK、LD、LDH、SOD、MDA、ALB、ATP、ADP 水平(P<0. 05,P<0. 01);水部位高剂量可显著改善 IL-12、LD、LDH、MDA、ATP 水平(P<0. 05,P<0. 01);水部位低剂量可显著改善 LD 水平(P<0. 05)。 结论 肉桂枝叶水提取物不同极性部位可不同程度改善大鼠气虚症状及保护气虚大鼠的胸腺、脾、肝,且可调控气虚大鼠多种因子水平,从而提高其免疫力、减少脏器损伤等多种效果以达到补气、延长疲劳发生时间、增强机体的运动耐力等作用,综合各项指标表明肉桂枝叶水提物的正丁醇部位补气效果最优。

摘要:雌激素受体(estrogen receptors,ERs)参与调节人体多种复杂的生理过程。 异常的 ERs 信号可能导致各种各样的疾病,包括神经系统疾病、骨质疏松症、心脏疾病和乳腺癌等。 雌激素受体 α( estrogen receptors α,ERα)、雌激素受体 β(estrogen receptors β,ERβ)和新型 G 蛋白偶联雌激素受体 1(G protein-coupled estrogen receptor 1,GPER-1)被认为是最重要的 ERs。 而 ERs 敲除模型能够表现出一些疾病表型,其可以作为一种研究 ERs 相关疾病及其干预措施的新动物模型。 本文综述了雌激素及 ERα、ERβ 和 GPER-1 的研究进展和重要作用,以及其 ERs 敲除模型在疾病中的应用。

摘要:微卫星标记是由 2 ~ 6 个核苷酸短序列串联重复而成,广泛分布于真核生物基因组中,因其多态性高、数量多、遵循孟德尔遗传定律、且容易进行 PCR 扩增等特点,已经成为非人灵长类动物亲权鉴定中最常用的方法。 丰富的灵长类动物是世界宝贵的遗传资源,但因栖息地破坏、非法狩猎、宠物贸易和保护与管理的不到位造成灵长类动物品种资源数量下降以及生产性能降低,为充分保护灵长类动物,利用分子技术开展对灵长类动物的保护研究已经成为主流。 本文系统阐述了微卫星标记的结构特征与遗传特性,明确其优势与不足,为后续研究中工具的合理选择提供理论依据。 在此基础上,详细介绍了其在非人灵长类动物中的意义以及在圈养种群亲权鉴定和野生种群遗传评估中的应用,这些应用展示了微卫星标记可精准实现亲权鉴定,有效避免近亲繁殖、保障种群遗传多样性;且通过遗传多样性水平、基因流等指标的评估,为物种保护策略的制定提供科学数据支撑。 最后,结合当前研究现状,讨论了其目前发展的局限性与挑战,展望了微卫星标记与新一代测序技术、多组学技术相结合的发展趋势。 旨在为灵长类动物的种群管理和物种多样性保护以及未来发展提供科学的帮助。

摘要:人源化造血干细胞(humanized hematopoietic stem cells,Hu-HSCs)模型是模拟人源 T 细胞分化和功能的关键模型,然而重建小鼠由于背景为重度免疫缺陷,其胸腺发育受阻或没有胸腺,缺乏 T 细胞分化成熟的场所,导致重建小鼠人源功能性 T 细胞不足。 尽管移植人胎儿胸腺组织能够支持人源化小鼠体内 T 细胞的有效发育,但供体组织稀缺和伦理问题限制了其广泛应用。 因此,亟待开发新型胸腺组织克服上述局限性。本文系统总结了人源化造血干细胞小鼠模型的基本特征及传统胎儿胸腺移植诱导的人 T 细胞免疫应答能力;重点综述了新型胸腺移植在促进 T 细胞发育、调节人类 T 细胞介导的免疫应答方面的作用,揭示其潜在机制及对提升人体免疫力的重要意义,期望为开发新的人源化小鼠模型提供理论依据和技术支持。

摘要:系统梳理啮齿类心肌损伤模型的谱系与适用边界,构建“问题-机制-模型-评估-外推”的选模与报告框架,提升研究可复现性与临床转化潜力,是推动医学进步的关键。 分析表明,尽管各类模型不断涌现,但模拟心肌梗死的冠状动脉结扎模型因其高度的病理生理模拟度、良好的重复性以及对心室重构等远期变化的稳定复现能力,依然是研究缺血性心脏病机制和评价治疗策略的基石模型。 围绕缺血性、物理、化学、药物、炎症及基因工程等模型,总结关键造模参数、易变因素与偏倚来源;整合形态学、功能学与分子标志物三维评估路径。 永久结扎适用于心室重构与远期纤维化;缺血再灌注贴合临床再灌注情境与再灌注损伤;冷/ 热损伤获得边界清晰的局灶损伤,便于修复或再生与材料学评价;异丙肾上腺素、多柔比星、脂多糖等在应激性坏死、化疗心毒与系统炎症方面具表型特异性;基因工程模型利于因果检验但成本与门槛较高。 建议依据科学问题进行模型组合与分层验证,并实行最小报告清单,以降低批间差、增强证据强度与转化价值。

摘要:子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)好发于育龄期女性,影响患者身心健康,然而临床上尚无治愈方法。 为深入理解其发病机制并指导临床治疗,适宜动物模型的建立至关重要。 目前啮齿类动物因成本低、繁殖周期明确、建模耗时短等优点成为首选。 传统的子宫内膜异位症啮齿类模型包括自体移植模型、同种异体移植模型及异种移植模型。 研究者还对现有模型进行优化以更好的模拟人体疾病状态或临床症状。 本文综述各种啮齿类动物子宫内膜异位症模型和影响造模的因素及评估成功率的指标,探讨未来动物模型的发展方向。