摘要: 目的 构建能够重现重症哮喘临床表型的动物模型。 方法 使用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)联合 IL-33 或不同剂量的脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)探索构建重症哮喘小鼠模型。 造模后通过肺功能、炎症细胞数量及肺组织病理,评估模型。 通过 GEO 数据库筛选重症哮喘患者的关键基因,对构建的模型进行验证。 结果 OVA 叠加 IL-33 或 LPS(5 μg)相较 OVA 哮喘模型能够显著增加气道阻力,肺泡灌洗液中炎症细胞数量,加重肺组织病理损伤。 在构建的重症哮喘模型中重症哮喘的关键基因表达情况与临床重症哮喘患者一致。 结论 OVA 联合 IL-33 或 LPS(5 μg)可用于构建重症哮喘的实验动物模型。

摘要: 目的 通过构建免疫-肿瘤双人源化小鼠模型,探索靶向间质单胺氧化酶 A ( monoamine oxidase A,MAOA)在前列腺癌免疫微环境中的作用。 方法 利用生物信息学分析 MAOA 高表达肿瘤相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)在前列腺癌中与 T 细胞的关系;利用多重免疫荧光技术分析间质MAOA 与 CD8⁺T 细胞的关系;构建免疫-肿瘤双人源化小鼠模型,体内验证靶向间质 MAOA 后 CD8⁺T 细胞浸润情况。 结果 间质中 MAOA 的表达与 CD8⁺T 细胞浸润成反比;体内抑制间质中 MAOA 可以提高 CD8⁺T细胞浸润,这可能是通过抑制肿瘤微环境中胶原的累积所实现的。 结论 间质中 MAOA 在前列腺癌免疫抑制微环境中发挥着重要作用,抑制间质中 MAOA 的表达可以促进免疫细胞的浸润,提示 MAOA 抑制剂可能作为前列腺癌患者免疫联合治疗的潜在治疗药物。

摘要: 目的 繁育获得干扰素-γ 基因敲除纯合子(IFN-γ^{- / -})小鼠,并改善繁育策略,建立稳定的干扰素-γ 基因敲除纯合子(IFN-γ^{- / -})小鼠繁育体系,为相关研究提供理想的动物模型。 方法 首先以 C57BL / 6J为背景的 IFN-γ 基因敲除杂合子(IFN-γ^{+ / -})小鼠作为亲本进行繁育。 之后,基于获得的子代小鼠,采用 3 种配种方式进行繁育:(1)雌性杂合子与雄性杂合子;(2)雄性纯合子与雌性杂合子;(3)雌性纯合子与雄性纯合子。 并比较子代中 IFN-γ^{- / -}小鼠的数量和存活情况,筛选最优繁育策略。 在最优繁育策略下,评估雌鼠配种周龄和饲料种类对 IFN-γ^{- / -}小鼠繁殖性能的影响,共统计 60 只 IFN-γ^{- / -}雌鼠的前 3 胎窝产仔数、离乳存活数和离乳存活率,同时记录和分析了孕鼠营养补充、放置遮蔽物等环境优化措施对繁育效果的影响。 结果 在通过添加蛋黄以及瓜子充分保障孕鼠营养的条件下,雌性和雄性 IFN-γ^{- / -}小鼠配种,单胎新生 IFN-γ^{- / -}小鼠存活数为 5 ~ 8 只,繁育获得的 IFN-γ^{- / -}小鼠的效率优于其他配种模式。 此外,饲料种类和配种周龄对雌鼠繁殖性能影响显著,7 ~ 9 周龄的雌性与雄性 IFN-γ^{- / -}小鼠合笼配种并且饲喂繁殖饲料时,雌鼠的窝产仔数(6. 9 ±1. 7)、离乳存活数(6. 5% ± 2. 0%)和离乳存活率(93. 2% ± 17. 8%)均高于其他繁育条件。 另外,通过放置遮蔽物预防种鼠打架有助于提高繁殖效果。 结论 采用优化的 IFN-γ^{- / -}小鼠配种策略,结合高蛋白饲料饲喂、营养补充及规范化配种周龄管理,可显著提高 IFN-γ^{- / -}小鼠的繁育效率和稳定性,为相关研究提供可靠的动物模型支持。

摘要: 目的 评估中药复方肾纤康对肾损伤和纤维化的保护作用,并探讨其可能的作用机制。 方法采用单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)建立慢性肾病( chronic kidney disease,CKD)小鼠模型,并随机分为假手术组、模型组及肾纤康低、高剂量组(1500、4500 mg / (kg·d)),每组 8 只。 肾纤康各组每天灌胃不同剂量的肾纤康,其余小鼠灌胃等量的生理盐水,持续 7 d。 实验结束后,收集肾组织,通过苏本素-伊红(HE)和 Masson 染色评估肾损伤和纤维化。 用 Real-time PCR、免疫组化和 Western Blot 检测纤维化标志物、上皮膜蛋白 3(epithelial membrane protein 3,Emp3)及 Tgf-β/ Smad 信号通路相关蛋白的表达。 细胞实验中,通过 Emp3 回复实验和 Co-IP 分析肾纤康对 Emp3 / Tgf-β/ Smad3 通路及其与转化生长因子 β 受体 2( TGF-beta receptor R2,Tgfβ2)相互作用的影响。 结果 肾纤康干预显著改善了 UUO 模型组中的免疫细胞浸润和肾小管萎缩,降低了肾损伤分子 1(kidney injury molecule 1,Kim1)和脂质运载蛋白 2(lipocalin 2,Lcn2)的表达,验证了其在减轻肾损伤方面的效果。 Masson 染色及纤维化标志物纤连蛋白( fibronectin,Fn)和 α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的检测结果显示,肾纤康能有效抑制 UUO 诱导的纤维化进程。 机制研究发现,肾纤康通过特异性下调 Emp3 / Tgf-β/ Smad3 信号通路的异常活化发挥作用,细胞实验进一步证实了肾纤康通过调节 Emp3 来影响 Tgf-β/ Smad3 信号传导。 Co-IP 实验结果显示,肾纤康通过调控 Emp3 与 Tgfβ2 的相互作用来发挥作用。 结论 肾纤康对慢性肾病小鼠模型表现出显著的保护作用,能够有效减轻肾损伤和纤维化。其机制可能与下调 Emp3/ Tgf-β/ Smad3 信号通路的活化有关,提示肾纤康在肾保护方面具有潜在的治疗价值。

摘要: 目的 研究抑肝扶脾汤 ( Yigan Fupi decoction, YGFP ) 对肠易激综合征 ( irritable bowel syndrome,IBS)的改善作用,并从 PKA/ PKC-CREB 通路深入研究其修复肠道屏障降低 IBS 敏感性的作用机制。 方法 将母婴分离后的大鼠随机分为模型对照(M)组、抑肝扶脾汤(YGFP)组和未母婴分离的大鼠作为正常对照(N)组,YGFP 组予 YGFP 连续 4 周。 腹壁撤退反射(abdominal withdraw reflux,AWR)评估肠道敏感性,LCMS / MS 法检测胆汁酸代谢物浓度,ELISA 法检测 IL-6 和 CXCL1 的血清水平,苏木素-伊红(HE)染色观察结肠病理学变化,Western Blot 和免疫组化检测 PKA、PKC、CREB、5HT2AR、5-HT7R、ZO-1、Claudin 1 的蛋白相对表达。 结果 与 N 组比,M 组的内脏疼痛阈值降低,总胆汁酸代谢物、IL-6 和 CXCL1 含量明显升高,PKA、PKC、CREB、5HT2AR、5-HT7R 蛋白相对表达显著升高,ZO-1、Claudin 1 的蛋白相对表达明显下降。 与 M 组相比,抑肝扶脾汤可显著增加 IBS 大鼠的内脏疼痛阈值,显著降低总胆汁酸代谢物、IL-6 和 CXCL1 含量,使 PKA、PKC、CREB、5HT2AR、5-HT7R 蛋白相对表达明显降低,ZO-1、Claudin 1 的蛋白相对表达升高。 结论 抑肝扶脾汤可有效改善 IBS,其机制可能是通过调控 PKA/ PKC-CREB 通路修复肠道屏障降低其敏感性实现的。

摘要: 目的 基于 JAK2 / STAT3 信号通路研究黄芩联合 5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-Fu)对 Lewis 荷瘤模型小鼠肺癌的抑制作用。 方法 检测黄芩(20 mg / kg)联合 5-Fu 干预 Lewis 荷瘤小鼠后的体质量、进食量和瘤体积变化,通过苏木素-伊红(HE)染色观察瘤组织病理变化,通过免疫组织化学染色观察增殖相关蛋白Ki67 表达水平变化,通过 TUNEL 染色观察瘤组织中细胞凋亡水平变化,通过免疫组织化学染色观察瘤组织中对 JAK2、p-JAK2、STAT3 和 p-STAT3 蛋白表达水平的变化。 结果 与模型组相比,联合干预后小鼠瘤体积明显变小,具有统计学意义(P<0. 01),体质量升高(P<0. 05),进食未发生明显变化。 瘤组织中增殖相关蛋白 Ki67 表达明显降低,TUNEL 标记的凋亡细胞明显增多;p-JAK2、p-STAT3 蛋白表达升高。 结论 黄芩水煎液可抑制 JAK2 / STAT3 信号通路,并增加 5-Fu 对小鼠肺癌的抑制作用。

摘要: 目的 探讨唾液乳杆菌 Li01( Ligilactobacillus salivarius Li01,L. salivarius Li01)对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)、苯并芘(Benzo(a)pyrene,BaP)、Hp + BaP 共同作用引起的 DNA 损伤的保护作用,评价 L. salivarius Li01 的相关益生特性。 方法 雄性 SPF 级长爪沙鼠适应性饲养 1 周后,随机分组进行 Hp、BaP、Hp + BaP 灌胃造模。 第 32 周,确定造模成功后使用 L. salivarius LiO1 灌胃修复。 第 36 周,取长爪沙鼠眼球血做彗星实验并取肝组织检测细胞色素氧化酶 P4501A1 ( cytochrome P450, family 1, subfamily A,polypeptide 1,CYP1A1)基因表达水平。 结果 与对照组相比,Hp、BaP、Hp + BaP 组的彗星尾长、尾部 DNA 含量和肝 Cyp1a1 基因表达水平显著升高(P<0. 0001),其中 Hp + BaP 组的彗星尾长、Olive 尾距、彗星尾部DNA 含量和肝 Cyp1a1 基因表达水平显著高于 Hp 及 BaP 组(P<0. 05)。 L. salivarius Li01 干预后,各组彗星尾长、Olive 尾距、彗星尾部 DNA 含量及肝 Cyp1a1 基因表达水平显著减小(P<0. 001)。 结论 Hp、BaP、Hp +BaP 均能引起长爪沙鼠外周血淋巴细胞 DNA 损伤,且 Hp 和 BaP 具有协同致损伤作用,而 L. salivarius Li01 对Hp、BaP、Hp + BaP 造成的 DNA 损伤具有保护作用。

摘要: 目的 探索茶花蜜对高脂饮食诱导的果蝇模型生物学特征、肠道炎症和损伤的影响。 方法以标准培养基中加入 30%猪油为果蝇高脂模型组,采用含有不同浓度的茶花蜜的高脂培养基作为各茶花蜜组,分别对果蝇的成虫体质量、羽化率、成虫爬行能力、脂滴的大小及肠道活性氧自由基(ROS)水平进行检测比较。 结果 与模型组比较,各茶花蜜组有明显的改善效果,茶花蜜可以改善果蝇由于高脂饮食诱导的羽化率下降、果蝇蛹体积变大、成虫平均体质量增大、成虫爬行能力下降、脂滴面积增大、肠道损伤及活性氧自由基水平升高。 结论 茶花蜜可以改善高脂饮食诱导的果蝇生长发育及肠道炎症和损伤。

摘要: 目的 研究肺纤维化的动物模型特点,为肺纤维化动物模型的标准化及肺纤维化的发病机制及诊疗研究提供参考。 方法 在中国知网、万方、维普、中国生物医学文献和 PubMed 数据库中检索近 10 年有关肺纤维化动物实验文献,归纳实验动物种类、性别、造模方式、检测指标等要素,用 Excel 进行数据分析。 结果 共纳入符合条件文献 292 篇。 肺纤维化动物模型的动物种类主要是 SD 大鼠、Wistar 大鼠、C57BL / 6 小鼠,动物性别多为雄性,造模药物主要是博来霉素、百草枯、二氧化硅悬液,造模方式主要是气管内注入,造模周期多为 28 d,检测指标主要从肺组织病理观察、蛋白表达、细胞因子、生化指标等多个方面展开。 结论SD 大鼠、C57BL / 6 小鼠是肺纤维化动物模型最常用的实验动物,气管内注入博来霉素(5 mg / kg)是使用最频繁的造模方式,此法可以简便有效地复制出与人类肺纤维化相似的病理特点,可为肺纤维化动物实验研究提供参考。

摘要:斑马鱼作为独具特点的新兴实验动物,广泛应用于人类多种疾病的研究。 斑马鱼具有发育迅速、基因组与哺乳类动物髙度同源、基因编辑操作简便和成本低廉等优势,目前已成为肿瘤研究不可或缺的模式动物之一。 本文对斑马鱼抗肿瘤药物和临床治疗肿瘤研究的应用特点进行概述,以期为斑马鱼在抗肿瘤药物筛选、药物效应、毒副作用、作用机制及临床研究等方面的进一步应用提供有益参考。

摘要:情绪状态是评估动物福利的核心要素。 面部表情作为一种非侵入性方法,越来越多地被用于评估动物情绪状态。 犬(Canis familiaris)与人类关系密切,面部表情对于种间交流和情感表达至关重要。 本综述通过对犬面部表情的神经生物学机制、犬面部肌肉解剖结构以及演变历程、犬与人类面部表情的类比以及不同情绪下犬面部各部位的表情进行阐述,表明犬面部表情是一种有潜力的动物福利指标,犬可作为研究种间面部情绪交流的模型动物。 犬面部表情应用于情绪的评估对神经科学、精神药理学、动物行为学和动物福利科学等多学科领域的研究具有重要价值。

摘要:近年来随着对中医药在治疗免疫系统疾病的研究不断深入,越来越多的中医药显示出对免疫系统疾病有良好的治疗作用。 而特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一种以 2 型免疫为特征的炎症性疾病,对其发病机制和针对其治疗的免疫药物研究也不断增加,从而产生了多种不同类型的动物模型。 本文旨在对现有的 AD 动物模型及其免疫相关特点进行综述,希望为未来 AD 的相关研究模型的选择提供相应的参考。

摘要:铁过载是指体内铁含量超过生理需求,导致铁在器官中沉积的病理状态。 铁过载小鼠模型是研究铁代谢紊乱和相关疾病的重要工具。 本文综述了目前铁过载小鼠模型构建中较为常用的造模方法,主要分为两类:(1)通过肠外补铁(注射铁剂)或肠内补铁(口服铁剂)构建外源性铁过载小鼠模型;(2)通过筛选特定小鼠品系或铁代谢相关基因修饰构建自发性铁过载模型。 肠外补铁周期短、成功率高,适用于单一和复合铁过载模型。 但高吸收率可能引起毒性反应,需预实验确定最佳剂量。 肠内补铁操作简单、安全,但吸收率低,造模周期长。 自发性铁过载模型主要用于特定的基因研究,操作复杂、成本高。 不同的造模方法基本能够对应临床中原发性及继发性铁过载相关疾病,有助于深入理解铁过载的病理机制,并为开发新的治疗方法提供实验基础。

摘要:猪肠道类器官是一种由猪干细胞或者含有干细胞的猪肠道隐窝在体外增殖分化、形成能够自我更新并分化成和体内组织结构相似的 3D 培养物。 基于猪和人在结构和生理上高度的相似性,猪肠道类器官不仅可以满足农业生产和生态环境研究的需求,还可以作为人的体外模型进行药物筛选和毒理研究。 相比于其他体外模型,猪肠道类器官拥有和体内组织相似,有稳定表型和遗传特性等优势。 猪肠道类器官在模拟宿主与微生物相互作用、药物筛选和营养发育研究中展现出巨大潜力,但其构建仍缺少固定流程,这会影响实验重复性。 本文将回顾猪肠道类器官的培养,顶端绒毛暴露方法、微生物和宿主之间的相互作用以及目前所面临的挑战。

摘要:作为重要的科研基础资源,实验动物已成为生命探索、医学研究、药物研发等领域不断发展的重要工具。 随着实验动物福利法律法规的发展,实验动物福利日益被国际社会和科研共同体所重视。 为了维护实验动物福利,规范实验动物伦理审查工作,参考国外的先进经验,结合中国实验动物福利伦理审查的特点,本文主要针对研究人员和审查委员,概述了研究计划的审查和批准流程、福利伦理评估的标准,旨在为实验动物研究计划的撰写提供参考,为实验动物福利伦理的审查工作提供借鉴。