摘要: 目的 构建不同浓度梯度盐酸诱导下的急性胃黏膜损伤(acute gastric mucosal injury,AGMI)大鼠模型,并探讨尾静脉注射不同浓度及剂量的伊文思蓝( evans blue,EB)对大鼠生存率及体表渗出情况的影响。 方法(1)将 Wistar 大鼠根据体重随机分配到 5 个组:150 ~ 180 g 组、180 ~ 200 g 组、200 ~ 250 g 组、300 ~ 400 g 组以及400 ~ 500 g 组,并进一步根据盐酸浓度分为 8 个亚组,具体浓度为:0. 40、0. 45、0. 50、0. 55、0. 60、0. 65、0. 70 mol / L盐酸组以及以生理盐水组作为对照,共 40 个小组,每小组 3 只,共计 120 只。 评估各组大鼠造模后 24 h 生存率,并分析体重和盐酸浓度对大鼠生存情况的交互关系。 在确定 5 个梯度盐酸浓度的基础上,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察胃黏膜镜下的病理变化。 (2)选择(1)结果中适合制备的最高盐酸浓度制备 AGMI 模型,随后,将大鼠随机分配到不同的 EB 浓度和剂量组中,具体分组:EB 1(0. 5%,0. 4 mL)组、EB 2(1%,0. 1 mL/ 100 g)组、EB 3(1%,0. 2 mL/ 100 g)组、EB 4(2%,0. 1 mL/ 100 g)组、EB 5(2%,0. 2 mL/ 100 g)组、EB 6(5%,0. 1 mL)组,每组 5 只,共 30只。 评估注射 EB 后 24 h 内的生存率和体表渗出程度。 结果 (1)AGMI 大鼠造模后症状随着盐酸浓度升高而加剧,0. 65 mol / L 和 0. 70 mol / L 在各体重组中的 24 h 生存率均为 0%。 Kaplan-Meier 生存曲线表明,不同盐酸浓度组大鼠的生存率存在显著性差异(P<0. 001),且盐酸浓度与体重之间的交互作用对大鼠的存活时间产生显著影响(P<0. 001),确定的 5 个梯度盐酸浓度为 0. 40、0. 45、0. 50、0. 55、0. 60 mol / L。 组织学观察结果表明,AGMI 大鼠胃黏膜炎性细胞浸润程度随盐酸浓度升高而加剧。 (2)0. 60 mol / L 盐酸制备的 AGMI 大鼠,尾静脉注射 5% EB(0. 1mL)后 24 h 生存率仅为 40%。 Kaplan-Meier 生存曲线结果显示,EB 不同浓度和注射量下 AGMI 大鼠的生存率无显著性差异(P>0. 05)。 体表渗出情况分析显示,EB 1 组大鼠皮肤和眼睛颜色变化较淡,体表渗出点较少,而 EB 4组、EB 5 组大鼠皮肤颜色和渗出情况较明显。 单因素方差分析进一步证实,EB 3 组、EB 4 组和 EB 5 组大鼠的体表EB 渗出点数量显著多于 EB 1 组(P<0. 05,P<0. 01)。 结论 盐酸造模能够实现多个精确浓度梯度的设置。 禁食后体重为 180 ~ 200 g 范围的大鼠,灌胃 0. 40 ~ 0. 60 mol / L 浓度可有效制备 AGMI 模型。 尾静脉注射 2% EB(0. 2 mL/ 100 g),将有利于开展 AGMI 大鼠体表 EB 渗出点分布特征随时间和病情变化的研究分析。