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Abstract:目的 探讨干扰OVA66基因表达对移植瘤细胞生物学功能的影响.方法 采用脂质体法,以重组的pSUPER-shRNA-OVA66和空载体转染HeLa细胞获得稳定表达细胞株,经RT-PCR和Western blot鉴定OVA66基因的表达.将两组细胞接种于BALB/cnu/nu裸鼠的前肢腋下,连续观察干扰OVA66表达对肿瘤的生长影响.并于接种4周后,应用RT-PCR, 免疫组化、免疫荧光等方法检测移植瘤细胞中OVA66的蛋白表达.组织病理分析肿瘤细胞生长和转移的特征.结果 经检测pSUPER-shRNA-OVA66能有效抑制目的基因的表达.比较两组荷瘤小鼠中肿瘤的生长曲线发现,OVA66实验组的肿瘤生长速度明显低于对照组,并且肿瘤细胞体内转移和浸润能力显著降低.结论 干扰OVA66基因和蛋白表达,可以抑制肿瘤细胞的生长,浸润和侵袭能力.

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Abstract:目的 研究胶原蛋白多肽-铬(Ⅲ) (CPCC) 螯合物对由四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠的免疫力的影响.方法 通过腹腔注射四氧嘧啶造小鼠糖尿病模型, 观察胶原蛋白多肽-铬(Ⅲ)螯合物对小鼠血糖、脾指数、胸腺指数、脾细胞增殖能力、NK细胞杀伤活性、CD40、CD40L的表达等指标的影响.结果 胶原蛋白多肽-铬(Ⅲ)螯合物可以有效预防小鼠血糖升高,对脾指数、胸腺指数有一定的恢复作用,脾细胞增殖能力明显增强,NK细胞的杀伤活性被提高, CD40、CD40L的阳性表达率增加.结论 胶原蛋白多肽-铬(Ⅲ)能活化免疫细胞,恢复和改善小鼠机体的免疫功能,提高小鼠机体的免疫力,一定程度地减轻四氧嘧啶的毒性作用,降低血糖.

Abstract:目的 克隆SD大鼠SDF-1α基因,并进行生物信息学分析.方法 采用RT-PCR扩增SDF-1α基因,对扩增产物进行序列的测定,利用Internet和GenBank数据库对测序结果正确的SDF-1α基因进行生物信息学分析.结果 克隆了SDF-1α基因,测序结果正确;生物信息学分析表明, SDF-1α基因开放读码为270 bp,编码89个氨基酸;同源性分析表明,与人、猫、狗的SDF-1α基因同源性最大.多种组织的半定量RT-PCR研究表明,该基因在心脏、肝脏、肺、脑、肾脏、脾脏、胰脏均有表达,其中脾脏、胰脏表达较高.结论 成功克隆SDF-1α基因,对其功能进行了初步预测,为进一步的功能研究打下基础.

Abstract:目的 采用活体成像技术监测稳定高表达荧光素酶报告基因的肿瘤细胞在小鼠体内生长及转移情况,为肿瘤治疗的药物研发提供新的有用工具.方法 采用lipofectamine2000介导的基因转染方法,将pcDNA3.1/Luc载体转染小鼠高转移乳腺癌细胞株4T1、EMT-6及结肠癌细胞株CT26,经G418抗性筛选及有限稀释法获得可稳定高表达荧光素酶的单克隆细胞;MTT法测定各转染细胞对不同化疗药物的抗性,并采用活体成像的方法检测各转染细胞在小鼠体内的成瘤和转移.结果 获得了可稳定高表达荧光素酶基因的单克隆细胞株,该单克隆细胞株具有与亲本细胞系相同的对化疗药物的敏感性;将单克隆细胞株植入小鼠皮下,可采用活体成像技术准确监测肿瘤细胞体内生长及转移.结论 采用活体成像技术构建的肿瘤动物模型是拓展肿瘤体内生长、转移及治疗相关研究的理想模型.

Abstract:目的 建立一种大鼠腰椎间盘突出症的动物模型.方法 采用自体髓核移植至背根神经节 铬制肠线环扎神经根的方法,建立根性神经痛模型,观察背根神经节的组织学改变及超微结构改变,用Von Frey针丝和RTX-1型热痛测试仪检测动物的痛觉行为改变.结果 该方法可诱导出明显的机械刺激痛觉超敏与热刺激痛觉过敏,术后1周时最为明显,术后3周时仍有较明显的神经行为异常;术后1周时背根节出现明显的充血水肿,而术后3周以脱髓样改变和纤维细胞增生为主.结论 自体髓核移植 铬制肠线环扎神经根可较好地引起根性神经痛的发生,可作为研究椎间盘突出症的动物模型.

Abstract:目的 比较正常猕猴与人视网膜血管的异同,为进一步利用猕猴建立动物模型来研究视网膜血管打下基础.方法 取健康成年猕猴眼球6只和人角膜移植供体剩余眼杯8只的视网膜,用ADP酶法进行血管染色,对两者视网膜血管的走行、血管分级、毛细血管分层以及黄斑区血管拱环等进行比较,测量结果进行统计学检验.结果 猕猴与人的视网膜铺片经ADP酶法染色后见视网膜血管自穿出视盘后的一级血管逐渐分支变细,直至五级血管即毛细血管;在视盘旁、赤道部、周边部两者血管面积百分比没有差异;视盘旁血管分为多层,赤道部有两层,且深浅层间相互交通,周边部仅见一层毛细血管且较稀疏;两者黄斑区毛细血管均较密集,有形态完整呈不规则状的血管拱环,血管面积百分比以及血管拱环的面积、周长和直径没有差异.结论 猕猴与人在视网膜血管走行、分级、毛细血管分层以及黄斑区血管拱环等多方面有良好的相似性,可用作人类视网膜血管、尤其是黄斑区视网膜血管研究的良好动物模型.

Abstract:目的 探讨两种经典高血压实验动物模型的证候特征,以便更好地考察降压中药疗效及作用机理.方法 选择自发性高血压大鼠和肾性高血压大鼠两种经典常用动物模型,从宏观表征和行为学的角度,对二者的证候特征及其差异性进行辨析比较.结果 自发性高血压大鼠在14～18周龄,基本符合高血压中医辨证分型中肝火上炎证型的表现;两肾一夹型肾性高血压大鼠在术后4～8周,基本符合高血压中医辨证分型中阴虚阳亢证型的表现.结论 两种高血压动物模型的中医证候特征不同,在进行降压中药的疗效评价和作用机理实验研究时,可以考虑有针对性地选用.

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Abstract:目的 系统的研究小鼠乳腺发育周期中乳腺细胞凋亡情况,并阐明瘦素对乳腺细胞凋亡的影响.方法 以小鼠乳腺为实验材料,采用TUNEL法系统地研究小鼠乳腺在青春期、妊娠期、泌乳期和退化期的整个发育周期中的细胞凋亡情况,并通过培养基中添加瘦素的方法研究瘦素对乳腺细胞凋亡的影响.结果 在青春期50～60 d、妊娠期10～16 d、退化期1～10 d 检测到较多的细胞凋亡,其中退化期细胞凋亡最为显著.添加瘦素培养的乳腺细胞凋亡信号明显增多.结论 小鼠乳腺发育不同时期细胞凋亡同结构和功能发育之间相互联系.同时通过小鼠乳腺组织体外培养的方法,证明瘦素在退化期乳腺组织中可明显诱导组织凋亡.

Abstract:目的 研究不同性别大鼠在2型糖尿病造模过程中的成功率及模型的稳定性.方法 高糖高脂饮食联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素诱导建立雄、雌性大鼠2型糖尿病模型.成模后所有大鼠每周固定时间测血糖和体重.观察24周后,心脏穿刺取血,测定空腹血糖 (FPG)、血清胰岛素 (FINS)、HbA1c、甘油三脂 (TG)、胆固醇 (TC)、高密度脂蛋白-胆固醇 (HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇 (LDL-C).结果 单纯高糖高脂饮食喂养,雄、雌性大鼠血糖与正常组无显著差异;STZ注射后,雄性大鼠血糖升高并逐渐平稳,而雌性需两次STZ注射,模型才比较稳定.实验结束时,雄、雌性糖尿病大鼠FPG、FINS、HOMA-IR以及TG、TC、LDL-C均显著升高,说明模型存在胰岛素抵抗和脂代谢紊乱.结论 高糖高脂饲料加一次性小剂量链脲佐菌素腹腔注射,可成功建立雄性大鼠2型糖尿病模型,而同等剂量,雌性模型需两次STZ.雄、雌性糖尿病大鼠模型具有高血糖、脂质代谢紊乱和胰岛素抵抗特点.造模成功率及稳定性与性别有关,雄性大鼠较雌性大鼠成模率高,稳定性好,且耗时更短.

Abstract:目的 对皮下筋膜层与腹壁肌层之间移植自体子宫内膜制作的子宫内膜异位症(endometriosis, EMs) 模型进行评估.方法 取10只雌性未交配性成熟大鼠,术前雌激素诱导,手术开腹取右侧子宫,将自体子宫内膜种植于双侧皮下筋膜层与腹壁肌层之间,术后第29天取出异位组织,进行组织形态学观察,免疫组织化学染色观察微血管密度 (Microvessel density, MVD).结果 异位内膜在腹壁内生长,呈隆起囊状小包块,内有黏液,具有正常子宫内膜基本组织结构.异位内膜中微血管密度较在位内膜和正常子宫内膜高.结论 此手术方法建立的大鼠子宫内膜异位症模型异位内膜病理改变与EMs患者类似,可以作为子宫内膜异位研究的动物模型.

Abstract:目的 比较大鼠肾大部切除与肾结扎两种方法制备的5/6肾切除慢性肾功能不全模型的异同.方法 雄性SD大鼠随机分为三组.A组行左肾2/3切除加右肾切除,B组行结扎左肾动脉2/3分支加右肾切除,C组为假手术组.分别于第二次手术后5周、9周及13周测血压,处死大鼠,留取24 h尿及肾组织.检测尿蛋白,肾组织切片染色.用半定量法评价肾小球硬化指数.结果 第5周时,B组大鼠的收缩压显著升高,而A组与C组相比无显著差异,第9周和13周A组和B组与C组大鼠相比,收缩压均显著升高.肾部分切除术后,尿蛋白随时间进行性增加.B组与A组相比,尿蛋白增加更为显著.A组和B组在各观察点均有不同程度肾小球硬化,B组较A组肾小球硬化程度重.结论 肾大部切除和肾结扎两种方法制备的大鼠5/6肾切除模型表现有所不同.

Abstract:目的 建立一种简便、快捷、准确的检测方法用于近交系小鼠的遗传检测.方法 根据近交系小鼠的H-2基因序列设计相应的探针,并标记生物素,利用微孔板Southern杂交技术,使探针与模板DNA杂交,再加入亲和素标记的辣根过氧化物酶进行酶显色反应,通过酶标仪检测杂交结果,以确定近交系小鼠的基因型.结果 57BL/6和C57BL/10为H-2b型; DBA/2和Scid为H-2d型;615和C3H为H-2k型;NCPC/2、TA1、TA2和T739均为H-2b型.结论 通过Southern杂交检测可以确定近交系小鼠的基因型.该检测方法简便、易行,检测结果客观,可以应用于近交系小鼠的遗传检测.

Abstract:回顾国外NOD小鼠模型研究干燥综合征病理所取得的成果.查阅PUBMED上自2000年以来的相关文献,发现研究成果为疾病早期的细胞凋亡和疾病期的自身免疫反应提供了有利的证据.说明NOD小鼠模型在干燥综合征的病理机制研究中具有重要的作用,同时新抗原受体的发现为今后的研究提供了方向.

Abstract:银屑病是一种长期困扰人类的疾病, 具有病程长、易复发、难治愈的特点,其病因及发病机制至今尚未完全清楚.银屑病动物模型的建立对揭示该病遗传背景、发病机制及开发新药等都有极大的促进作用.因此,国内外学者在该领域进行了大量的研究.本文就银屑病动物模型的研究状况作一综述.

Abstract:SIV/SHIV感染的恒河猴是研究艾滋病及艾滋病药物筛选、疫苗评价较理想的动物模型.MHC在细胞免疫中起着关键作用,研究表明,MHC-I类分子的多态性与SIV/SHIV感染者的疾病进展有着明显的关联作用,Mamu-A*01是恒河猴中的一种MHC-I类分子,它可以呈递特定的病毒蛋白片段到细胞的表面,从而激发CTL反应.国外发现Mamu-A*01阳性的猴艾滋病恒河猴会出现疾病进展缓慢,存活时间长等特征.本文就恒河猴Mamu-A*01基因与SIV/SHIV感染相关的研究进展做一综述,以期进一步加深对MHC在疫苗研究中的作用的了解,并促进更行之有效地对HIV/AIDS疫苗进行评价.