Abstract:2009年4月,A/H1N1流感在墨西哥和美国暴发.随后,疫情迅速蔓延到美洲、欧洲、亚洲多个国家.A/H1N1流感病毒是一种以前在人或动物身上从未观测到的新病毒.遗传进化和抗原特性分析表明该病毒和猪流感病毒密切相关,与人类的季节性流感病毒有明显区别.但是流行病学信息表明A/H1N1流感病毒只攻击人类,并在人与人之间传播,尚未发现动物向人类传播的情况.本文从A/H1N1流感病毒的生物学特性、临床特征、公共卫生意义等方面全面阐述了A/H1N1流感的最新研究进展,为正确认识和科学防控A/H1N1流感提供参考.

Abstract:目的 建立和评价2型糖尿病心肌病(DC)大鼠模型,探究高糖脂饮食在模型建立中的作用.方法 将雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组、高糖脂饮食组和高糖脂负荷小剂量STZ组.高糖高脂膳食诱导11周负荷小剂量链脲佐菌素(STZ)(30 mg/kg)腹腔注射建立DC模型,并观察糖代谢、脂代谢和心功能的变化.结果 ①大鼠经高糖高脂饲料诱导4周后,与正常对照组相比,胆固醇(TCH)和甘油三酯(TG)均显著增高(P<0.05),血糖值没有明显变化(P>0.05).②大鼠注射30 mg/kg STZ后72 h,血糖水平开始升高,继续以高糖高脂饲料喂养6周后,与正常对照组比较,高糖脂饮食组和高糖脂负荷小剂量STZ组大鼠TG、TCH维持高水平,差异有显著性(P<0.05);高糖脂负荷小剂量STZ组大鼠血糖值持续高水平,与正常对照组差异有显著性(P<0.001).③心功能测量结果显示,高糖脂饮食组大鼠出现温和的心脏功能异常(左心室收缩压降低,左心室舒张末压升高);高糖脂负荷小剂量STZ组大鼠左心室收缩和舒张功能均出现异常(LVSP、每搏输出量、心排量降低,LVEDP、左心室最大舒张速率升高),但以舒张功能异常为主.结论 大鼠高糖脂饮食诱导负荷小剂量STZ可建立类似临床症状的2型DC模型,高糖脂饮食在糖脂代谢紊乱和心脏功能损伤过程中有重要作用,结合糖、脂代谢指标和心脏功能指标可以有效简便评价糖尿病心肌病模型.

Abstract:目的 研究携带BABL/c小鼠VEGFR-3(1-3Ig)基因的重组腺病毒转染淋巴管内皮祖细胞(LEPCs)后,对可溶性VEGFR-3蛋白分泌及其生物学特性的作用.方法 采用巢式RT-PCR技术从BABL/c小鼠胎盘组织中扩增VEGFR-3(1-3Ig)的编码基因,并通过重组PCR技术在基因的N端加上人CD33的信号肽.将该基因片段亚克隆入腺病毒表达载体(pDC316-IRES-EGFP),重组质粒经酶切及测序验证后,与包装质粒共转染293细胞以产生重组腺病毒.将构建好的携带有小鼠VEGFR-3(1-3Ig)基因的重组腺病毒转染淋巴管内皮祖细胞,通过ELISA检测转染细胞上清液中可溶性VEGFR-3蛋白的分泌及其对VEGF-C的中和作用.结果 成功构建了带有信号肽的BABL/c小鼠VEGFR-3(1-3Ig)基因的腺病毒表达质粒,并获得高滴度的携带有小鼠VEGFR-3(1-3Ig)基因的重组腺病毒,重组腺病毒转染淋巴管内皮祖细胞后,可使转染细胞分泌可溶性VEGFR-3蛋白,该蛋白具有中和VEGF-C的作用.结论 成功地制备了携带BABL/c小鼠VEGFR-3(1-3Ig)基因的重组腺病毒,用该病毒转染淋巴管内皮祖细胞可使其分泌可溶性VEGFR-3,该蛋白在体外具有中和VEGF-C的作用,这为临床抑制肿瘤淋巴管新生奠定了基础.

Abstract:目的 研究多巴胺(DA)对大鼠结肠运动影响的机制.方法 采用离体组织灌流方法记录大鼠远端结肠自发性节律运动,观察DA的作用以及阻断剂的影响,再用反转录实时多聚酶链反应(real time RT-PCR)检测受体基因的表达.结果 DA(≥1.0×10-5mol/L)对结肠远端(紧接肛门淋巴结近端)离体纵行肌条(2.0 mm×10 mm)的运动具有抑制作用,多巴胺受体阻断剂(D1受体阻断剂SCH23390,1.0×10-7mol/L,D2受体阻断剂Sulpide,1.0×10-mol/L)不能阻断多巴胺的抑制效应,但加入β3受体抑制剂cyanopindolol(7.5×10-7mol/L),DA的抑制作用显著减弱.real time RT-PCR检测发现β1、β2、β3受体mRNA在远端结肠均有表达.结论 DA可通过β3受体发挥对远端结肠运动的抑制作用.

Abstract:目的 分离、鉴定MPTP诱导慢性帕金森病模型小鼠纹状体差异表达的蛋白质,对MPTP慢性PD动物模型的特异性蛋白质组进行初步探讨,为PD的发病机制提供一定的蛋白质组学依据.方法 成功建立MPTP诱导慢性帕金森病小鼠模型,提取模型组和对照组小鼠脑纹状体蛋白质,分别以固相pH梯度等电聚焦为第一向,SDS-PAGE垂直电泳为第二向进行2-DE.图像分析软件PDQUEST8.0分析电泳图谱找出差异表达蛋白,运用MALDI-TOF MS质谱鉴定;其肽质量指纹图(PMF)经MS Fit检索.结果 比较MPTP诱导慢性PD模型小鼠和正常对照小鼠纹状体二向电泳图,发现12个蛋白表达异常,最终鉴定出其中4个蛋白质:线粒体裂殖调节因子1(mitochondrial fission regulator 1)、类泛素样蛋白3前体(ubiquitin-like protein 3 precursor)表达下调;S100蛋白A10(protein S100-A10)、Lin-7 homolog B为新出现点.结论 初步鉴定出MPTP慢性PD模型小鼠纹状体部分差异表达蛋白,所发现4个表达异常的蛋白质与帕金森病线粒体的损伤和兴奋性神经毒性密切相关,与PD的发病机制相符,为深入研究帕金森病病理机制奠定了基础.

Abstract:目的 制作并鉴定研究足月新生儿缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的大鼠模型,以期用于足月新生儿缺氧缺血性脑损伤发病机制及治疗的研究.方法 40只新生10日龄SD大鼠分为对照组18只和实验组(HIBD组)22只,实验组行右侧颈总动脉结扎,缺氧(8%氧和92%氮气)2.5 h;对照组只分离右侧颈总动脉,不行结扎和缺氧处理.应用Longa评分法评价神经行为学改变;HE染色检测组织病理学改变;免疫组化检测凋亡标志蛋白cleaved caspase-3(CC3)的表达;及TUNEL染色检测细胞凋亡情况.结果 对照组大鼠全部存活,实验组死亡4只,死亡率18.1%.Longa评分分析实验组有不同程度神经功能缺损,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);HE染色显示实验组均出现脑组织充血、水肿,缺血侧更重,细胞体肿胀,细胞排列紊乱,结构不清;免疫组化显示实验组CC3表达随损伤时间延长逐渐增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);TUNEL染色显示实验组阳性细胞随时间延长逐渐增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.05).结论 该大鼠模型脑组织病变符合足月新生儿HIBD的病理学改变及神经行为学改变,可用于足月新生儿HIBD发病机制与防治措施的研究.

Abstract:目的 通过建立子宫内膜异位症小鼠模型探讨雌激素β受体对子宫内膜异位症的影响.方法 利用雌激素β基因敲除小鼠建立自体子宫内膜异位模型;应用人不同的组织在SCID小鼠建立子宫内膜异位症模型后,注射雌激素β受体激动剂WAY-200070,观察其对异位病灶生长的影响.结果 比较30只雌激素β受体基因敲除小鼠及22只同源未敲除小鼠异位病灶生长及组织细胞形态无明显差异(P>0.05);雌激素β受体激动剂WAY-200070对不同类型的SCID小鼠内异症病灶生长影响无明显差异(P>0.1).结论 雌激素β受体对子宫内膜异位病灶的形成影响作用微弱.

Abstract:目的 观察HSF1基因剔除对小鼠生长、繁殖的影响.方法 用HSF1基因剔除纯合子、杂合子和野生型小鼠建立交配对,HSF1基因正常繁殖组(简称HSF1正常组)30对、HSF1基因缺陷繁殖组(简称HSF1缺陷组)72对.观察母鼠产仔数、生产胎数、每胎产仔数、成年鼠体重.结果 HSF1缺陷组母鼠平均产仔数(13.00±11.50)较少,与HSF1正常组(26.46±16.02)比较差异有显著性(P<0.01).HSF1缺陷组母鼠每胎产仔数(4.65±2.33)亦较少,与HSF1正常组(7.56±3.08)比较差异有显著性(P<0.01).HSF1缺陷组母鼠平均生产胎数(2.79±2.64)与HSF1正常组(3.50±2.19)比较差异无显著性(P>0.05).HSF1缺陷组成年小鼠平均体重(20.53±4.62)较轻,与HSF1正常组(23.06±3.39)比较差异有显著性(P<0.01).结论 HSF1基因剔除小鼠被广泛应用于研究HSF1功能,但HSF1基因剔除对生殖、生长和健康状态的影响不容忽视.

Abstract:目的 研究短途运输应激对Wistar大鼠的影响,建立评价啮齿类实验动物短途运输应激的技术指标体系.方法 采用Wistar大鼠进行短途运输实验,测定其在运输中及运输后各阶段的代谢、神经内分泌和免疫功能主要指标,与未经历运输的对照组比较,分析短途运输应激的影响.结果 Wistar大鼠血糖(GLU)在运输0.5 h和1 h时均升高,而在运输1.5 h时降低,运输结束后24 h时GLU再次升高;血清皮质酮(CORT)亦在运输0.5 h和1h时升高而运输1.5 h时降低,但运输结束24 h起即恢复正常;血清β-内啡肽(β-EP)从运输起至运输结束24 h时均降低,至48 h恢复正常.外周白细胞总数(WBC)自运输起急剧减少,于结束运输后的72 h恢复;免疫球蛋白G(IgG)、白介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)及白介素1(IL-1)的血清水平在运输中及运输结束的即刻均没有显著变化,但在结束运输后的48 h内均不同程度降低,至72 h恢复至正常水平.肝脏hsp72 mRNA的表达随着运输时间的延长而极显著上调,运输结束后逐渐恢复,至72 h恢复至正常水平.结论 短途运输应激对Wistar大鼠的代谢、神经内分泌和免疫功能均有不利影响,其经历常规短途运输(1.5 h以内)到达目的地后的健康适应期至少应为72 h;外周血中白细胞总数(WBC)、血糖(GLU)、皮质酮(CORT)、β-内啡肽(β-EP)、白介素2(IL-2)的水平可用于系统评价短途运输应激.

Abstract:目的 分析米非司酮(RU486)对恒河猴促性腺激素分泌水平的影响,探讨RU486影响恒河猴促性腺激素分泌的可能机制,为临床安全用药提供理论依据.方法 采用生物测定法测定恒河猴促性腺激素,比较在不同情况下恒河猴促性腺激素的分泌水平.结果 实验表明:不同时间(0、0.5、1、2、4、8、12、24、48 h)用药后,RU486对恒河猴促黄体激素(LH)、促滤泡激素(PSH)分泌水平的影响,在用药0.5、1、2、4 h后,对LH、FSH分泌均有抑制作用,其中在用药4 h时,LH、FSH分泌水平均有显著的降低,而用药8、12、24、48 h后,LH、FSH浓度没有显著差异.在月经周期的不同时期一次用药后发现,卵泡期:RU486对LH、FSH分泌水平影响较小;排卵期:RU486对LH、FSH峰的发生延迟现象;黄体期:观察到RU486对FSH、LH基础分泌水平及脉冲的幅度出现下降.结论 RU486对恒河猴的LH、FSH分泌水平,在不同情况下有显著差异.

Abstract:目的 探讨大豆异黄酮(soy isoflavones,SIF)对老龄大鼠雌激素水平和雌激素受体表达的影响.方法 将40只16月龄雌性SD大鼠随机分为高、中和低剂量大豆异黄酮3个实验组(H-SIF,M-SIF和L-SIF)和1个对照组,每天分别按100、50和25 mg/(kg·bw)剂量的大豆异黄酮进行灌胃,对照组灌服生理盐水.42 d后称重,股动脉放血处死动物收集血清、摘取子宫称重并冷冻保存.采用放射免疫法测定血清中雌二醇(E2)、睾酮(T)、泌乳素(PRL)、促黄体生成素(LH)和促卵泡激素(FSH)的含量;RT-PCR检测子宫雌激素受体α(ERα)基因的表达.结果 与对照组相比,3个实验组血清中E2和PRL都升高,LH和FSH都降低,其中高剂量组差异有显著性(P<0.05);子宫重量无明显差异;子宫ERα表达呈下降趋势,但无统计学意义.结论 大豆异黄酮能调节老龄大鼠血清中的雌激素水平,且有剂量依赖性;大豆异黄酮对老年大鼠子宫重量和子宫ERα的表达无影响.

Abstract:目的 建立大潮气量致急性肺损伤(ALI)犬呼吸机相关性肺损伤(VILI)模型.方法 健康雄性杂种犬12只用油酸静脉注射法制备犬ALI模型,造模成功后进行支持通气15min过渡,然后随机分为VILI组及对照组行机械通气6 h,每组6只.VILI组潮气量(Vt)=20 mL/kg,对照组Vt=6 mL/kg,两组呼气末正压(PEEP)均为10 cmH2O.动态观察各组血气交换指标变化.通气6 h后取支气管肺泡灌洗液(BALF)作白蛋白浓度检查,取肺组织作病理切片肺损伤评分.结果 各组在油酸静脉注射后(2.50±0.80)h达到ALI标准.VILI组在犬机械通气6 h后PaO2、SaO2及氧合指数(OI)较对照组略下降(P<0.05),而PaCO2波动不大,且心率、血压波动也较对照组小(P<0.05).VILI组BALF中蛋白浓度和肺组织损伤评分均较对照组显著升高(分别P<0.05,P<0.01).结论 本实验成功建立了大潮气量致ALI犬VILI模型.

Abstract:目的 建立人子宫内膜异位症裸鼠模型.方法 通过开腹手术方法将人子宫内膜组织块种植于裸鼠盆腹腔,观察其生长情况,并进行病理检查.结果 成功建立人子宫内膜异位症裸鼠模型,种植病灶能保持原有内膜组织的形态结构,并可见血管生成明显.结论 子宫内膜异位症裸鼠模型的建立是子宫内膜异位症早期临床研究的理想模型.

Abstract:目的 研究雌性小鼠饲喂异黄酮后对其后代雌鼠生殖性状的影响.方法 分别在雌鼠从断奶到妊娠前和妊娠期间两个不同阶段的日粮中添加不同剂量的大豆异黄酮(0、50、400 mg/kg).记录F1代的出生窝产仔数、出生窝重、雌鼠的阴道最早开张时间和最早见栓时间,以及后代雌鼠性成熟期和体成熟期生殖器官重量、血清雌激素的含量.结果 雌鼠妊娠期饲喂含50、400 mg/kg大豆异黄酮的饲料后F1代的窝产仔数显著高于对照组(P<0.05);雌鼠妊娠期采食400 mg/kg大豆异黄酮饲料,其后代雌鼠初次配种时间明显延迟(P<0.05);45、65日龄体重显著低于对照组,65日龄子宫重显著低于对照组,卵巢重显著高于对照组;血清中雌激素含量显著低于对照组(P<0.05),妊娠期间采食50 mg/kg大豆异黄酮饲料,其F1代雌鼠仅窝产仔数和45日龄时血清中雌激素含量受到影响;而雌鼠从断奶到怀孕期间饲喂含大豆异黄酮饲料的F1代在各项指标与对照组均差异无显著性.结论 雌鼠妊娠期间饲喂含400 mg/kg大豆异黄酮的饲料会显著影响其雌性后代的初情期、生殖器官发育、血清雌激素含量等生殖生理性状,而在非妊娠期饲喂含大豆异黄酮饲料对F1代无显著影响.

Abstract:目的 对经典的原代视网膜小胶质细胞体外纯化培养方法进行简单的改良以提高细胞产量.方法 在视网膜小胶质细胞原代培养过程中以McCarthy等的经典方法为基础,寻找适当的初始种植密度,并在初次振荡分离后继续培养以获得多次产出,使用免疫细胞化学染色方法进行小胶质细胞纯度鉴定.结果 视网膜小胶质细胞原代培养最宜初始种植密度为1×106/mL,多次分离纯化获得的视网膜小胶质细胞均达到97%以上的纯度.结论 视网膜小胶质细胞原代培养过程中,以适当的初始种植密度和多次振荡分离方法可在保证有效纯度的基础上提高细胞产量.

Abstract:目的 探讨建立糖尿病兔股动脉损伤后血管狭窄的模型方法.方法 采用四氧嘧啶静脉注射建立糖尿病兔模型.建模成功后分为手术组、对照组,手术组接受了经隐动脉途径行球囊损伤股动脉术,对照组不行球囊损伤.术后均给予普食喂养,4周处死,行HE染色后观察血管狭窄情况.结果 所有兔均完成了手术,24只存活至实验结束,平均手术时间(26±7)min,成功造成糖尿病兔股动脉狭窄模型,平均相关狭窄达(88.11±1.9)%.结论 成功建立了糖尿病兔股动脉损伤后狭窄的实验模型,手术成功率高,操作时间少,存活率高,模型稳定,重复性好,为糖尿病外局血管病变的实验研究提供了借鉴方法.

Abstract:目的 探讨心钠肽(ANP)在小鼠卵泡发育过程中的表达定位以及其对体外受精的影响.方法 应用免疫组织化学对小鼠卵巢切片进行染色,检测ANP在卵泡不同发育阶段的表达情况.利用ANP受体A的拮抗剂anantin检测ANP在小鼠体外受精中的作用.结果 在卵泡生长和分化期,ANP广泛地存在于间质细胞、内膜细胞、颗粒细胞、卵丘细胞、卵母细胞以及黄体细胞的胞质中,特别是在排卵前卵泡中的卵丘细胞上其表达最强;经ANP受体A的拮抗剂anantin孵育后的小鼠精子,其体外受精的卵裂率与对照组相比显著下降(58.7±4.3 vs.92.3±2.1,P<0.01),但是对胚胎后来的发育没有影响.结论 卵丘细胞中表达的ANP可能通过受体A参与了小鼠的受精过程.

Abstract:具有良好信度和效度的动物模型是从实验室到临床转译研究成功的保证,为进一步应用硝酸甘油(glycerol trinitrate,GTN)偏头痛大鼠模型,对其信度和效度进行评价.效度包括表面效度、建构效度、标准关联效度.衡量表面效度的标准是症状同源性.GTN偏头痛大鼠模型行为学表现与人类偏头痛有一定的相似性.建构效度主要指动物模型对理论假说的解释度,GTN模型复制了偏头痛的神经源性炎症及痛觉增敏,具有较好的建构效度.标准关联效度即预测效度主要表现为药理学反应及其在临床的干预实验.GTN模型对典型抗偏头痛药物麦角胺的反应较敏感,但是该模型的预测力效度仍未有效建立.GTN偏头痛大鼠在不同的地区、不同的实验室均已成功复制,表明其有较好的信度.

Abstract:目前应用转基因和基因敲除小鼠的研究工作几乎成为各种国际高水平学术刊物的主流,而基因改造的家兔由于其独有的特点,在心血管研究中占有重要地位.本文从基因改造小鼠的最新研究进展着手,分析了基因修饰小鼠在动脉粥样硬化研究中的局限性,进而阐明基因改造家兔用于动脉粥样研究的优越性及研究近况.文章分析表明基因改造家兔技术及其应用必将在生物医学研究中发挥重要作用.

Abstract:代谢综合征是一组以多种代谢性疾病合并出现为临床特点的临床症候群.建立适合的MS动物模型对研究代谢性疾病的发病机理和相关药物筛选有十分重要的意义.本文就目前MS实验动物模型的建立做一综述,并对其进行评价.