白桦脂醇对 Aβ25-35 诱导的 PC12 细胞氧化应激和凋亡的影响
作者:
作者单位:

齐齐哈尔医学院附属第三医院神经内科,黑龙江 齐齐哈尔 161002

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通讯作者:

中图分类号:

R-33

基金项目:


Effects of Betula alcohol on oxidative stress and apoptosis induced by Aβ25-35 in PC12 cells
Author:
Affiliation:

Department of Neurology, the Third Affiliated Hospital of Qiqihar Medical University, Qiqihar 161002, China

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    摘要:

    目的 探讨白桦脂醇对 Aβ25-35 诱导的 PC12 细胞氧化应激和凋亡的影响。 方法 以 40 μmol / L Aβ25-35作用于 PC12 细胞,实验随机分对照组、Aβ25-35组、N-乙酰半胱氨酸组(NAC 组)和白桦脂醇 5、10、20 μmol / L 组,采用 MTT 法检测细胞的存活率,Annexin V-FITC/ PI 双染流式细胞术检测凋亡情况,JC-1 试剂盒检测线粒体膜电位,LDH、MDA、SOD 试剂盒分别检测 LDH、MDA 和 SOD 水平,比色法检测 caspase3、caspase8、caspase9 和 Cyt c 的 酶活性,Western blot 法检测凋亡相关蛋白 Bcl2、Bax、caspase3、caspase8、caspase9 和 Cyt c 的活性和表达。 结果 与 Aβ25-35组比较,白桦脂醇和 NAC 均对 Aβ25-35诱导的 PC12 细胞可提高细胞存活率和 SOD 活性(P< 0. 01),并降低 LDH 释放率和凋亡率( P < 0. 01),抑制 caspase3、 caspase8、 caspase9 和 Cyt c 酶活性(P< 0. 01),同时下调 Bax、 caspase3、caspase8、caspase9 和 Cyt c 表达水平(P< 0. 01),并上调 Bcl2 的活性和表达(P< 0. 01)。 结论 通过预防给予有效剂量的白桦脂醇能够抑制 Aβ25-35诱导产生的细胞凋亡,其机制可能与减少 ROS 生成从而降低氧化应激水平,继而抑制细胞凋亡途径有关。

    Abstract:

    Objective To investigate the effect of betulin on Aβ25-35 -induced oxidative stress and apoptosis of PC12 cells. Methods PC12 cells were treated with 40 μmol / L of Aβ25-35 . The cells were randomly divided into control group, Aβ25-35 group, NAC group, and betulin 5, 10 and 20 μmol / L groups. Apoptosis was detected by V-FITC/ PI double staining flow cytometry; mitochondrial membrane potential was detected by JC-1 kit; LDH, MDA and SOD levels were detected by LDH, MDA and SOD kits, respectively; the enzyme activity of caspase-3, caspase-8, caspase-9 and Cyt c was detected by colorimetry; the activity and expression of Bcl 2, Bax, caspase-3, caspase-8, caspase-9 and Cyt C were detected by western blotting. Results Compared with the Aβ25-35 group, betulin and NAC improved the cell survival rate and SOD activity ( P < 0. 01), reduced the LDH release rate and apoptosis rate ( P < 0. 01), inhibited caspase - 3, caspase-8, caspase-9 and Cyt c enzyme activity (P < 0. 01), and downregulated Bax, caspase-3, caspase-8, caspase- 9 and Cyt c enzyme activity (P < 0. 01) and expression level (P < 0. 01). In contrast, these treatments upregulated the activity and expression of Bcl2 ( P< 0. 01 ). Conclusions Betulin inhibited the Aβ25-35 -induced apoptosis. The mechanism may be related to the reduction in ROS production, thus reducing the level of oxidative stress, and thereby inhibiting apoptosis.

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    引证文献
引用本文

傅增辉,姜 岩,刘 晶,林再红,杜 姝,张广萍,陈团团.白桦脂醇对 Aβ25-35 诱导的 PC12 细胞氧化应激和凋亡的影响[J].中国比较医学杂志,2020,30(6):54~61.

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  • 收稿日期:2020-01-07
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  • 在线发布日期: 2020-07-23
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