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阮蕾颖,施梅言,古文鹏,邱丹丹,陆彩霞,罕园园,王文广,代解杰,孙晓梅.成年树鼩睾丸维生素 D 代谢酶 CYP24A1 表达与生育力相关研究[J].中国比较医学杂志,2021,31(5):59~64.
成年树鼩睾丸维生素 D 代谢酶 CYP24A1 表达与生育力相关研究
Expression of CYP24A1, a vitamin D metabolic enzyme, in the testes of adult tree shrews and its effect on fertility
投稿时间:2021-02-05  
DOI:10. 3969 / j.issn.1671-7856. 2021. 05. 010
中文关键词:  树鼩  维生素 D 代谢酶  CYP24A1  维生素 D 受体  睾丸
英文关键词:tree shrew  vitamin D metabolizing enzyme  CYP24A1  vitamin D receptor  testis
基金项目:
作者单位E-mail
阮蕾颖 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所, 昆明 650118 rly1116@ 126.com 
施梅言 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所, 昆明 650118  
古文鹏 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所, 昆明 650118  
邱丹丹 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所, 昆明 650118  
陆彩霞 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所, 昆明 650118  
罕园园 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所, 昆明 650118  
王文广 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所, 昆明 650118  
代解杰 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所, 昆明 650118 djj@ imbcams.com.cn 
孙晓梅 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所, 昆明 650118 sxm@ imbcams.com.cn 
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中文摘要:
       目的 研究成年树鼩睾丸中维生素 D 代谢酶和维生素 D 受体的转录水平,检测 CYP24A1 的蛋白表达,探索雄性实验树鼩生殖障碍的原因。 方法 选择 2~ 3 岁雄性树鼩,根据个体繁殖档案分为具有成功生育史的正常组,和无生育史的生殖障碍组,每组各 5 只。 手术摘取一侧睾丸,通过病理学观察其组织病理变化;采用实时荧光定量 PCR 检测睾丸组织中维生素 D 受体、维生素 D 代谢酶 mRNA 水平的变化,以蛋白印迹法检测 CYP24A1 的蛋白表达,同时用免疫荧光观察精子 CYP24A1 表达情况。 结果 正常组与生殖障碍组相比曲细精管排列更紧密,生精细胞更多。与正常组相比,生殖障碍组树鼩睾丸组织 VDR、CYP2R1、CYP27A1 mRNA 水平无明显差异(P> 0. 05),而 CYP24A1 在 mRNA 表达水平和蛋白水平都明显低于正常组(P<0. 05)。同时免疫荧光结果显示正常组睾丸来源的精子在其头部、颈部和中段的 CYP24A1 蛋白高表达,而生殖障碍组表现为低表达或不表达。 结论 CYP24A1 与雄性树鼩成功生育有直接联系,提示 CYP24A1 可以作为判断雄性树鼩生育力的重要指标。
英文摘要:
       Objective To examine transcription levels of vitamin D metabolic enzymes and the vitamin D receptor (VDR) in the testes of adult tree shrews. Specifically, to detect protein expression of cytochrome P450 family 24 subfamily A member 1 (CYP24A1) and investigate causes of reproductive disorders in male tree shrews. Methods Male tree shrews (aged 2 to 3 years) were selected. On the basis of individual records, shrews were divided into a normal group with a successful reproductive history and a reproductive disorder group without a reproductive history; there were five shrews in each group. One side of the testis was surgically removed and histopathological changes were observed by pathology. Real- time fluorescent quantitative PCR was used to detect changes in mRNA levels of VDR and vitamin D metabolizing enzymes in the testis. Protein expression of CYP24A1 was detected by western blotting. Expression of sperm CYP24A1 was detected by immunofluorescence. Results In the normal group, the seminiferous tubules were tightly arranged and there were more spermatogenic cells than in the reproductive disorder group. Compared with the normal group, there was no significant difference in mRNA levels of VDR, CYP2R1, or CYP27A1 in the testes of tree shrews (P> 0. 05). However, mRNA expression levels and protein levels of CYP24A1 were significantly lower than in the normal group (P< 0. 05). At the same time, immunofluorescence showed that sperm from the testis of the normal group had high expression of CYP24A1 in the head, neck, and midpiece, while the reproductive disorder group had low or no expression of CYP24A1. Conclusions CYP24A1 is directly related to successful fecundity of male tree shrews, suggesting that CYP24A1 can be used as an important index to evaluate the fecundity of male tree shrews.
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