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金晶玉,朱成杰,权英实,黄学洙.罗哌卡因通过线粒体通路诱导人结直肠癌 SW620 细胞株凋亡的实验研究[J].中国比较医学杂志,2021,31(8):88~92.
罗哌卡因通过线粒体通路诱导人结直肠癌 SW620 细胞株凋亡的实验研究
Ropivacaine induces apoptosis in a human colorectal cancer SW620 cell line via the mitochondrial pathway
投稿时间:2020-09-07  
DOI:10. 3969 / j.issn.1671-7856. 2021. 08. 013
中文关键词:  结直肠 SW620 细胞株  罗哌卡因  线粒体通路  细胞凋亡
英文关键词:colorectal cancer SW620 cell line  ropivacaine  mitochondrial pathway  apoptosis
基金项目:
作者单位E-mail
金晶玉 延边大学附属医院麻醉科,吉林 延吉 133002 zazhishu718@ 163.com 
朱成杰 延边大学附属医院重症监护科,吉林 延吉 133002 815148415@ qq.com 
权英实 延边大学附属医院麻醉科,吉林 延吉 133002  
黄学洙 延边大学附属医院麻醉科,吉林 延吉 133002  
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中文摘要:
       目的 探究罗哌卡因通过线粒体通路诱导人结直肠癌 SW620 细胞株凋亡的机制。 方法 体外培养人结直肠 SW620 细胞,使用罗哌卡因处理人结直肠 SW620 细胞,采用 CCK-8 实验检测癌细胞活力。将结直肠癌 SW620 细胞分为:结直肠癌细胞组、低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组和高剂量罗哌卡因组;参考 CCK-8 实验结果,分别使用 20,50 和 100 μg / mL 浓度的罗哌卡因处理低、中、高罗哌卡因组的结直肠癌细胞;采用流式细胞仪检测各组细胞线粒体膜电位;使用蛋白质印迹检测凋亡蛋白 Bcl-2,Bax,Caspase-3 和 Caspase-9 表达情况;采用流式细胞仪检测结直肠 SW620 细胞周期及凋亡情况。 结果 CCK-8结果显示随着使用罗哌卡因剂量的增加,人结直肠 SW620 细胞的抑制率显著升高,半数致死浓度约为:69. 36 μg / mL。结直肠癌细胞组细胞凋亡率为(1. 52±0. 11)% 显著低于低、中、高剂量罗哌卡因组[(35. 91±5. 69)%、(46. 27±6. 57)%、(69. 36±8. 01)%;F= 559. 203,P<0. 001]; 相比结直肠癌细胞组,使用罗哌卡因处理各组线粒体膜电位、G2 / M 期细胞比例、S 期细胞比例、Bax 蛋白相对表达水平均显著降低,且呈剂量依赖性(P<0. 001);相比结直肠癌细胞组,使用罗哌卡因处理各组 G0 / G1 期细胞比例、 Bcl-2 蛋白、Caspase-3 蛋白和 Caspase-9 蛋白相对表达水平显著升高,且呈剂量依赖性(P<0. 001)。 结论 罗哌卡因可以通过线粒体途径促进人结直肠 SW620 细胞的凋亡,其作用机制可能与 Caspase-3 及 Bcl-2 信号传导相关。
英文摘要:
       Objective To explore the mechanism of ropivacaine induced apoptosis in a human colorectal cancer (CRC) SW620 cell line via the mitochondrial pathway. Methods Human CRC SW620 cells were cultured in vitro and treated with ropivacaine. The viability of cancer cells was determined by CCK-8 assay. CRC cells were divided into CRC cell, low-dose, medium-dose, and high-dose ropivacaine groups. Referring to the CCK-8 assay result , CRC cells in the low-dose, medium-dose, and high-dose ropivacaine groups were treated with 20, 50, and 100 μg / mL ropivacaine, respectively. The mitochondrial membrane potential (MMP) in each group was detected by flow cytometry. The expression of apoptosis proteins (Bcl-2, Bax, caspase-3, caspase-9) was detected by western blot. The cell cycle and apoptosis of CRC SW620 cells were determined by flow cytometry. Results The CCK-8 assay showed that with an increase in ropivacaine dose, the inhibition rate of human CRC SW620 cells was significantly increased, and the lethal dosage 50 (LC50 ) was approximately 69. 36 μg / mL. The apoptosis rate in the CRC cell group was 1. 52 ± 0. 11%, which was significantly lower than that in the low-dose, medium-dose, and high-dose ropivacaine groups ( 35. 91±5. 69%, 46. 27± 6. 57%, 69. 36±8. 01%, respectively; F= 559. 203, P<0. 001). Compared with the CRC cell group, the MMP, ratio of cells in G2 / M phase, ratio of cells in S phase, and the relative expression level of Bax protein were significantly and dose- dependently decreased in each group treated with ropivacaine (P<0. 001), whereas the ratio of cells in G0 / G1 phase, and the relative expression levels of Bcl-2, caspase-3, and caspase-9 proteins were significantly and dose-dependently increased (P<0. 001). Conclusions Ropivacaine promoted the apoptosis of human CRC SW620 cells via the mitochondrial pathway and the action mechanism may involve signal transduction related to caspase-3 and Bcl-2.
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