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宋 琼,滕夏虹,王丽惠,许倩倩,孙晓婷,邹春林.稳定表达 E-cadherin 的 TW2R 细胞增强人胚胎干细胞生长[J].中国比较医学杂志,2021,31(11):1~8.
稳定表达 E-cadherin 的 TW2R 细胞增强人胚胎干细胞生长
E-cadherin-expressing TW2R feed cells enhance growth of undifferentiated human embryonic stem cells
投稿时间:2020-12-28  
DOI:10. 3969 / j.issn.1671-7856. 2021. 11. 001
中文关键词:  人胚胎干细胞  人源饲养层细胞  E-钙黏素
英文关键词:human embryonic stem cell  human feeder cell line  E-cadherin
基金项目:
作者单位E-mail
宋 琼 1.广西医科大学转化医学研究中心,广西医科大学基础医学院,南宁 530021
2.长寿与老年相关疾病教育部重点实验室,南宁 530021 
songqem@ 163.com 
滕夏虹 广西医科大学国际教育学院,南宁 530021  
王丽惠 1.广西医科大学转化医学研究中心,广西医科大学基础医学院,南宁 530021
2.长寿与老年相关疾病教育部重点实验室,南宁 530021 
 
许倩倩 1.广西医科大学转化医学研究中心,广西医科大学基础医学院,南宁 530021
2.长寿与老年相关疾病教育部重点实验室,南宁 530021 
 
孙晓婷 1.广西医科大学转化医学研究中心,广西医科大学基础医学院,南宁 530021
2.长寿与老年相关疾病教育部重点实验室,南宁 530021 
 
邹春林 1.广西医科大学转化医学研究中心,广西医科大学基础医学院,南宁 530021
2.长寿与老年相关疾病教育部重点实验室,南宁 530021 
zouchunlin@ sohu.com 
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中文摘要:
       目的 构建一种可高效支持人胚胎干细胞生长的人源饲养层细胞系。 方法 首先通过在 TW2R 细胞系稳定表达人 E-钙黏素(E-cadherin)基因构建永生化人源饲养层细胞系 TWE3R,并比较人胚胎干细胞在 TWE3R 及其亲本细胞上的克隆形成数。 将 H9 人胚胎干细胞在 TWE3R 细胞上经过 10 代连续传代培养后,进行人胚胎干细胞特异性标志物分析、拟胚体形成分析和畸胎瘤形成检测等实验。 结果 本研究成功构建了永生化的人源饲养层细胞系 TWE3R,TWE3R 细胞可比其亲本细胞更高效地支持人胚胎干细胞生长,并且 TWE3R 饲养层细胞还具有支持低密度接种条件下(每平方厘米 5 个)人胚胎干细胞生长的特性。 此外,H9 人胚胎干细胞在 TWE3R 细胞上长期传代培养后,仍可保持所有人胚胎干细胞的未分化特性、正常细胞核型以及在体内外均可分化形成所有 3 个胚层衍生物的潜能。 结论 本研究所建立的永生化人源饲养层细胞系 TWE3R 具有高效支持胚胎干细胞生长的特性。
英文摘要:
       Objective To establish an immortalized human feeder cell line that efficiently supports the growth of undifferentiated human embryonic stem ( hES) cells. Methods The immortalized TWE3R cell line was established by stably expressing the human E-cadherin gene in the TW2R cell line. The numbers of hESC colonies on TWE3R feeder cells were compared with those on its parental cell lines. After H9 hES cells were cultured on TWE3R cells for 10 consecutive passages, pluripotency marker analysis, embryoid body ( EB) formation assays and teratoma formation assays were conducted. Results We succeeded in establishing the TWE3R human feeder cell line that showed higher efficiency to support the growth of hES cells than its parental cell line. TWE3R feeder cells supported the growth of H9 ESCs at low density ( 5 cells/ cm2). Additionally, after long-term culture on TWE3R feeders, H9 ESCs retained all undifferentiated characteristics, a normal karyotype and the potential to differentiate into derivatives of all three embryonic germ layers. Conclusions The immortalized TWE3R human feeder cell line is capable of supporting efficient growth of human ESCs.
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