目的 寻求一种简单有效的分离培养大鼠触须毛囊上皮细胞的方法。方法 将含有大鼠触须毛囊的颊侧组织剪去全层皮肤后拔出毛囊，在37℃缓慢搅拌（100r／min）的条件下加入0．2％胶原酶Ⅰ消化3h，然后经800目筛网过滤，收集带有毛囊上皮鞘的毛干，在25℃用0．1％的胰酶消化10min，最后收集消化后的上皮细胞进行培养，并检测角蛋白K19的表达。结果 两步酶消化法分离毛囊上皮细胞能显著降低工作强度、减少污染机会，极大提高了毛囊上皮细胞的分离效率。结论 两步酶消化法是一种简单有效的分离培养大鼠触须毛囊上皮细胞的方法。