孙敏,涂新明,魏强,丛喆,蒋虹,佟巍,陈颂,赖春晖,于浩,秦川
R373-33
中国CIPRA NIH项目
SUN Min,TU Xin-ming,WEI Qiang,CONG Zhe,JIANG Hong,TONG Wei,CHEN Song,LAI Chun-hui,YU Hao,QIN Chuan
目的建立SIVp27杂交瘤细胞株,并对其分泌的SIVp27单克隆抗体进行初步鉴定。方法使用基因重组的SIVp27蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术使用半固体培养基法建立杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体。通过染色体核型对杂交瘤细胞株进行鉴定;采用Western blot、免疫荧光法、酶联免疫吸附法确定单克隆抗体的交叉反应性、相对亲和力、抗原识别表位、免疫球蛋白的类型和亚类。对单克隆抗体进行鉴定。结果获得4株可稳定分泌SIVp27单克隆抗体的杂交瘤细胞,IC3、286为IgG1类,2E12为IgG2b类,3G3为IgG2a类。4株单抗均能识别SIV的p27蛋白,与逆转录病毒SRV、STLV无交叉反应,286、2E12与H1Vp24有交叉反应。免疫荧光法检测腹水效价为1:10240~1:40960。1C3、286、2E12、3G3染色体平均数分别为103、97、96、101。2E12与3G3识别不同的抗原表位。结论成功地制备出4株SIVp27单克隆抗体,均具有良好的特异性和亲和力,为进一步建立免疫分析方法,进行SIV/SAIDS及其艾滋病相关研究,奠定了基础。
孙敏,涂新明,魏强,丛喆,蒋虹,佟巍,陈颂,赖春晖,于浩,秦川. SIV p27单克隆抗体的制备和鉴定[J].中国比较医学杂志,2006,(1):29~33,F0003.