目的探讨剑尾鱼肝细胞原代培养的方法。方法分别用机械分散法、酶消化法对肝细胞进行分离,并比较在William’s E(Williams’Medium E)、DMEM、DMEM/F12无血清培养基中肝细胞的生长效果。结果⑴组织块培养法(机械分散法)的肝细胞在William’s E、DMEM、DMEM/F12无血清培养基中,温度25℃~28℃,pH 7.3左右时都可以短期正常生长,而生长效果好依次是William’s E、DMEM、DMEM/F12无血清培养基。⑵酶消化法分离的肝细胞的产量为(6.4±1.7)×106 cell/g肝组织,即时存活率为(85±6)%。24 h贴壁率不足20%。结论酶消化法培养肝细胞产量、即时存活率及贴壁率偏低。组织块培养法肝细胞生长良好,而不需要苛刻的条件,可以满足毒理学实验要求。培养肝细胞首选William’s E培养基。