本研究采用转基因技术中最常用的受精卵原核显微注射法，制备角质细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠。我们将经过超排处理的供体雌鼠拉颈处死，从其输卵管壶腹部取出卵丘细胞团，用透明质酸酶消化、清洗，得到形态饱满、极体和双原核明显的受精卵培养。将构建好的包括角质细胞特异性角质素5（K5）启动子、Cre重组酶基因和人生长激素（hGH）polyA的转基因载体pK5-Cre-hGH制备成一定浓度的注射片段，通过显微注射的方法将4．2kb的转基因片段引入小鼠受精卵的雄原核。共注射了720枚受精卵，移植至29只假孕母鼠的输卵管中发育，获得子代小鼠48只，经PCR鉴定有12只小鼠在基因组上整合有Cre基因，整合率为25％。此结果通过Southern杂交得到进一步证实。