犬细小病毒VP2基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达
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R-33

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Cloning of VP2 Gene of Canine Parvovirus and Expression in Pichia pastoris
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    目的表达犬细小病毒VP2蛋白(CPV VP2),用于犬细小病毒病的诊断、疫苗研制和VP2蛋白功能研究。方法采用PCR方法对CPV VP2基因进行扩增,将CPV VP2基因克隆到毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达载体pPICZαA中,构建真核重组表达载体pPICZαA-VP2,将该重组质粒线性化后,转化毕赤酵母菌GS115中,在甲醇诱导下表达CPV VP2,SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达蛋白。结果成功扩增了CPV VP2基因,构建了真核重组表达载体pPICZαA-VP2在毕赤酵母菌中表达出约64.35 kD蛋白。Western blotting鉴定表明,表达VP2蛋白与犬细小病毒阳性血清有反应性。结论在毕赤酵母中成功地表达了CPV VP2蛋白,能被犬细小病毒阳性血清识别。

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张云霞,丁银巧,赵铁柱,杨璐,孙明,曹振,王传彬,陈西钊,田克恭.犬细小病毒VP2基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达[J].中国比较医学杂志,2007,17(12):693~696,701.

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  • 收稿日期:2007-09-06
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