目的：构建HLA—DRα和HLA—DRB1^＊0405真核表达载体，并使其在哺乳动物细胞内得到表达。方法：从含HLA—DRα全长cDNA的质粒中扩增HLA—DRα的ORF序列，通过酶切将载体pIRES2-EGFP中的EGFP切除，将HLA—DRα ORF插入到载体中；采用RT-PCR方法从HLA—DRB1^＊0405阳性人外周血单个核细胞中克隆出HLA—DRB1^＊0405 ORF序列，将其插入pIRES2-DRα载体的多克隆位点处，构建出真核表达载体pIRES2-DRαβ1^＊0405。对构建的载体进行限制性内切酶鉴定和测序。采用脂质体转染方法将表达载体转入小鼠成纤维细胞系DAP2．3中，通过流式细胞术和间接免疫荧光法对HLA—DRα和HLA—DRB1^＊0405的表达进行检测。结果：酶切鉴定和测序证实目的基因插入正确且序列与GenBank一致。流式细胞术检测约41．41％的转pIRES2-HLA—DRαβ1^＊0405载体的细胞呈阳性，间接免疫荧光显示HLA—DRα和HLA—DRB1^＊0405在转基因细胞中得到表达并形成完整的HLA—DR4分子，表达于胞膜及胞质内。结论成功构建出真核表达载体pIES2一DRαβ1^＊0405，并在小鼠成纤维细胞系中得到表达，为下一步进行稳定细胞系的建立和转基因鼠模型的构建奠定了基础。