目的 探讨4℃保存的条件下,苯甲基磺酰氟(ph enylmethylsulfonyl fluoride, PMSF)对犬精子的保护作用. 方法犬精子以含不同浓度PMSF的Tris-卵黄液(Tris-egg yolk, EYT)处理后,于4℃低温保存,在24、48、72、96 h分别以伊红、瑞-吉和吖啶橙染色检测精子活率、顶体膜和DNA完整性. 结果低温保存24 h后,吖啶橙染色检测DNA断裂率(%): 对照组 (5.93±0.32),实验组:20 μg/mL (4.50±0.38)、40 μg/mL (4.20±0.25)、80 μg/m L(4.21±0.46)、160 μg/mL (3.87±0.67),P<0.05 ;各浓度组之间没有明显差异;72 h后,犬精子活率仍>30%;96 h内,对照组和实验组犬精子在活率、顶体膜完整性上未见明显差异.结论 PMSF于 4℃低温保存条件下对犬精子具有保护作用, 24 h内能有效保护精子DNA双链的完整性,4 ℃低温保存72 h后,犬精子仍符合人工授精要求.