朱亮,蔡月琴,屠珏,应华忠,徐剑钦,陈民利
R394
浙江省科技厅实验动物公共服务平台项目?
ZHU Liang,CAI Yue-qin,TU Jue,YING Hua-zhong,XU Jian-qin,CHEN Min-li
目的 直接从实验豚鼠基因组DNA中筛选获得微卫星分子标记.方法 应用磁珠和生物素标记的微卫星探针与豚鼠基因组酶切片段杂交,捕获200 ~ 1000 bp含有微卫星序列的DNA片段,连接到pMD-18V载体中,转化到感受态细胞E. coli DH5α中构建富集微卫星序列的小片段插入文库.然后用PCR法进行筛选.结果 从约2000个转化子中获得240个阳性克隆.对其中98个进行了测序,并成功设计豚鼠微卫星引物17对.结论 经过优化的磁珠富集法能够稳定、高效地获得豚鼠微卫星标记.本研究获得的微卫星位点将成为豚鼠遗传学研究的有力工具.
朱亮,蔡月琴,屠珏,应华忠,徐剑钦,陈民利.磁珠富集法筛选实验豚鼠微卫星分子标记[J].中国比较医学杂志,2010,(6):29~34.