目的 建立滇南小耳猪精液冷冻保存方法,加速云南省特有小型猪种的小型化选育.方法 利用脉冲电刺激模式诱导公猪输精管自助收缩排精.利用直接冷冻新技术(DFM)研究不同冷冻方案对精子的运动度、精子顶体完整性和体内授精胚胎发育能力的影响.结果 在直接冷冻方法中,3%甘油防冻剂的作用下,60 s植冰时间和1.5 mm/s的冷冻降温参数对精子运动度保护良好,精子运动复苏率达到61.7%.但是,3%乙二醇虽然与甘油一样对精子的顶体完整性都有很好的保护作用,对精子运动度保护能力较差.此外, 3%甘油、60 s植冰、1.5 mm/s冷冻速度的直接冷冻的冻精解冻,移植到超数排卵的母猪子宫颈口实施人工授精,获得卵的受精和胚胎发育潜能尚可.结论 玻璃管直接冷冻可以完成滇南小耳猪精子的冷冻保存.