生长相关蛋白GAP-43多肽抗体的制备
中图分类号:

R651

基金项目:

国家"十一五"863计划"疫苗与抗体工程",首都医学发展科研基金,北京市卫生系统高层次卫生技术人才计划资助项目?


Preparation of Growth Associated Proteins-43(GAP-43)Polyclone Antibody
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    目的对生长相关蛋白-43(growth associated proteins-43,GAP-43)进行抗原表位分析并制备兔多克隆抗体。方法通过对GAP-43 cDNA序列及氨基酸序列的结构进行生物信息分析,依据蛋白质的二级结构、亲水性、疏水性、抗原性及理化特性,经过同源性检索后,综合考虑抗体设计的其他因素,选出具有免疫活性的抗原决定簇多肽片段,采用有机固相多肽合成法合成了GAP-43的多肽片段,并与载体蛋白血蓝蛋白(KLH)偶联制备成抗原,免疫新西兰家兔。结果 ELISA测定GAP-43抗体效价为1∶32 000;Western blot检测结果显示:在分子量25kDa出现单一条带;免疫组织化学法检测显示:GAP-43蛋白在小鼠海马神经元中有表达;免疫细胞化学法检测显示:GAP-43蛋白在人神经母细胞瘤株SH-SY5Y中存在表达。结论利用生物信息学软件比较准确地预测GAP-43的抗原决定簇,并成功制备了高效价、高特异性的多肽抗体。

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引用本文

姬志娟,盛树力,王蓉,赵志炜,张景艳,孟祥宏,张旭.生长相关蛋白GAP-43多肽抗体的制备[J].中国比较医学杂志,2010,(8):22~25,80.

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