血栓通胶囊对氧糖剥夺/ 复氧致HUVEC 细胞紧密连接损伤的改善作用
作者:
作者单位:

(1. 北京中医药大学,北京 100029; 2. 哈尔滨珍宝制药有限公司,哈尔滨 150060)

中图分类号:

R-33

基金项目:

国家自然基金(81503287);北京市自然基金(7144222)


Xueshuantong capsule alleviates oxygen-glucose deprivation / reoxygenation-induced tight junction damage of HUVEC cells
Author:
Affiliation:

(1. Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China; 2. Harbin Zhenbao Pharmaceutical Co. Ltd. ,Harbin 150060)

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    摘要:

    目的 采用氧糖剥夺(OGD)致HUVEC 细胞损伤模型,考察三七总皂苷(PNS)及其单体Rg1?Rb1对氧糖剥夺致血管内皮紧密连接损伤的保护作用?方法 HUVEC 细胞接种于Transwell 细胞小室,待细胞融合后,设立实验组别:正常对照组?模型组?PNS 10?20?40 mg/ L 组以及Rb1 13.52 mg/ L?Rg1 12.44 mg/ L 组,于缺氧同时进行药物干预,氧糖剥夺6 h 复氧24 h 后,检测HUVEC 内皮细胞电阻值以及内皮渗透性的变化;采用激光共聚焦显微镜,免疫荧光法检测HUVEC 细胞ZO-1?claudin-5 蛋白表达的变化?结果 与正常对照组相比,HUVEC 细胞缺氧6 h 复氧24 h 后内皮细胞间紧密连接电阻显著降低,细胞渗透性显著升高(P < 0.05)?PNS 20?40 mg/ L 组能够显著抑制模型组紧密连接电阻的降低,抑制HUVEC 细胞渗透性的升高(P < 0.05)?人参皂苷Rb1 能够显著升高OGD 6 h 复氧24 h 后内皮紧密连接电阻,降低HUVEC 细胞渗透性(P < 0.05)?免疫荧光检测结果显示,正常对照组HUVEC 细胞的ZO-1 及claudin-5 蛋白主要分布于细胞膜周围,排列连续,显示出内皮细胞的典型铺路石排列?缺氧6 h 复氧24 h 损伤后,模型组细胞边缘的紧密连接蛋白显著减少,环形结构断裂,甚至消失,细胞核内紧密连接蛋白呈增加趋势?PNS 20?40 mg/ L 及Rb1 13.52 mg/ L 可观察到细胞间紧密连接局部恢复,呈铺路石样结构?结论 PNS 对缺血致血管内皮细胞间紧密连接损伤有保护作用?

    Abstract:

    Objective To study the protective effect of Panax notoginseng saponins (PNS) and its components Rg1 and Rb1 on oxygen-glucose deprivation/ reoxygenation ( OGD/ Reox)-induced tight junction damage. Methods Anaerobic box were used to induce OGD in HUVEC cells for 6 h followed by reoxygenation for 24 h. Transepithelial/endothelial electrical resistance (TEER) and cell permeability were detected, immunefluorescence was used to observe the ZO-1 and claudin-5 protein expression. Results PNS 20, 40 mg/ L and ginsenoside Rb1 significantly inhibited the OGD/Reox-induced decreased tight junction resistance, and the increased cell permeability (P < 0.05). PNS 20, 40 mg/ L and ginsenoside Rb1 partly restored the inter-cellular tight junctions which were regularly arranged on the cell membrane, and the cells displayed cobble stone-like arrangement. Conclusions PNS ameliorates ischemia-induced vascular endothelial cell tight junction damage via MMP-9 and VEGF/ VEGFR2 signaling pathway. Rb1 is one of the effective monomer components.

    参考文献
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    引证文献
引用本文

杨爱玲,武汀,张天睿,韩冰,孙建宁,张硕峰.血栓通胶囊对氧糖剥夺/ 复氧致HUVEC 细胞紧密连接损伤的改善作用[J].中国比较医学杂志,2018,28(2):7~11.

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  • 收稿日期:2017-08-01
  • 在线发布日期: 2018-03-14
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