树鼩副粘病毒(TPMV)PCR 方法的建立及初步应用

doi:10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 05. 018

首页 > 过刊浏览>2018年第28卷第5期 >100-104. DOI:10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 05. 018

树鼩副粘病毒(TPMV)PCR 方法的建立及初步应用
DOI:
                        10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 05. 018
                    
作者:
                        王淑菁王淑菁
中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所,国家实验动物质量检测中心, 北京 100050
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付瑞付瑞
中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所,国家实验动物质量检测中心, 北京 100050
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李晓波李晓波
中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所,国家实验动物质量检测中心, 北京 100050
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王吉王吉
中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所,国家实验动物质量检测中心, 北京 100050
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贺争鸣贺争鸣
中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所,国家实验动物质量检测中心, 北京 100050
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岳秉飞岳秉飞
中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所,国家实验动物质量检测中心, 北京 100050
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作者单位:(中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所,国家实验动物质量检测中心, 北京 100050)
作者简介:
通讯作者:
中图分类号:R-33
基金项目:

Establishment and application of a PCR detection method for Tupaia (tree shrew) paramyxovirus (TPMV)

Author:

WANG Shujing
WANG Shujing
Institute for Laboratory Animal Resources, National Institute for Food and Drug Control; National Center for Monitoring of Laboratory Animal Health, Beijing 100050, China
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FU Rui
FU Rui
Institute for Laboratory Animal Resources, National Institute for Food and Drug Control; National Center for Monitoring of Laboratory Animal Health, Beijing 100050, China
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LI Xiaobo
LI Xiaobo
Institute for Laboratory Animal Resources, National Institute for Food and Drug Control; National Center for Monitoring of Laboratory Animal Health, Beijing 100050, China
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WANG Ji
WANG Ji
Institute for Laboratory Animal Resources, National Institute for Food and Drug Control; National Center for Monitoring of Laboratory Animal Health, Beijing 100050, China
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HE Zhengming
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Institute for Laboratory Animal Resources, National Institute for Food and Drug Control; National Center for Monitoring of Laboratory Animal Health, Beijing 100050, China
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YUE Bingfei
YUE Bingfei
Institute for Laboratory Animal Resources, National Institute for Food and Drug Control; National Center for Monitoring of Laboratory Animal Health, Beijing 100050, China
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Affiliation:

(Institute for Laboratory Animal Resources, National Institute for Food and Drug Control; National Center for Monitoring of Laboratory Animal Health, Beijing 100050, China)

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摘要:

目的建立树鼩副粘病毒(Tupaia paramyxovirus,TPMV)PCR 检测方法,并进行初步应用?方法根据NCBI 公布的TPMV 基因组序列,选择8231 bp ~8720 bp 区域人工合成一段DNA 序列并转入质粒中,作为阳性标准质粒?根据TPMV 保守区域设计一对特异性引物,考察方法的特异性和灵敏度,并应用于60 份树鼩呼吸道咽拭子cDNA 及12 份树鼩肺组织cDNA 的检测中?结果所建立的PCR 检测方法特异性好,灵敏度高,可达11.5 × 10 ^-5 μg/ mL?60 份树鼩呼吸道咽拭子cDNA 及12 份树鼩肺组织cDNA 检测均为阴性?结论建立的树鼩副粘病毒PCR 检测方法特异性强,灵敏度高,可用于树鼩副粘病毒的常规检测中?

关键词:树鼩;副粘病毒;PCR;检测

Abstract:

Objective To establish and preliminarily apply an effective PCR assay for detection of Tupaia (tree shrew) paramyxovirus (TPMV). Methods Using TPMV genomic DNA from NCBI GenBank, bases 8231 to 8720 were synthesized and inserted into a plasmid as a positive standard. One primer pair was designed based on this sequence. In total, 60 respiratory swabs and 12 lung tissues from the tree shrews were tested in this PCR assay. Results A PCR method for detection of TPMV was successfully established, with high specificity and sensitivity of 11.5 × 10 ^-5 μg/ mL. PCR result testing 60 respiratory swabs and 12 lung tissues were negative. Conclusions PCR for detecting TPMV has good specificity and high sensitivity and can be used for conventional tree shrew paramyxovirus detection.

Key words:Tupaia(tree shrew); paramyxovirus; PCR; detection

引用本文

王淑菁,付瑞,李晓波,王吉,贺争鸣,岳秉飞.树鼩副粘病毒(TPMV)PCR 方法的建立及初步应用[J].中国比较医学杂志,2018,28(5):100~104.

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收稿日期:2017-10-31
最后修改日期:
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在线发布日期: 2018-06-26
出版日期:

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