摘要: 目的 建立鼠痘病毒(ECTV)的 TaqMan 探针法荧光定量 PCR 检测方法,并对实验室保存的裸鼹鼠组织样本、小鼠组织样本以及黄鼠组织样本进行检测。 方法 根据 GenBank 中鼠痘病毒的 crmD 基因序列设计引物探针,建立 ECTV 的 FQ-PCR 检测方法,对保存的样本进行筛查,并对部分阳性样本进行测序鉴定。 结果 建立的 ECTV FQ-PCR 检测方法灵敏度高、特异性强,最低能检测到 ECTV 核酸浓度为 10 copies/ μL 的样本,方法的标准曲线相关参数符合标准。 使用该方法检测实验室 63 份裸鼹鼠脾组织样本和 22 份小鼠脾组织样本,结果全为阴性,检测 4 只黄鼠组织样本,结果阳性率为 50%。 阳性样本进行 PCR 检测后测序比对为 ECTV 核酸序列。 结论 经验证,建立的 ECTV FQ-PCR 检测方法能够灵敏特异的对样本中的 ECTV 进行筛查,实验室小鼠的日常监测不应忽视 ECTV 污染的潜在风险。