摘要: 目的 探讨 mmu-miR-672-5p 调控大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞凋亡的分子机制。 方法 过表达或敲低 mmu-miR-672-5p 后,检测大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平。 过表达或敲低 mmu-miR-672-5p 后,通过 RNA-seq 检测 mmu-miR-672-5p 调控的基因。 设定阈值后,通过 siRNA 敲低相关基因后,检测大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平。 通过荧光素酶报告实验验证 mmu-miR-672-5p 是否靶向此基因。 过表达此基因后,通过免疫印迹检测 CLEAVED-CAS3 的表达水平,以及大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平。 结果 过表达 mmu-miR- 672-5p 后,大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平下降(P<0. 05);敲低 mmu-miR-672-5p 后,大鼠胎盘绒毛膜滋养 层细胞的凋亡水平上升(P<0. 05)。 分别敲低和过表达 mmu-miR-672-5p 后,高通量测序发现大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞中多种基因的表达被调节,包括 Zfp229、Zfp503、 Slc4a5、 Stk24、Tmem106b、Bax、Adgrb3、Tmem63b、Pmp22、 Mroh2a、Dsn1、Pramef25、Naaladl2、Clk2、Stx16、Usp28、Clint1、Jph4、Msl2、Krtap8-1、Pkp2、Mllt3、Rai14。 敲低上述基因后,发现仅敲低 Bax 时,大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平下降(P<0. 05)。 过表达 Bax 后,CLEAVED-CAS3 的表达水平上升,大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平上升(P<0. 05)。 过表达 mmu-miR-672-5p 后,Bax 的 mRNA 和蛋白水平均下降(P<0. 05);敲低 mmu-miR-672-5p 后,Bax 的 mRNA 和蛋白水平均上升(P<0. 05)。 此外,mmu- miR-672-5p 靶向 Bax 的 3 端非编码区(P<0. 05)。 同时过表达 mmu-miR-672-5p 和 Bax 后,大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平无显著变化(P>0. 05);同时敲低 mmu-miR-672-5p 和 Bax 后,发现大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋 亡水平无显著变化(P>0. 05)。 结论 mmu-miR-672-5p 通过靶向 Bax 的 3 端非编码区,降低了 Bax 的表达水平,随后抑制了大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡。