摘要: 目的研 究 《外科正宗》中回毒银花散对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 ( methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的抑菌能力以及毒力因子 α-溶血素(α-hemolysin,Hla)活性和生物被膜形成的抑制作用,同时探究回毒银花 散 最佳配比为古方新用提供实验支撑。 方法通过最低抑菌浓度 ( minimum inhibitory concentration,MIC) 、最低杀菌浓度( minimum bactericidal concentration,MBC) 、纸片扩散法(K-B 法)分析回毒银花散及组方中各味药对 MRSA 菌株 USA300 的抑制效果,溶血实验、Hla 中和实验、Hla 寡聚实验、免疫印记 ( Western blot)实验验证药物以何种形式抑制毒力因子 Hla 的活性,生物被膜形成实验评价回毒银花散对生物被膜的抑制效果,最后正交实验探究回毒银花散的最佳配比。 结果 回毒银花散抑制 MRSA 菌株,MIC90 为 64 mg / mL,MBC 为256 mg / mL,抑菌圈直径为(7. 50±0. 50) mm。 回毒银花散还通过抑制 Hla 的释放抑制 Hla 的活性,最小有效浓度( minimum effective concentration,MEC)为 16 mg / mL,抑制生物被膜形成的 MEC 为 8 mg / mL。 回毒银花散中金银花、黄芪只影响 MRSA 溶血活性以及生物被膜形成但不抑制细菌的生长,两药溶血活性 MEC 以及生物被膜形成MEC 均为 32 mg / mL;甘草抑菌能力较强,MIC90 为 8 mg / mL,生物被膜 MEC 为 1 mg / mL,在亚抑菌浓度下未表现出抑制溶血活性。 最后正交实验显示,当回毒银花散中金银花、黄芪、甘草比例为 1 ∶ 2 ∶ 4 时,MIC90 为 16 mg / mL,溶血活性 MEC 为 8 mg / mL,生物膜形成 MEC 为 4 mg / mL,均为 9 组中最低。 结论 回毒银花散在亚抑菌浓度下可影响 MRSA 的溶血活性以及生物被膜形成,其中金银花、黄芪、甘草的最佳比例为 1 ∶ 2 ∶ 4。