摘要: 目的 探索 ZBTB20 对大鼠肝星状细胞系 HSC-T6 细胞增殖和迁移的影响,为肝纤维化(HF)的治疗提供实验依据。 方法 利用 GEO 数据库分析 ZBTB20 在正常人和 HF 患者肝组织中的表达水平。 将10 只 SD 大鼠随机分为假手术(Sham)组和胆总管结扎模型(BDL)组,建立胆汁淤积性 HF 模型,通过 Western blot 实验检测大鼠肝组织中 ZBTB20 的表达水平。 通过 Western blot 实验检测 TGF-β1 刺激 48 h 后 HSC-T6 细胞中 ZBTB20 的表达水平以及纤维化标志物的表达水平;通过 RT-qPCR、Western blot 实验检测 ZBTB20 小干扰 RNA(si-ZBTB20)及过表达质粒(pcDNA3. 1-ZBTB20)的转染效率,以及 si-ZBTB20 组和 pcDNA3. 1-ZBTB20组 HSC-T6 细胞中纤维化标志物的表达水平; 通过 CCK-8、 集落形成和 Transwell 实验检测 si-ZBTB20 /pcDNA3. 1-ZBTB20 对 HSC-T6 细胞增殖、克隆形成及迁移能力的影响。 结果 ZBTB20 在 HF 患者肝组织中显著高表达。 与 Sham 组相比,BDL 组 ZBTB20 的蛋白表达水平上调,差异具有统计学意义(P<0. 05)。 与对照(control)组相比,TGF-β1 组 HSC-T6 细胞中 α-SMA、Col1A1、ZBTB20 蛋白的表达水平均显著上调,差异具有统计学意义( P<0. 05)。 RT-qPCR、Western blot 实验结果表明,与转染 si-NC 组相比,转染 si-ZBTB20 组的ZBTB20、α-SMA、Col1A1 和 CTGF mRNA 表达水平下调,ZBTB20、α-SMA 和 Col1A1 蛋白的表达水平下调(P<0. 05);与转染 pcDNA3. 1 组相比,转染 pcDNA3. 1-ZBTB20 组得到了与上述相反的结果。 CCK-8、集落形成、Transwell 实验结果表明,与转染 si-NC 组相比,转染 si-ZBTB20 组的细胞在转染 72、96 h 后,其增殖能力显著下降,细胞集落个数显著减少,且穿过 Transwell 小室基底膜的细胞数目显著降低(P<0. 05);与转染 pcDNA-3. 1组相比,转染 pcDNA3. 1-ZBTB20 组的细胞在转染 72、96 h 后其增殖能力显著升高,细胞集落个数显著增加,且穿过 Transwell 小室基底膜的细胞数目显著增加(P<0. 05)。 结论 ZBTB20 在 HF 患者肝组织中显著高表达。BDL 大鼠肝组织中 ZBTB20 表达水平升高,抑制 ZBTB20 能够抑制 HSC-T6 细胞增殖及迁移能力,过表达ZBTB20 能够促进 HSC-T6 细胞增殖及迁移能力。