猴免疫缺陷病毒衣壳蛋白p27在大肠杆菌中的表达及纯化
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国家科技攻关计划


Expression and purification of SIV capsid p27 in E.coli
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The National Key Technologies R&D Program of China

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    目的 获得用于SIV检测的衣壳蛋白p27重组抗原。 方法 利用生物信息学软件选择衣壳蛋白p27抗原表位集中的区域,合成SIV p27基因;将该基因与pMAL-p5x载体连接构建pMAL-p5x -p27重组质粒,并转化大肠杆菌BL21中,诱导表达;用Amylose Resin亲和层析柱对表达产物进行纯化。 结果 SDS-PAGE分析显示,pMAL-p5x-p27重组质粒可在大肠杆菌中高效表达,表达产物分子量约为70×103Da ;经纯化获得目的蛋白p27纯度可达90%。结论 本研究利用原核表达系统成功表达了SIV p27蛋白,为SIV检测方法的建立奠定了基础。

    关键词:SIV;p27;表达;纯化
    Abstract:

    Objective To obtain capsid p27 of SIV for detecting . Methods The p27 gene of SIV was synthesized and inserted into pMAL-p5x vector to construct pMAL-p5x-p27 recombinant plasmid.And then the recombinant plasmid was transformed into E.coli BL21 to express protein and the express product was purified by Amylose Resin maltose-binding protein affinity column. Results SDS-PAGE analysis indicated that pMAL-p5x-p27 can be expressed in E.coli BL21 and the protein molecular weight was about 70×103Da; The final p27 protein purification could reach 90%. Conclusion p27 of SIV was successfully expressed in E.coli,which lays a foudation for developing the methods of detecting SIV antibody.

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引用本文

李敏.猴免疫缺陷病毒衣壳蛋白p27在大肠杆菌中的表达及纯化[J].中国比较医学杂志,2013,23(1).

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  • 收稿日期:2012-12-04
  • 最后修改日期:2012-12-19
  • 录用日期:2012-12-27
  • 在线发布日期: 2013-03-21
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