2020, 30(5):1-6.DOI: 10. 3969 / j.issn.1671-7856. 2020. 05. 001
摘要:目的 探讨汉防己甲素对斑马鱼胚胎早期发育及多药耐药基因 abcb4 表达的影响及其机制。 方法 通过药物毒性实验分析汉防己甲素药液处理后斑马鱼胚胎的死亡率、孵化率、心率和畸形率情况。取斑马鱼胚胎设置分组:空白对照组、阿霉素药液处理组、长春碱药液处理组、汉防己甲素药液处理组、汉防己甲素和阿霉素混合药液处理组及汉防己甲素和长春碱混合药液处理组,每组胚胎用药液处理至第 5 天后取 50 尾用于实验。通过实时荧光定量 PCR 检测 abcb4 基因的表达情况,罗丹明 123 实验检测胚胎的外排功能,分析耐药程度。 结果 低剂量汉防己甲素对斑马鱼胚胎毒性较低,高剂量汉防己甲素对胚胎孵化有抑制作用,并有致畸致死作用;实时荧光定量 PCR 结果显示,与对照组相比 abcb4 基因的 mRNA 在阿霉素和长春碱药液单独使用时表达增高,而在汉防己甲素联合阿霉素、长春碱使用时表达降低;罗丹明 123 实验结果显示,阿霉素和长春碱单独使用时斑马鱼体内产生耐药,而汉防己甲素联合阿霉素、长春碱使用时耐药程度降低。 结论 汉防己甲素对斑马鱼胚胎毒性较低,且汉防己甲素能逆转物阿霉素和长春碱的耐药作用,对提高治疗效果有重要意义。
2019, 29(5):84-89.DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2019. 05. 013
摘要:目的 评估红系祖细胞在先天原始造血缺陷cloche-/ - 突变体斑马鱼体内的移植效果?方法 收集绿色荧光标记红系祖细胞的转基因系zTg(gata1:EGFP)斑马鱼胚胎,制备成单细胞悬液,经流式细胞仪分选出携带绿色荧光的gata1+细胞,利用显微注射技术将gata1+细胞移植到42hpf 的cloche-/ - 突变体斑马鱼心脏中,采用体视荧光显微镜追踪观察移植后的红系祖细胞在cloche-/ -突变体斑马鱼中的表达情况?结果 成功分选出携带绿色荧光的gata1+细胞,并在移植后2 h 可观察到携带绿色荧光的gata1+细胞逐渐增殖扩散且16 h 持续有绿色荧光表达?结论 红系祖细胞有重建造血的潜力,为进一步研究红系祖细胞移植后的功能鉴定提供实验依据?