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    • 葛根素通过ERK1/ 2 和p38 MAPK 信号通路刺激成骨分化和骨形成的机制

      2019, 29(2):78-83.DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2019. 02. 013

      关键词:葛根素信号通路骨分化骨形成
      摘要 (3306)HTML (0)PDF 1.32 M (3232)收藏

      摘要:目的 探究葛根素通过ERK1/2 和p38 MAPK 信号通路刺激成骨分化和骨形成的机制?方法 分离培养成人成骨细胞(MC3T3-E1),运用MTT 法对比加入不同浓度葛根素后细胞增殖能力和对生长曲线的影响?通过测定碱性磷酸酶活性检测葛根素对成骨细胞分化的影响?通过测定钙沉积量分析葛根素对骨形成的影响?通过ERKl/2 阻断剂PD8089,p38 抑制剂SB203580 的加入分析ERK1/2 和p38 MAPK 信号通路刺激成骨分化和骨形成的机制?利用蛋白质免疫印迹(WB)检测细胞骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)的表达?结果 不同浓度葛根素干预成骨细胞,可以不同程度上促进其增殖,1 μmol/ L 葛根素组效果最明显?第1 天和第3 天较空白组增殖趋势不明显,第5 天和第7 天较空白组有明显差异?葛根素可以激活碱性磷酸酶活性,初级成骨细胞分化?葛根素可以促进钙的沉积,刺激骨形成?使用ERK1/2 阻断剂PD8089 后,或用抑制剂SB203580阻断p38 MAPK 信号通路后,细胞增殖?碱性磷酸酶含量以及钙沉积量均较葛根素组有所下降?葛根素组(T group)BMP-2 表达高于对照组( P <0. 05);葛根素+PD8089 组(T+PD group) 低于T 组高于对照组;葛根素+SB203580 组(T+SB group)钙沉积量较T 组明显降低( P <0. 05),与对照组BMP-2 表达量相比亦降低( P <0. 05)?结论 葛根素在骨细胞周期过程中,ERK1/2 和p38 MAPK 信号通路对骨分化和骨形成起到了调控作用?

    • 尼古丁抑制MIA诱导的骨关节炎软骨细胞凋亡

      2016, 26(3):40-39.DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856. 2016.03.009

      关键词:关键词 尼古丁骨关节炎软骨细胞凋亡
      摘要 (2570)HTML (0)PDF 6.10 M (2907)收藏

      摘要:目的 探讨尼古丁抑制碘乙酸钠(MIA)诱导的骨关节炎软骨细胞凋亡。方法 酶消化法分离大鼠原代软骨细胞,并用10-8,10-7,10-6,10-5 mol/L尼古丁处理细胞48 h,随后实验分为5组,除正常组外,其余4组皆用4 μM MIA处理24 h,并给予尼古丁。MTT法检测各组软骨细胞活力;Annexin V-FITC/PI流式双染细胞术检测各组软骨细胞凋亡;分光光度法检测各组软骨细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase 3)活性;Western blot分析磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)激活状况及下游靶分子Bax,Bcl-2的表达情况。结果 10-7,10-6 mol/L尼古丁显著促进大鼠软骨细胞活力(P < 0.05),10-5 mol/L尼古丁显著降低大鼠软骨细胞活力(P < 0.05),10-8 mol/L尼古丁对大鼠软骨细胞活力无影响(P > 0.05)。10-8,10-7,10-6 mol/L尼古丁能剂量依赖性的提高MIA诱导的大鼠软骨细胞活力,并抑制MIA诱导的大鼠软骨细胞凋亡及Caspase 3活性(P < 0.05);10-7,10-6 mol/L尼古丁能提高PI3K表达及AKT磷酸化水平,并下调促Bax表达,上调Bcl-2表达(P < 0.05)。结论 一定剂量尼古丁能显著的抑制MIA诱导的大鼠软骨细胞凋亡,可能与PI3K/AKT信号通路有关。

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