摘要: 目的 观察弗氏完全佐剂(complete Freund’ s adjuvant,CFA)肌肉注射后 1 ~ 15 d 的炎性反应,明确免疫应答反应的发生,通过分析转录组学的差异,为肌肉炎性反应及其诱发的痛觉敏化研究提供重要的参考。 方法 90 只 Wistar 大鼠随机分为正常组和 CFA 注射后第 1 天( MD1)、第 3 天( MD3)、第 5 天( MD5)、第 7 天 (MD7)、第 9 天(MD9)、第 11 天(MD11)、第 13 天(MD13)和第 15 天(MD15)模型组。 在模型组大鼠左侧股二头肌肌腹注入 200 μL 的 CFA,观察各组大鼠左侧足底的机械痛阈值和热痛阈值变化;采用电化学发光法检测各组大鼠肌肉组织和外周血中炎性因子的含量;使用 HE 染色对正常组、MD3 和 MD13 组大鼠注射侧局部肌肉组织进行形态学观察;采用基因组学的方法,分析这两组大鼠差异基因的表达。 结果 (1)股二头肌肌肉注射 CFA 可诱发同侧足底持续的机械痛敏和热痛敏。 (2)CFA 肌肉注射后 24 h 后,外周血和局部组织中 IL-6、IL-1β 和 TNF-α 的含量明显升高,局部组织中促炎因子含量在注射后第 13 天再次明显升高。 (3)在 CFA 注射后第 3 天局部组织以中性粒细胞浸润为主,在 CFA 注射后第 13 天则以单核细胞浸润为主。 (4)与 MD3 组相比,MD13 组大鼠局部组织中与免疫反应相关的差异表达基因上调,其中涉及到 Th 细胞的分化、细胞因子受体相互作用等与适应性免疫相关的生物学通路。 (5)CFA 注射后局部组织中痛敏相关基因的表达水平升高,包括 Ccl3、Cxcl1、Cxcl2、Cxcl9、Cxcl10 等基因。 结论 CFA 的注射可有效刺激固有免疫和适应性免疫的发生,诱导炎性痛敏,其中不同趋化因子家族基因在不同的免疫应答中发挥了重要的作用。