摘要: 目的 寻找提高幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori, Hp)在小鼠胃部定植效率的方法。 明确质子泵抑制剂(proton pump inhibitor, PPI)泮托拉唑是否能够作为定植辅助剂促进 Hp 在小鼠胃部定植,为建立Hp 感染小鼠模型奠定基础。 方法 建立 Hp 悉尼株(Sydney strain 1, SS1)固体平板和液体培养体系并进行鉴定;比较不同剂量泮托拉唑对小鼠胃酸分泌的抑制效果;利用快速脲酶检测实验、细菌平板培养和 TaqManqPCR 分析单独接种 Hp 或联合泮托拉唑预处理对 Hp 定植效率的影响。 结果 PPI 预处理能够抑制胃酸分泌在一定程度上促进 Hp 在小鼠胃部定植。 结论 PPI 能够作为定植辅助剂提高 Hp 感染小鼠模型的构建效率。

摘要: 目的 通过激素皮质酮(corticosterone,CORT)激素和化合物苯甲酸钠(sodium benzoate,NaB)诱导构建弱精子症(asthenozoospermia,AZS)伴高精子 DNA 碎片化(sperm DNA fragmentation,SDF)小鼠模型,探索 AZS 伴高 SDF 动物模型的制备方法。 方法 将 50 只 3 周龄雄性 ICR 小鼠随机分为 CORT 处理组 30 只,NaB 处理组 20 只。 CORT 处理组分为 6 组,分别为饮水高(500 μg / mL)、中(200 μg / mL)、低(10 μg/ mL)剂量组、饮水对照组、注射造模组(40 mg / kg)和注射对照组(生理盐水),每组 5 只,连续造模 50 d。 NaB 处理组分为 4 组,分别为灌胃高(500 mg / kg)、中(300 mg / kg)、低(100 mg / kg)剂量组和对照组(生理盐水),每组 5 只,连续造模 50 d。 造模中观察各组小鼠生理状态并持续记录体质量变化,结束后取小鼠附睾尾部精子观察精子运动能力和精子 DNA 碎片化指数(DNA fragmentation index,DFI)。 结果 注射造模组体质量变化率出现下降趋势,与注射对照组相比无显著性差异(P>0. 05),灌胃高剂量组体质量变化率下降,与对照组相比差异显著(P<0. 05);注射造模组前向运动精子百分率出现下降趋势,与注射对照组相比无显著性差异(P>0. 05),NaB灌胃高剂量组前向运动精子百分率下降,与对照组相比差异显著(P<0. 05);注射造模组 DFI 出现升高趋势,与注射对照组相比无显著性差异(P> 0. 05),灌胃高剂量组 DFI 升高,与对照组相比差异显著( P< 0. 05)。 结论 NaB 500 mg / (kg·d)剂量持续 50 d 灌胃造模是构建 AZS 伴高 SDF 动物模型较为理想的方法。

摘要:CRISPR/ Cas9 技术的兴起,推动了生命科学各个领域的发展。 随着对其认识的不断加深,人们进行了多重改进和优化,以适应不同的应用场景。 在基因修饰小鼠模型制作中,CRISPR/ Cas9 技术的优化也带来了众多突破性进展。 本文简要回顾了 CRISPR/ Cas9 技术的发展历程,并从 CRISPR/ Cas9 元件优化、条件敲除/ 敲入基因修饰小鼠模型的构建以及 CRISPR/ Cas9 元件和 HDR 模板的递送系统层面总结了优化策略,展望该技术未来的发展。

摘要:主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)与机体免疫调节密切相关,不仅具有遗传多态性,而且 MHC 限制性存在种属差异。 人类的 MHC 被称为人白细胞抗原( human leukocyte antigen,HLA),小鼠 MHC 则被称为 H-2。 构建人源化 MHC 转基因小鼠模型是突破 MHC 种属差异并模拟人体免疫应答特征的重要策略。 MHC 转基因小鼠主要分为 MHC Ⅰ或 MHC Ⅱ单转基因小鼠模型和 MHC Ⅰ与 MHC Ⅱ双转基因小鼠模型。 HLA Ⅰ类转基因小鼠模型发展经历了 3 个阶段,目前采取敲除 H-2Kb 和 H-2Db 或者敲除鼠源 β2m 的策略来消除内源的 H-2 Ⅰ类分子对 HLA Ⅰ类分子的竞争性抑制;HLA Ⅱ类转基因小鼠模型的构建则是将鼠源 β 链敲除,转入 HLA Ⅱ类基因。 随着构建策略的优化,MHC 转基因小鼠模型被应用于表位疫苗研发、肿瘤治疗及疾病遗传关联研究中,成为临床前试的有力工具。 本文对 MHC 转基因小鼠模型相关资料进行了总结,概述了 MHC 转基因小鼠模型的构建策略及其在疫苗研发、疾病治疗等方面的应用进展。

摘要: 目的 构建炭疽Pasteur II 株芽孢气溶胶感染小鼠模型并评价构建效果。 方法 选取补体成分C5缺乏的B10. D2-Hc0H2d H2-T18c / oSnJ 小鼠,以气溶胶肺递送途径感染炭疽Pasteur II 株芽孢(减毒株),研究感染后的疾病进展、细菌载量、组织病理学改变、细胞因子和急性反应蛋白水平。 结果 小鼠半数致死剂量为5×103 CFU。炭疽芽孢肺部感染小鼠12 h 后就出现多器官转移并引发菌血症;组织病理改变及炎症反应与其他物种(包括兔、非人灵长类及人类)相似;血清和肺泡灌洗液中的C 反应蛋白和血清淀粉样蛋白P 水平表明小鼠感染后可激发急性炎症反应。 结论 该模型可作为替代性的小动物模型,用于进一步阐明炭疽芽孢杆菌的发病机制和宿主对炭疽芽孢易感性的差异,为炭疽疫苗和治疗药物提供新方法。

摘要:动物炎症性疾病在疾病中比例最大,无论是传染性疾病还是免疫性疾病在临床上都会有炎症的发生。为了更加深入的了解疾病发生发展的机制以及寻找更好的预防治疗途径,采用体内试验非常必要。小鼠模型因其经济便宜,饲养周期短,操作简单以及与人类基因、生理结构等方面的相似性而广泛运用。本文以此为背景,主要围绕肺炎模型、结肠炎模型以及乳房炎模型的小鼠造模方法研究进展展开综述,以期为后续研究提供便捷。

摘要: 目的 探讨沉默血红素加氧酶-1( heme oxygenase-1,HO-1) 的表达对急性单核细胞白血病( acute monocytic leukemia, French-American-British classification M5)小鼠模型白血病疾病的影响。 方法 通过慢病毒转染 U937 细胞株沉默 HO-1 的表达,采用不同处理组的 U937 细胞皮下注射 NOD/ SCID 小鼠的腋下,建立模型,分为空白组及实验组(U937 组、沉默 HO-1 组、空载体组)。 鉴定模型构建成功后,比较不同组小鼠的肿块形成时间、肿块体积的大小、肿瘤对周围组织的浸润、外周血白细胞及血小板计数、血红蛋白含量及生存时间。 结果 荧光显微镜及 Western blot 证实慢病毒转染成功。与空白组相比,实验组小鼠腋下形成肿块,外周血白细胞计数明显升高、涂片见白血病细胞,且骨髓液中发现一群细胞表达 CD13、CD14、CD64,证实造模成功。 与 U937 及空载体组相比,沉默 HO-1 组 M5 小鼠模型出现皮下肿块所需时间明显延长(P<0. 05)、肿块生长的速度较慢(P<0. 05)、外周血白细胞数升高及血小板下降的速度更慢(P<0. 05)、且生存时间显著延长(P<0. 05)。 结论 沉默 HO-1 的表达可减缓 M5 小鼠模型的白血病进展,HO-1 有望成为 M5 的治疗靶点之一。

摘要:阿尔兹海默病(AD)是一类以认知记忆障碍为主要表现的神经退行性疾病。 目前,AD 的临床治疗以药物为主,但药物治疗仅能改善症状,不能有效阻止疾病进展,且对中晚期患者疗效欠佳。 干细胞具有自我更新 和多向分化能力,在 AD 治疗中有着广阔的应用前景。 骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)作为最早发现的间充质干细胞,来源方便,易于体外分离、培养、扩增和纯化;具有自我更新及分化为神经样细胞的潜能;其分泌因子具有免疫调控和微环境重塑的能力,因此在 AD 的临床治疗中有广阔的应用前景。本文综述了国内外 BM-MSCs 治疗 AD 的研究现状,主要包括 BM-MSCs 直接移植,基因修饰后 BM-MSCs 移植以及 BM-MSCs 源外泌体移植治疗,深入讨论 BM-MSCs 治疗阿尔兹海默病模型小鼠的效果、机理及其优缺点,为骨髓间充质干细胞应用于临床提供了数据支撑。

摘要:食管癌是世界上消化道常见的恶性肿瘤之一,其发病率与死亡率呈逐年上升趋势,且趋于年轻化。食管癌的发病、转移和耐药机制尚未完全清楚。中药抗肿瘤和逆转耐药等作用日益受到关注。食管癌小鼠模型有益于分析人类食管癌发病机制与中医药防治肿瘤的研究策略。食管癌小鼠模型主要分为三大类,诱发性模型、移植性模型和基因工程模型。然而,尚没有一种模型能概括人类食管癌的所有特征,选择合适的食管癌小鼠模型来解决特定食管癌问题尤为重要。 本文综合国内外研究文献,对目前常用的小鼠食管癌模型进行综述,归纳总结各类型食管癌小鼠模型制备方法及比较各模型优缺点与适用范围,以期为中医药防治食管癌的研究提供科学基础。

摘要:目的 探索 α-突触核蛋白 A53T 转基因小鼠认知功能,运动功能与焦虑样行为学的改变以及病理 学变化特点。 方法 选用背景为 C57BL/ 6 的 α-突触核蛋白 A53T 转基因小鼠作为实验组,同窝阴性小鼠为对照组。 采用旷场及圆筒实验检测小鼠的焦虑状态;转棒及抓力实验评价小鼠的运动协调能力以及前肢张力;水迷宫及条件恐惧实验评价小鼠的认知能力。 通过免疫组织化学染色法研究模型小鼠脑内病理特征;通过电镜观察模型小鼠脑内线粒体变化。 结果 与对照组比较,α-突触核蛋白 A53T 转基因小鼠运动距离增加,呈现过度活跃状态; 对条件恐惧记忆的时间缩短,出现认知障碍;圆筒、转棒与抓力实验及水迷宫实验未见统计学差异。模型组小鼠黑质、纹状体、梨状皮层及海马的 α-synuclein 磷酸化水平增加,前额叶路易小体沉积,黑质纹状体 α-synuclein 沉积增多,黑质 TH 阳性细胞数量显著减少;与对照组比较,电镜观察模型组小鼠脑内线粒体嵴及其内容物不清,线粒体形态改变。 结论 突触核蛋白 A53T 转基因小鼠出现认知功能受损,并且早于运动障碍发生;病理特征表现为 α- synuclein / LBs 沉积于前额叶、皮层,黑质多巴胺能神经元缺失以及线粒体形态改变,可作为一种突触核蛋白相关认知障碍性疾病如路易氏体痴呆和帕金森病痴呆的动物模型。