摘要:目的 运用不同的技术方法,观察SIVmac239 感染CEMx174 细胞的全过程?方法 SIVmac239 病毒感染CEMx174 细胞后,分别在不同的时间点收集培养上清和细胞,应用实时荧光定量PCR 方法检测培养上清中的病毒载量;IFA 检测并用激光扫描共聚焦显微镜观察病毒定位及复制情况;胞内流式?Western blot 检测细胞内病毒蛋白p27 的表达量?结果 SIVmac239 吸附并感染CEMx174 后,第0.5 h 时,细胞胞膜上检测到病毒颗粒;第12 h 时,培养上清中的病毒RNA 水平出现下降;此后至第96 h,病毒持续复制,细胞胞浆内病毒蛋白p27 表达量逐渐增加,培养上清中病毒RNA 水平持续升高?结论 病毒感染细胞时,首先吸附在细胞膜上,然后进入细胞持续复制和表达?

摘要:目的 研究正常恒河猴感染SIVmac239 前后外周血单核细胞以及各亚群单核细胞表面CD169 分子表达量的变化及可能的原因?方法 正常恒河猴在静脉攻毒后,流式细胞术检测感染前后外周血单核细胞比例及其表面分子CD169 表达量的变化;SIVmac239 直接感染和不同细胞因子刺激流式分选出的正常恒河猴外周血CD14 + 单核细胞,流式细胞术检测细胞表面CD169 和细胞因子IFN-α 表达量的变化?结果 SIVmac239 感染正常恒河猴后,CD14 + 单核细胞的比例下降,CD14 + 单核细胞表面分子CD169 表达量升高;外周血中不同单核细胞亚群CD169 的表达量均显著增加,CD14 + CD16 ++ 单核细胞中CD169 表达量的升高更为明显?正常恒河猴外周血CD14 + 单核细胞经细胞因子M-CSF?IL-4 和IL-13 刺激后,细胞表面不表达CD169;经细胞因子IFN-α 刺激后,高表达CD169;SIVmac239 病毒直接感染CD14 + 单核细胞,细胞表面CD169 与胞内细胞因子IFN-α 的表达均无变化?结论 SIVmac239 病毒感染恒河猴后,可引起外周血单核细胞CD169 分子表达量的升高,其表达与病毒直接感染单核细胞无关,与体内其它细胞分泌的细胞因子IFN-α 相关?

摘要:目的 研究SIVmac239在不同中国恒河猴体内由于免疫压力出现的病毒Env区的变异进化情况。比对分析可形成AIDS相关肠病和脑病的SIV病毒其Gp120序列的差异及特点。方法 四株SIVmac239感染晚期发病恒河猴PBMC中分离的病毒及两株神经嗜性SIVmac251病毒，通过有限稀释分离培养病毒单克隆，提取病毒RNA后反转录，PCR扩增病毒gp120序列进行系统进化树分析。同时分析两组不同嗜性毒株Gp120氨基酸序列及糖基化位点的变化情况。结果 SIVmac239在四只恒河猴体内发生不同的变异进化。肠道嗜性毒株与神经嗜性毒株氨基酸序列的差异集中在V1和V4区，肠道嗜性毒株在V4区与一个糖基化位点的增加，而神经嗜性毒株的糖基化位点的变化都发生在保守区C1、C2和C3。结论 SIV肠道嗜性和神经嗜性的增强分别与包膜蛋白Gp120 上V4区糖基化位点的增加和C1区的糖基化位点缺失相关，两种嗜性的差异并不表现在与嗜性形成有紧密联系的V3区上。

摘要:目的 研究猴免疫缺陷病毒（SIVmac239）多次直肠粘膜暴露对机体细胞免疫的影响。方法 建立小剂量多次直肠粘膜暴露模型，测定实验猴的血浆病毒载量了解病毒复制水平，测定外周CD4+ T细胞绝对数了解疾病进展情况，测定T细胞亚群和外周单个核细胞IFN-γ分泌情况了解机体细胞免疫状况。结果 小剂量SIVmac239病毒多次暴露能导致病毒通过直肠粘膜进入动物体内，诱导机体免疫系统出现变化，但未见SIVmac239典型感染。病毒多次直肠暴露诱导出特异性细胞免疫，但与普通病毒感染相比，水平较低。结论 本研究明确了猴免疫缺陷病毒小剂量暴露对机体细胞免疫的作用，为HIV疫苗研究提供了基础信息。