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杨雷 , 占玲俊 , 周冬生 , 郭兆彪 , 杨瑞馥 , 秦川
2009(8):1-4,14.
Abstract:目的 利用DNA芯片技术研究副溶血弧菌对牛磺胆酸刺激反应的全局性基因转录变化概况,找出其中的表达调控变化规律,为副溶血弧菌基因转录调控网络的构建提供实验和理论依据.方法 副溶血弧菌分别在正常和添加了50 mmol/L 牛磺胆酸的培养基中孵育至对数中期,收集菌体,提取RNA,利用全基因组DNA芯片分析比较两者基因转录变化.并应用聚类分析比较其中的变化规律.结果 比较转录谱分析证实一共有255个基因的转录表达发生显著性变化,和对照组相比,上调的基因明显占主导优势.而在这些变化的基因中,关于蛋白合成和硫代谢以及谷氨酸合成相关的基因均呈现明显的转录上调变化.结论 我们利用DNA芯片技术描绘出了副溶血弧菌在添加牛磺胆酸后全部基因转录水平变化的概图,并发现了蛋白合成,硫代谢和谷氨酸合成相关的基因的变化规律,这给我们下一步的转录调控网络研究提供了良好的靶标.
占玲俊 , 杨雷 , 周冬生 , 郭兆彪 , 杨瑞馥 , 秦川
2009(8):5-8.
Abstract:目的 研究鼠疫菌cAMP受体蛋白(CRP)对毒力相关基因yopD的调控情况.方法 利用芯片表达谱和实时定量RT-PCR初步判断CRP对yopD的调控,在获得纯化的his-CRP蛋白后进行体外凝胶阻滞实验(EMSA)证明CRP能否直接结合yopD启动子区, DNase I足迹实验 (DNase I footprinting assay) 确定yopD启动子区CRP结合位点序列精确序列.结果 芯片表达谱和实时定量RT-PCR实验一致证实CRP可能直接负调控yopD,EMSA证明 CRP能直接结合yopD启动子区,DNase I足迹实验确定yopD的启动子区上CRP位点的精确序列.结论 CRP可能直接负调控毒力相关基因yopD.
徐平 , 刘丽均 , 郁丽丽 , 贾青 , 高娟 , 杨博 , 陈浩杰
2009(8):9-14,F0002.
Abstract:目的 建立小鼠胚胎与配子冷冻库,以安全、有效地保存小鼠资源.方法 选择不同遗传背景(近交系、远交群、免疫缺陷、疾病模型和基因改变等)的实验小鼠,系统进行了超数排卵、体外受精(IVF)率、胚胎与精子的冷冻复苏效果、卵巢冷冻与移植、辅助体外受精等比较研究.结果 ①小鼠年龄和遗传背景的不同,其超数排卵的结果也不同(P<0.01).三个日龄段中,28日龄最好,其次为112日龄,56日龄最差;不同遗传背景小鼠的超数排卵结果显示,封闭群和大部分近交系小鼠优于转基因小鼠(P<0.05),自发性疾病小鼠和基因剔除小鼠的结果最差;②不同品系小鼠的新鲜精子和冻融精子的体外受精率差异有显著性(P<0.05),特别是C57BL/6J 小鼠冻融精子的IVF率(10.3±4.2%)与新鲜精子(89.8±4.8%)相比,差异极显著(P<0.01);③不同品系小鼠的胚胎复苏率,除MRL/mp小鼠的复苏率略低外,其他小鼠品系均有较高的冷冻胚胎复苏率(58.2%～83.9%),表明,不同遗传背景小鼠之间差异有显著性(P<0.05),但均可以达到有效保存小鼠资源的目的.④小鼠的遗传背景、年龄等对小鼠精子的冷冻效果都有影响,采用改良的FERTIUP冷冻保护剂和细胞质内单精注射(ICSI)技术可有效提高以C57BL/6J为背景的基因改变小鼠的精子冷冻复苏率.⑤卵巢冷冻保存可以改善雌性小鼠的繁殖困难或不孕.结论 小鼠资源的安全保存,除了长期连续繁殖保种外,最好的或最保险的方法是低温保存.通过将胚胎、配子、卵巢等长期保存在液氮(-196℃)中避免遗传性状的改变,并在将来复苏后获得正常的小鼠后代,以用于生物学和医学等研究.
陈方明 , 陈民利 , 陈亮 , 彭定国 , 应华忠 , 徐孝平 , 王德军 , 潘永明
2009(8):15-17,38,I0001.
Abstract:目的 观察脾虚型肠易激综合征模型WHBE兔活体舌象和舌组织病理形态学的变化.方法 采用湿热应激复合番泻叶致脾虚型肠易激综合征兔模型,观察造模及自然恢复后WHBE兔和日本大耳白兔活体舌象和舌组织病理形态学的变化.结果 与正常对照组比较,脾虚型肠易激综合征模型兔舌色淡红,舌质嫩;背隆起前后固有层乳头密度明显降低(P<0.01),基底层核分裂相频数减少(P<0.01),舌下角质层和上皮层厚度均明显增厚(P<0.01),且角质层/上皮层比值明显增加(P<0.01),且WHBE兔菌状乳头密度显著降低(P<0.05);自然恢复10 d后,自然恢复组实验兔背隆起前后固有层乳头密度仍显著低于正常对照组(P<0.01),舌下角质层厚度明显大于正常对照组(P<0.05),且WHBE兔的上皮层厚度显著高于正常对照组(P<0.05),日本大耳白兔角质层/上皮层比值显著高于正常对照组(P<0.05).结论 脾虚型肠易激综合征可能与机体营养、代谢相关.
2009(8):18-21.
Abstract:目的 建立高精度低误差的
饶子亮 , 刘盛来 , 黄小琼 , 钟志勇 , 王刚 , 陈系古
2009(8):22-25.
Abstract:目的 建立宫颈癌移植瘤模型,研究亚砷酸的体内干预效果及机制.方法 将Hela细胞注射于裸鼠皮下接种,成瘤后腹腔分别连续注射亚砷酸、卡铂及生理盐水14 d,观察肿瘤大小和裸鼠精神状态,用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期.结果 亚砷酸组小鼠精神状态良好.与对照组比较,亚砷酸组治疗7 d后肿瘤生长速度减慢;治疗14 d肿瘤重量显著性降低(P<0.05),抑瘤率达到35.8%,高于卡铂组的27.9%;治疗14 d肿瘤细胞的凋亡率显著升高(P<0.01),增殖指数(PI)显著降低(P<0.01),处于G0/G1周期的细胞明显增多(P<0.01),处于G2/M周期的细胞明显减少(P<0.05).结论 亚砷酸具有抑制宫颈癌移植瘤生长的作用,且未见明显毒副作用,其抑瘤的机理可能与诱导肿瘤细胞凋亡、干扰肿瘤细胞生长周期和抑制肿瘤细胞增殖有关.
石巧娟 , 刘月环 , 楼琦 , 卢领群 , 周莎桑 , 柯贤福 , 萨晓婴
2009(8):26-30,I0002.
Abstract:目的 观察非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝组织中PPARα基因的表达,并用PPARα激动剂进行干预,探讨其与胰岛素抵抗、脂代谢紊乱的关系.方法 大鼠随机分为①正常对照组、②高脂模型组、③PPARα激动剂干预组,利用高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪肝模型.12周后,检测大鼠血脂、肝功能、血糖、胰岛素水平及胰岛素抵抗指数;RT-PCR法分析PPARα基因的表达;观察肝脏的形态学改变.结果 PPARα激动剂可降低NAFLD大鼠转氨酶、血脂水平及胰岛素抵抗指数,可促进NAFLD大鼠中PPARα基因的表达;肝脏形态学明显改善.结论 PPARα激动剂能改善NAFLD大鼠脂质代谢紊乱, 有明显的保肝降酶作用, 具有适度的胰岛素增敏作用.PPARα及其配体在NAFLD发病机制及治疗中的进一步深入研究,将为临床防治NAFLD提供新的思路.
孙侠 , 饶子亮 , 谢超敏 , 黎雄才 , 钟志勇 , 王刚 , 陈系古
2009(8):31-34,I0002.
Abstract:目的 建立混合菌液致SD大鼠盆腔结缔组织炎模型,研究大鼠盆腔黏连组织的病理学改变与层黏连蛋白表达.方法 用注射器将细菌混悬液0.5 mL,注入大鼠盆腔,并结合子宫穿孔手术,建立SD大鼠盆腔结缔组织炎模型.采用Philips分级评分法对大鼠盆腔黏连程度分级评分,切取黏连组织,用多聚甲醛固定,进行病理检测,并采用免疫组化法测定层黏连蛋白表达情况.结果 模型组大鼠盆腔黏连Philips分级评分以Ⅲ级为主,与正常对照组比较差异极显著.HE染色镜检模型组可见大量炎细胞浸润,脓肿形成,伴有多少不等的纤维组织增生.免疫组化染色镜检模型组可见层黏连蛋白高表达,纤维结缔组织增生程度越高,层黏连蛋白表达越多.结论 盆腔注射混合菌液并结合子宫穿孔手术,可作为建立大鼠盆腔结缔组织炎模型的方法.层黏连蛋白在盆腔结缔组织炎发病中起重要作用,参与整个炎症过程并维持盆腔黏连组织纤维化,可作为判断盆腔结缔组织炎的炎症和纤维化程度的参考指标.
2009(8):35-38,I0003.
Abstract:目的 研究高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用.方法 测定高纯度大豆卵磷脂对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式试验,分别观察高纯度大豆卵磷脂接触CHL 6 h,24 h及加S9后6 h染色体的畸变情况,根据标准进行结果判定.结果 染毒6 h,24 h及加S9后染毒6 h染色体畸变为阴性.结论 高纯度大豆卵磷脂不能引起CHL细胞染色体产生畸变作用.
丛喆 , 刘秀英 , 侯丽波 , 蒋虹 , 陈志伟 , 魏强
2009(8):39-43.
Abstract:目的 应用NASBA方法制备SIV/SHIV RNA定量测定标准品.方法 应用NASBA方法直接扩增SIVmac251病毒gag基因上1476～1685之间的片段,扩增的RNA产物(RS-NASBA)纯化后10倍系列稀释,测定定量曲线、标准曲线,测定该标准品的稳定性和重复性.结果 应用Qiagen公司QuantiTect SYBR GREEN RT-PCR Kit,该标准品可精确定量到2.033×10 copies/μL.结论 外标准品RS-NASBA纯度高,稳定性好,可用于定量测定SIV/SHIV RNA拷贝数.
陈亮 , 陈民利 , 徐剑钦 , 彭定国 , 潘永明 , 张利棕 , 徐孝平 , 应华忠
2009(8):44-47.
Abstract:目的 观察脾虚型肠易激综合征(IBS)模型WHBE兔环核苷酸水平的变化.方法 取WHBE兔和日本大耳白兔各18只,分别随机分成两组,即正常对照组6只,模型对照组12只,采用湿热应激加灌服番泻叶煎剂的方法造成脾虚证肠易激综合征(IBS)兔模型,其中模型对照组造模后处理6只,剩余兔自然恢复10 d,观察实验兔的血浆环核苷酸水平的变化.结果 与正常对照组比较,WHBE兔模型对照组血浆cAMP和cGMP水平均显著升高(P<0.05,P<0.01),且自然恢复10 d后血浆cAMP和cGMP水平仍高于正常对照组(P<0.05,P<0.01);日本大耳白兔模型对照组造模后及自然恢复10 d后血浆cAMP和cGMP水平略有所升高,但差异均不显著(P>0.05);且模型对照组和自然恢复组cAMP/cGMP比值均略低于正常对照组,但差异不显著(P>0.05).结论 本实验脾虚证IBS模型兔的血浆环核苷酸水平随阴阳盛衰而变化,具有双重特点:既有阴虚特点,又有阳虚特点,且WHBE兔更适合于脾虚证IBS模型研究理想的实验动物.
应华忠 , 陈民利 , 冷晓霞 , 张利棕 , 陈亮 , 彭定国 , 徐剑钦 , 潘永明
2009(8):48-50.
Abstract:目的 比较研究花色豚鼠与白化豚鼠静脉血电解质、酸碱平衡及血气情况.方法 分别取健康成年花色豚鼠和白化豚鼠,利用便携式多功能麻醉机经异氟烷吸入麻醉后,腹主静脉取血,经NOVA血气-电解质分析仪全自动分析测定电解质、酸碱平衡及血气等指标.结果 花色豚鼠的Cl-、pH、SBC、PO2、SVO2、O2ct均显著低于白化豚鼠(P<0.05,P<0.01),而PCO2显著高于白化豚鼠(P<0.05).结论 花色豚鼠的携氧能力明显低于白化豚鼠,可以作为血瘀证和亚健康模型研究较好的实验动物.
王德军 , 林琳 , 陈民利 , 冷晓霞 , 寿旗扬 , 潘永明 , 应华忠 , 徐孝平
2009(8):51-54.
Abstract:目的 探讨不同麻醉方法和不同麻醉药物对大鼠血气、电解质及能量代谢的影响.方法 采用异氟烷、乙醚吸入麻醉,戊巴比妥钠、水合氯醛腹腔注射麻醉,经腹主静脉取血,经血气-电解质分析仪全自动分析测定,观察不同麻醉方法和麻醉药物对大鼠血气、电解质及能量代谢的影响.结果 异氟烷吸入麻醉组Na+离子浓度略低于戊巴比妥钠腹腔注射组(P<0.05);戊巴比妥钠腹腔注射组Ca2+离子浓度显著低于其他三组(P<0.01);吸入麻醉组的Mg2+离子浓度显著高于药物腹腔注射麻醉组(P<0.05,P<0.01);水合氯醛腹腔注射组Lac含量显著高于乙醚和戊巴比妥钠麻醉组(P<0.01);吸入类麻醉药能较好的维持较高的PO2、SO2、O2Ct和A(肺泡气中氧分压),而BE-ECF、BE-B、PCO2、HCO-3和TCO2降低,表明不同麻醉药均有不能程度的引起大鼠静脉血血气、电解质及能量代谢产物的改变.结论 不同麻醉药物均有不同程度的引起大鼠静脉血血气、电解质及能量代谢产物的改变,异氟烷和乙醚对动物机体心血管、神经系统具有一定的保护作用,机体损害较少,而戊巴比妥钠腹腔注射对动物机体心血管、神经系统具有一定的抑制作用,机体损害较大.因此,在使用麻醉药时应合理选用和控制,避免由于麻醉引起实验误差.
2009(8):55-57,69.
Abstract:目的 研究雌激素和多巴胺激动剂对雌激素受体在大鼠垂体组织表达的作用.方法 20 只成年雌性Wistar大鼠,切除卵巢后,随机分2组:(1)对照组(n =5),皮下植入空白硅胶管;(2)雌激素组(n =15)皮下植入含有乙烯雌酚的硅胶管,8周后,两组各处死5只大鼠,雌激素组剩余大鼠(n =10)取出硅胶管,随机再分2组,安慰剂组(n=5)给予自来水灌胃,多巴胺组(n =5)给予溴隐亭(多巴胺激动剂)灌胃,用药4周后处死动物.放免法测定血清PRL水平,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Ers在各组垂体组织中的表达,以β-actin 作为内参照,借助于计算机凝胶成像系统分析表达量.结果 Erα,Erβ以及TERP在各组大鼠垂体组织均有表达,其中Erα和TERP mRNA水平在雌激素组明显高于对照组(P<0.001),在安慰剂组和多巴胺组的表达无明显差别.结论 大鼠垂体组织中存在ER的表达,雌激素对Erα和TERP的表达具有升调节作用,多巴胺不影响雌激素受体的表达.
纪中 , 崔清志 , 田艳君 , 张国栋 , 韩蕊娜 , 温海霞 , 张广美 , 刘国艺
2009(8):58-60,80,I0004.
Abstract:目的 检测益坤宁对围绝经期大鼠下丘脑雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达的影响,探讨益坤宁治疗围绝经期综合征的作用机制.方法 采用自然衰老的围绝经期大鼠,随机分为围绝经期对照组、西药对照组和中药实验组;另取5 月龄青年雌性大鼠做青年对照组.各组大鼠分别连续灌胃给予生理盐水、利维爱、中药益坤宁和生理盐水4周.通过免疫组化观察大鼠下丘脑ER蛋白的表达部位;Western blot定量检测大鼠下丘脑Erα和Erβ蛋白表达.结果 Erα、Erβ蛋白主要表达于细胞胞质中.围绝经期对照组与青年组相比,Erα、Erβ蛋白表达量明显下降(P<0.05,P<0.01);中药实验组与围绝经期对照组比较,Erα、Erβ蛋白表达量均明显增多(P<0.05,P<0.01);西药对照组与围绝经期对照组相比,Erα、Erβ蛋白表达量增多(P<0.05).结论 益坤宁通过提高围绝经期大鼠下丘脑组织中Erα、Erβ蛋白表达水平,使ER的合成增加,从而提高雌激素靶组织中ER的含量以增强雌激素的生物活性而发挥治疗作用.
许永华 , 张东辉 , 许琴 , 李建英 , 是文辉 , 于娟 , 那顺巴雅尔 , 顾为望
2009(8):61-62,I0005,I0006.
Abstract:目的 积累西藏小型猪心脏和呼吸系统的组织学资料,对西藏小型猪在相关生物学研究上的应用提供参考.方法 将西藏小型猪心脏和呼吸系统各脏器固定于10%中性甲醛溶液中,常规石蜡切片,HE染色,光镜下观察.结果 西藏小型猪心脏壁厚,心内膜下浦肯野纤维粗,束细胞大而清晰,排列规则;心肌纤维粗大,排列紧密,横纹较模糊,润盘少且不清楚,肌间血管丰富;心外膜较厚.西藏小型猪鼻黏膜较厚;气管和支气管假复层柱状纤毛上皮排列紧密,纤毛粗而长,黏膜下腺体量少;肺支气管周围无炎性细胞浸润,肺泡腔内尘细胞极少,肺泡壁和肺间质血管较丰富.结论 西藏小型猪心脏、呼吸系统表现出高原动物组织学特点,其这种特点对今后西藏小型猪实验所涉及的组织学判断有重要参考价值.
2009(8):65-66,F0003.
Abstract:目的 建立适用于生物安全三级实验室操作的SARS-CoV空斑试验方法.方法 SARS-CoV10倍系列稀释接种Vero-E6细胞,用0.6%琼脂糖覆盖中性红着色(琼脂糖-中性红法)或覆盖1%甲基纤维素,4%甲醛固定,结晶紫染色(甲基纤维素-结晶紫法),空斑计数.结果 琼脂糖-中性红法病毒滴度为6.14 Lg pfu/mL,甲基纤维素-结晶紫法病毒滴度为6.57 Lg pfu/mL.结论 二种空斑试验方法相比,病毒滴度无明显差异.甲基纤维素-结晶紫空斑试验法形成的空斑比琼脂糖-中性红法清晰、操作简单安全、结果可长期保存.
2009(8):67-69.
Abstract:目的 建立大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AT-Ⅱ)的改良体外原代培养法.方法 采用循环冲洗、支气管灌洗、胰蛋白酶消化、滤网过滤并用轻比重及重比重Percoll密度梯度离心,分离AT-Ⅱ.原代培养后通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP) 法和电镜鉴定AT-Ⅱ.结果 经AKP染色和电镜鉴定所得的AT-Ⅱ纯度为(80.2±6.3)%,每只大鼠可分离出1×107 AT-Ⅱ.结论 采用Percoll密度梯度离心法能分离出较高纯度的AT-Ⅱ.
2009(8):70-75.
Abstract:亨廷顿氏病(Huntington's disease,HD)是一类神经系统退行性疾病,主要病理改变累及基底节神经元以及纹状体的固有神经元,患者主要临床特征为进行性恶化的运动、认知及精神障碍三联征.3-硝基丙酸(3-NP)是线粒体毒性药物,主要作用于氧化呼吸链并抑制机体的三羧酸循环.本文将就HD的发病机制及病理学特征以及3-NP介导的动物模型的优缺点做一综述.
2009(8):76-80.
Abstract:由于大鼠呼吸频率较快、口腔狭小、声门较高,医学实验中气管内插管操作具有较多困难,多年来很多学者对大鼠气管内插管方法进行了大量研究.本文主要对大鼠气管内插管时动物和气管导管的选择、麻醉方式、插管的体位以及各种插管工具和方法等作一简要的综述.
2009(8):81-84.
Abstract:本文概述了二氧化碳(CO2)安乐死法的作用机制、CO2使用浓度、应用范围和操作注意事项,并讨论了该方法的动物福利、设备改进等问题.