Abstract:随着我国实验动物科学和动物试验的迅速发展,实验动物兽医的需求越来越大.实验动物兽医的角色多种多样,广义地讲可以是任何具有兽医资质且从事实验动物管理、繁育、疾病诊断防治、动物试验和研究的人员.通常实验动物兽医是指实验动物临床兽医或实验动物主管兽医.实验动物兽医的天职是确保动物的健康和福利,并支持高质量的动物试验研究.本文从实验动物兽医工作的必要性、实验动物兽医的发展、实验动物兽医的资质、职责等几个方面,并结合合同外包研发机构中兽医的实践阐述了实验动物兽医的工作性质、任务和内容.

Abstract:目的 利用原核表达技术制备人肠道病毒71型(EV71)的亚单位融合疫苗,并通过小鼠模型对其保护效果进行评价.方法 在大肠杆菌中融合表达EV71的亚单位肽段,随后将肽段免疫雌鼠,对其交配后产下的幼鼠进行病毒感染,通过检测其组织内的病毒拷贝数和病理变化,对疫苗的保护效果进行评价.结果 通过肽段融合的方法,得到五种备选疫苗,分别为VacA, VacB, VacC, VacD和VacE,这五种疫苗均具有一定的体外保护能力,并且VacB和VacC与正常人大脑组织无明显交叉反应.动物模型评价结果显示,VacB和VacE能赋予幼鼠抗病毒感染的保护效果.结论 利用EV71的小鼠感染模型评价了针对EV71的亚单位联合疫苗,VacB和VacE的保护效果较好,此外,VacB与人脑组织间无明显交叉反应,可以作为潜在的无神经毒性的临床使用疫苗.

Abstract:目的 研究结核分枝杆菌(MTB)ESAT6-CFP10融合蛋白对小鼠巨噬细胞自噬功能的影响.方法 H37Rv菌株感染小鼠巨噬细胞后加入纯化的重组ESAT6-CFP10融合蛋白,通过透射电镜检测自噬体的形成.提取细胞总RNA和蛋白,以实时定量RT-PCR及Western blot方法检测自噬相关基因(atg)分子水平和蛋白表达水平.结果 ESAT6-CFP10融合蛋白可抑制小鼠巨噬细胞自噬体的形成,并导致atg分子表达水平下降,其中atg8表达量下降最为明显.结论 MTB ESAT6-CFP10融合蛋白通过调控atg分子表达水平影响小鼠巨噬细胞自噬功能.

Abstract:目的 动态观察大鼠肝纤维化过程中Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)蛋白在肝脏的表达,探讨TLR4与肝纤维化发生发展的关系. 方法以四氯化碳皮下注射复制大鼠肝纤维化模型,设立正常对照组和模型1周组、2周组、4周组、6周组.常规HE染色和天狼猩红胶原染色观察肝脏病变;检测肝组织羟脯氨酸和血浆内毒素含量;免疫组化和Western blot检测TLR4在肝组织中的表达, 检测α-SMA观察活化的肝星状细胞(HSCs). 结果与正常对照组比较,CCl4作用2周时,肝组织羟脯氨酸含量开始明显增多(P<0.01);模型组各组血浆内毒素含量呈梯度上升(P<0.01),且与肝组织羟脯氨酸含量呈显著正相关关系(P<0.01);CCl4作用1周后肝组织TLR4的表达即明显增强(P<0.01),4周时和6周时有所下降(与2周组相比,P<0.05),但仍高于正常对照组(P<0.01).TLR4阳性细胞包括枯否细胞、活化的HSCs及少量的肝细胞和内皮细胞.结论 内毒素及其受体TLR4的改变可能在肝纤维化中起重要作用.

Abstract:目的 探讨RSV感染兔呼吸系统的组织病理学改变及其病理学指数评估方法. 方法将RSV 100 μL(108 TCID50 /mL)鼻腔接种新西兰兔,分别于3和5 d时处死动物,取鼻黏膜、气管、肺门支气管、肺组织做石蜡包埋切片、HE染色,与正常对照组比较,显微镜下观察组织病理学改变.根据病变程度、参考相关文献,制定鼻黏膜、气管/支气管、肺组织的病理学指数评分标准并进行评分.结果 与正常对照组相比,接种病毒动物可见鼻黏膜增厚甚至可见坏死脱落灶、单个核细胞浸润以及淋巴样组织增生;气管、支气管黏膜增厚、粗糙、排列紊乱,有坏死脱落,支气管内可见渗出物;肺组织以肺门部位病变显著,可见以围绕支气管或血管组织为主的炎细胞浸润灶,肺泡内、各级细支气管内存在炎性分泌物;接种RSV5 d组病理学指数评分与正常对照组相比有统计学意义. 结论 RSV鼻腔接种新西兰兔可致其鼻黏膜、气管、支气管及肺组织发生炎性损伤.我们制定的鼻黏膜、气管/支气管、肺组织的病理学指数评分标准适用于动物呼吸系统炎性损伤程度的评估.

Abstract:目的 探讨BDNF(Brain derived neurotrophic factor)改善痴呆老龄鼠记忆障碍的机制.方法 利用Morris迷宫试验观察脑内微量注射BDNF对痴呆小鼠自发活动和记忆巩固过程的影响,应用透射电镜和形态计量学分析痴呆老龄鼠海马Gray Ⅰ型突触的突出结构参数的变化.结果 BDNF 使痴呆小鼠在新异环境中的自发活动和探究行为明显增多;并显著延长电击后24 h 的步入潜伏期(STL);BDNF使痴呆老龄鼠海马CA1 区GrayⅠ型突触的体积密度、面积密度、比表面和面数密度较治疗前增大,突触平均面积增大;突出界面曲率、突出间隙宽度、突出后致密物质均较治疗前增大,而较正常对照组减小.结论 突触结构的变化和突出数量的减少是痴呆发病的病理机制之一;BDNF 能够促进突触重建,改善痴呆老龄鼠的学习记忆.

Abstract:目的 直接从实验豚鼠基因组DNA中筛选获得微卫星分子标记.方法 应用磁珠和生物素标记的微卫星探针与豚鼠基因组酶切片段杂交,捕获200 ～ 1000 bp含有微卫星序列的DNA片段,连接到pMD-18V载体中,转化到感受态细胞E. coli DH5α中构建富集微卫星序列的小片段插入文库.然后用PCR法进行筛选.结果 从约2000个转化子中获得240个阳性克隆.对其中98个进行了测序,并成功设计豚鼠微卫星引物17对.结论 经过优化的磁珠富集法能够稳定、高效地获得豚鼠微卫星标记.本研究获得的微卫星位点将成为豚鼠遗传学研究的有力工具.

Abstract:目的 观察不同种属来源和浓度的动物血清对体外培养的肿瘤细胞(A549、MCF-7、BGC-823)生长的影响.探讨血清药理实验中血清供体动物的选择及血清添加量的问题.方法 设置5种血清(牛、人、兔、大鼠、小鼠)及血清量(10%、20%、40%、60%、80%)的培养体系,用MTT法检测细胞增殖情况.结果 不同种属来源的动物血清对肿瘤细胞生长的影响作用各不相同.从总的趋势来看,牛血清更适宜人肿瘤细胞生长,小鼠血清适应性最差.且随着加入量的增加,大多数血清会对肿瘤细胞的生长产生负效应.结论 在肿瘤血清药理学试验中,为排除血清本身带给试验的干扰,应测定正常动物血清对肿瘤细胞增殖的影响,且血清添加量以小于20%为宜.

Abstract:目的 探讨已烯雌酚对免疫性卵巢早衰小鼠卵巢颗粒细胞和卵母细胞凋亡的影响.方法 以小鼠透明带3蛋白的第330～342个氨基酸的序列(NSSSSQFQIHGPR)合成透明带多肽并作免疫原,免疫SPF级BALB/c雌性小鼠.设对照、模型和已烯雌酚组.灌胃给药4周后,采用Tunel方法检测颗粒细胞与卵母细胞的细胞凋亡数并作统计学分析.结果 已烯雌酚组可显著减少小鼠卵巢卵母细胞的凋亡率(P < 0.05).结论 已烯雌酚组能改善免疫性卵巢早衰小鼠体重降低症状并能诱导发情.已烯雌酚能改善免疫性卵巢早衰小鼠症状的机制可能是由于能有效地抑制卵母细胞的凋亡所引起的.

Abstract:目的 研究食蟹猴血液学及血清生化指标日间节律性变化,为正确全面评估血液学及血清生化测定结果提供一定的实验事实依据.方法 在9:30(am)～10:30(am)、12:30(pm)～13:30(pm)、15:30(pm)～16:30(pm)及19:30(pm)～20:30(pm) 4个时间段对12只食蟹猴(雌雄各半)采血.采用全自动血细胞分析仪及血液生化分析仪分别测定血液学及血清生化指标.利用高效液相色谱(HPLC)方法分析血浆中皮质醇含量.结果 雌雄食蟹猴下午白细胞数(WBC)及尿素氮(BUN)显著升高;雌性食蟹猴下午血红蛋白(HGB)及血细胞压积(HCT)显著降低,天门冬氨酸氨基转换酶(AST)及丙氨酸氨基转换酶(ALT)活性显著升高;雄性食蟹猴下午血糖(GLU)及血浆皮质醇显著降低.结论 雌雄食蟹猴血液学及血清生化部分指标存在明显的日间节律性.

Abstract:目的 实验室评价乌梅酸枣仁提取物对鸡致病性大肠杆菌病的疗效.方法 根据前期研究自拟乌梅酸枣仁提取物配方,以体外试管二倍稀释法测定其最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC),建立鸡致病性大肠杆菌病模型,评价其预防和治疗鸡大肠杆菌病疗效.结果 体外试验显示其最小抑菌浓度为12.5 mg/mL;人工感染鸡大肠杆菌病模型显示预防试验中乌梅酸枣仁提取物高、中、低剂量组、利好对照组、感染对照组的成活率分别为50%、70%、50%、60%、10%;肝脏细菌检出率均为100%.治疗试验中上述各组成活率分别为62.5%、50%、37.5%、62.5%、25%;肝脏细菌检出率均为100%.结论 体外、体内试验结果表明,乌梅酸枣仁提取物能有效减少人工感染后的临床症状,保护率为50%～70%,推荐使用剂量为200 mg/kg体重,可以替代部分抗生素防治此病.

Abstract:目的 建立一种稳定可重复的大鼠急性心肌梗死动物模型.方法 SD大鼠经口气管插管,呼吸机辅助呼吸,开胸结扎冠脉左前降支.术后28 d行心脏超声,血流动力学及组织病理学检查.结果 大鼠术后存活率60%;手术组LVEF较假手术组显著降低(P＜0.01);与假手术组比,手术组的LVSP明显下降(P＜0.05),±dp/dt显著降低(P＜0.01),而LVEDP明显升高(P＜0.01);病理组织学检查可见瘢痕形成,纤维组织增生.结论 本文建立心肌梗死动物模型的方法操作简便、重复性好.

Abstract:目的 对实验动物皮肤病原真菌2种培养方法进行了比较.方法 将采集到的3只皮肤真菌感染病兔样品经由沙氏平皿法和沙氏试管斜面培养法分别进行培养.结果 在3只真菌感染病兔中应用试管斜面法我们只检测到1例皮肤病原真菌阳性,而采用沙氏平皿法3例阳性全部检出.结论 结合临床检测经验,我们认为本研究的沙氏平皿法优于沙氏试管斜面法,在实验动物皮肤病原真菌常规检测中具有推广应用价值.

Abstract:目的 建立滇南小耳猪精液冷冻保存方法,加速云南省特有小型猪种的小型化选育.方法 利用脉冲电刺激模式诱导公猪输精管自助收缩排精.利用直接冷冻新技术(DFM)研究不同冷冻方案对精子的运动度、精子顶体完整性和体内授精胚胎发育能力的影响.结果 在直接冷冻方法中,3%甘油防冻剂的作用下,60 s植冰时间和1.5 mm/s的冷冻降温参数对精子运动度保护良好,精子运动复苏率达到61.7%.但是,3%乙二醇虽然与甘油一样对精子的顶体完整性都有很好的保护作用,对精子运动度保护能力较差.此外, 3%甘油、60 s植冰、1.5 mm/s冷冻速度的直接冷冻的冻精解冻,移植到超数排卵的母猪子宫颈口实施人工授精,获得卵的受精和胚胎发育潜能尚可.结论 玻璃管直接冷冻可以完成滇南小耳猪精子的冷冻保存.

Abstract:目的 通过对猕猴结肠镜检及活检取材,对结肠镜检测方法应用于非人灵长类动物予以评价.方法 实验猴在麻醉状态下接受结肠镜检查和活检标本取材,对活检标本进行固定和病理切片观察,并对所检猴进行解剖和组织学观察,比较各取材点的情况.结果 结肠镜下及大体标本观察见猕猴肠壁厚度明显小于人体,活检取材部位见黏膜破损、肠出血,个别部位见肠穿孔.病理切片HE染色观察发现,与人体比较,猕猴大肠腺较小而表浅,固有层内淋巴小结数量较少,肌层、黏膜下层明显较薄.结论 对猕猴行结肠镜检查及镜下活检取材是可行的,但因猕猴肠壁较人体薄而极易穿孔,故需尽量应用活检杯小的活检钳,并需要充分的肠道准备和有经验的肠镜操作.

Abstract:基因的转录调控和转录后水平的调控在基因表达过程中起着重要作用.mRNA的结构与基因表达调控的关系非常密切.目前对于mRNA结构对表达的影响因素,主要集中于起始密码子和S-D序列的结构和间隔长度、基因和基因间的间隔区序列和长度,5'末端与3'末端非翻译区、多聚(A)尾、内含子序列对翻译起始效率、发夹结构对mRNA的稳定性的影响和mRNA翻译起始区等对基因表达影响.

Abstract:跑台在实验动物研究中的应用越来越多,主要集中在建立运动模型以及探究运动对生理和病理的作用,以促进运动训练的科学化、竞技体育成绩的提高、运动疗法在疾病康复中合理有效的应用等,同时也是研究运动与代谢,运动与心脑血管病等的研究工具.本文对动物跑台的基本构造、使用方法和研究进展进行了分析和总结,为利用跑台进行研究提供一定的参考.

Abstract:目的 探讨对当前实验猴养殖场广泛使用的饲料盘进行改进,减少饲料浪费.方法 在对实验猴采食习性进行观察的基础上,提出饲料盘改进办法,并对改进前后饲料浪费情况进行分析. 结果新型饲料盘饲料浪费量明显少于旧饲料盘,增大新型饲料盘面积,饲料浪费量也明显减少.结论 改进型饲料盘具有制作简单,容易清洁,大大减少饲料浪费等特点,值得在实验猴养殖场推广应用.