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2011, 21(3):1-5. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.001
摘要:小动物活体成像技术在国内外得到越来越多的普及应用,极大地促进了生命科学特别是肿瘤研究的发展。本文就小动物活体成像技术的原理、标记方法和实际应用做简单介绍。
2011, 21(3):6-9. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.002
摘要:目 的 通过金黄色葡萄球菌直接感染小鼠输卵管,建立炎症致不孕的动物模型。方 法 用1 × 109 / mL的金黄色葡萄球菌接种小鼠,制作慢性输卵管炎症模型,观察输卵管病理炎性改变以及小鼠的受孕情况。结果 造模术 75 d 后,模型组小鼠受孕率、输卵管通畅率显著低于对照组( P < 0. 001)。模型组肉眼观察输卵管有不同程度积水积脓、僵硬,输卵管与周围组织均有不同程度的粘连;病理学观察输卵管管腔被异物肉芽组织完全阻塞,全层均见大量慢性炎细胞浸润。结论 输卵管内接种浓度 1 × 109 / mL 的金黄色葡萄球菌可以成功建立小鼠输卵管炎性不孕模型。
2011, 21(3):10-13+0+2+79. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.003
摘要:目的 利用荧光素酶基因标记的人肝癌细胞株 BEL-7402 建立裸鼠肝原位移植模型,及 小 鼠 肝 原 位移植模型的生物发光和小动物 PET-CT 成像的比较。方法 构建表达荧光素酶基因的真核表达载体并将其转入人肝癌细胞 BEL-7402,经梯度浓度 G418 筛选获得稳定表达荧光素酶基因的细胞克隆并扩大培养。BALB / cA-nu 裸鼠肝门静脉接种 5 × 105 个发光细胞使其成瘤,活体荧光成像和小动物 PET-CT 成像系统观察肿瘤的生长情况。结果 获得了稳定表达 Luc 的人肝癌细胞 株,将其接种到裸鼠体内,活体荧光成像系统观察发现能够成瘤,小 动 物PET-CT 影像观察发现小鼠肝脏边缘对18F-FDG 有高摄取区域。结论 利用荧光素酶基因标记的人肝癌细胞 BEL-7402 成功建立了原位肝癌裸鼠模型,小动物活体成像结合小动物 PET-CT 技术为原位肿瘤模型的建立提供了一种新的可靠的技术,为进一步研究肝癌生长转移机制和药物开发提供了新的有用工具。
2011, 21(3):14-17+84. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.004
摘要:目的 研究温 敏 型 壳 聚 糖( chitonsan CS) 介 入 核 素188 Re 内照射对小鼠移植性肝癌( H22 ) 的 抑 制 作用。方法 建立小鼠肝癌( H22 )模型后随机分成 7 组,即模型对照组、188Re(0. 1mCi)组、188Re-S(0. 1mCi)组、188Re +CS(0. 1mCi)组、188Re + CS(0. 2mCi)组、188 Re + 硫 胶 体 + 壳 聚 糖( 188 Re-S + CS 0. 1mCi) 组 和188Re-S + CS(0. 2mCi)组。各组动物瘤内分别注射相应试药,测定肿瘤抑制率。结果 188Re + CS 组和188Re-S + CS 组肿瘤生长速度减慢,肿瘤生长延迟,肿瘤抑制率 在 治 疗 后 6 d 最 高,抑 制 率 分 别 为 67. 35% 和 67. 81% 。结 论 温敏型壳聚糖介入核素188Re 内照射对小鼠肝癌( H22 )具有一定的抑制作用。
2011, 21(3):18-21+83. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.005
摘要:目的 建立一种稳定的大鼠原位肾移植慢性排斥反应模型。方法 供体 为 近 交 系 F344 大 鼠,受 体为 Lewis 大鼠,供肾采用左肾,在体修整,原位灌注。肾静脉用硬膜外导管做为临时内支架管端-端、六针法吻合,腹主动脉端-侧连续缝合,输尿管带膀胱瓣与膀胱吻合。受体术前 3 d 开始环孢素 A 灌胃至术后 30 d(5 mg / kg·d) ,以预防急性排斥反应。结果 手术时间 120 ~ 180 min;手术成功率 90. 9% (40P44) ;受体均存活 60 d。并发症有吻合口出血、静脉血栓形成、急性排斥反应等。结论 供肾原位灌注,在体修整是简单可靠的方法。静脉內支架管端端吻合,腹主动脉端侧吻合能够达到稳定的成功率,值得 推 广。熟练的外科操作技能和血管吻合技术是手术成功的关键。
2011, 21(3):22-26. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.006
摘要:目的 通过检测愤怒情绪模型大鼠顶区皮质和海马 γ 氨基丁酸 B2 受体( GABABR2) 表达的变化,探索愤怒情绪与 GABABR2 的关系,以及中药经前平颗粒的干预机制。方法 采用居住入侵的方法复制愤怒情绪模型大鼠,然后用 RT-PCR 和 Western Blot 的方法检 测 GABABR2 mRNA 和蛋白的表达差异。结 果 与 正 常 组 相 比,模型组大鼠 GABABR2 mRNA 和蛋白的表达都明显降低;与模型组相比,经前平给药 组 大 鼠 GABABR2 mRNA 和 蛋白的表达都显著升高。结论 大鼠顶区皮质和海马 GABABR2 表达降低可能是影响大鼠愤怒情绪的重要机制之一;中药经前平颗粒可对 GABABR2 表达异常变化起到调节作用。
2011, 21(3):27-30+35+85. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.007
摘要:目的 比较鸡胚尿囊膜试验( HET-CAM) 作为一种眼刺激替代方法对产品或原料的评价。方 法采用 HET-CAM 和兔眼 Draize 试验方法,对 19 种原料和 23 种化妆品及家用洗涤产品眼刺激性进行检测,对体内体外试验的结果进行统计比较。结果 比较体内体外试验,原料和产品的 kappa 系数分别为 0. 826,0. 531;灵敏度分别为 100% ,81. 8% ;特异度分别为 85. 7% ,77. 8% 。结论 HET-CAM 可作为 Draize 试验的替代试验,HET-CAM 系统更适合对单纯化学品原料进行眼刺激试验。
2011, 21(3):31-35+86. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.008
摘要:目的 阐明性成熟前食蟹猴生精细胞的发育进程。方 法 分别采集性成熟前不同年龄(0 岁、0. 5岁、1 岁、1. 5 岁、2 岁、2. 5 岁、3 岁、3. 5 岁、4 岁)食蟹猴睾丸,制作石蜡切片,进行 HE 染 色 和 PAS /H 染 色。根 据 生精细胞的染色特性,分析性成熟前食蟹猴生精细胞的发育进程,并对食蟹猴精原干细胞进行初步鉴定。结果 HE染色结果显示,1 岁及以下食蟹猴生精上皮上生精细胞仅有精原干细胞( 包括 Ad、At 及 Ap 型精原细胞) ,1. 5 岁食蟹猴生精上皮上开始出现 B 型精原细胞,3 岁食蟹猴生精上皮上出现精母细胞,4 岁食蟹猴生精上皮上出现从精原干细胞到精子的所有生殖细胞。PAS /H 染色结果显示,1 ~ 2. 5 岁食蟹猴 Ad 型精原细胞胞质呈 PAS 阳性,At 型精原细胞胞质呈 PAS 弱阳性,Ap 型精原细胞胞质呈 PAS 阴性;其他生精细胞及支持细胞胞质呈阴性;0. 5 岁及以下,3 岁及以上食蟹猴生精细胞的胞质 PAS /H 染色特性与前者存在差异。结论 本文详细阐述了性成熟前食蟹猴生精细胞随年龄增长的渐次性发育模式,并建立了性成熟前食蟹猴精原干细胞原位鉴定的一种新方法,这 些 研 究 结果为食蟹猴精原干细胞的其他相关研究奠定了基础。
2011, 21(3):36-38. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.009
摘要:目的 建立一组家兔肝纤维化动物模型,并总结建模过程中所得到的经验。方 法 选 用 30 只 普 通级家兔,随机选取 2 ~ 4 只家兔作为实验组,5 只为对照组。饲养适应 1 周后,四氯化碳色拉油溶液以 5% 的起始浓度经腹腔注射法注入实验组家兔体内,对照组给予相同剂量的生理盐水。于造模 4W、7W、10W、13W、16W 末 分 别处死 24 只实验组及 1 只对照组家兔,以观察肝纤维化的发展程度。结果 造模期间实验组家兔死亡 7 只,对照组家兔无死亡。家兔肝脏纤维化程度随着造模时间延长而逐渐加重。结 论 此方法成功地建立了一种兔肝纤维化动物模型。
2011, 21(3):39-42+85. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.010
摘要:目的 探讨内毒素致急性肺损伤 ( ALI) 大鼠肺组织核转录因子-κB( NF-κB)、基质金属蛋白酶 2(MMP-2)及其抑制因子( TIMP-2)蛋白和 mRNA 表达的变化。方法 20 只雄性 Wistar 大鼠随机分为 2 组:对照组、LPS 模型组,每组再分为 4 h 和 8 h 两个亚组。尾静脉注射脂多糖( LPS) (10 mg / kg)建立大鼠急性肺损伤模型。检测血白细胞计数、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量,采用免疫组化 ABC 法和实时荧光定量 PCR 分 别 测 定 肺 组织 NF-κB、MMP-2、TIMP-2 蛋白及其 mRNA 的表达,并观察肺组织病理变化。结 果 与 对 照 组 相 比,模 型 组 4 h 和8 h时大鼠肺组织中的 NF-κB、MMP-2 蛋白染色阳性面积率及其 mRNA 表达均显著增高(P < 0. 01)、TIMP-2 蛋白染色阳性面积率及其 mRNA 表达均明显降低(P < 0. 05 或 P < 0. 01)。病理学观察显示,模型组大鼠肺组织出现出血及坏死。结论 内毒素致急性肺损伤的发病机制可能与 NF-κB、MMP-2 蛋白及其 mRNA 表达升高、TIMP-2 蛋白及其 mRNA 表达降低有关。
2011, 21(3):43-48. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.011
摘要:脑梗塞发病率逐年增高,它严重影响了患者的生活质量。临床上,神经功能损伤评分是诊断和疗效评价的重要指标。在临床前研究中,神经功能损伤评分也越来越受到重视,是判断药效的最重要指标之一。本 文介绍了评价神经功能损伤的几种常见试验和评分标准,并认为在中医药治疗脑梗塞临床前研究中,应 更 加 重 视 神经功能评分,充分体现中医药的优势。
2011, 21(3):49-51+88. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.012
摘要:目的 建立大鼠持续性肠内营养的输注模型和淋巴液引流的方法。方法 大鼠行胃造口后游离硅胶管至背部,通过 swivel 管连接到微量输液泵。5 d 持续匀速的输入肠内营养后开腹并游离肠淋巴干,大鼠在肠道缺血 60 min 再灌注 120 min 同时潜行插入硅胶管收集淋巴液。结 果 第一次胃造口术后大鼠持续肠内营养输注通畅,未出现死亡或并发症状。第二次手术时通过较简单的方法可以获取淋巴液,成功率较高,可达 90% 以上。结论大鼠持续肠内营养输注模型的建立,为研究营养物质的作用搭建了一个平台;通过较简单的方法获取淋巴液可以为研究淋巴液的成分提供便利。
2011, 21(3):52-55. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.013
摘要:目的 设计一种大鼠长期腰蛛网膜下腔置管模型中微导管体外端的保护装置,并证明其有效性。方法 24 只清洁级 SD 大鼠分为对照组(n = 12)和应用装置组(n = 12),术前 1 d 和术后第 1、3、7 天行转棒和热水甩尾试验,检查置入装置对大鼠运动及感觉神经功能影响情况。计数术后大鼠导管保留情况,利多卡因试验证实导管性能。结果 本次试验两组大鼠术后均无死亡及明显瘫痪情况;术前及术后 1,3,7 d 转棒实验及热水甩尾实验均未见两组明显差异(P > 0. 05,独立样本 T 检验,);对照组体外导管末端在术后几天内被损毁或拔出无法进行进一步实验,术后第 7 天应用装置组所有导管末端仍保持完整,利多卡因实验显示导管功能良好(P > 0. 05,χ2检验)。结论 该装置可有效保护置入大鼠腰蛛网膜下腔导管的体外端,非常适用于需要长期反复腰蛛网膜下腔注射的研究。
2011, 21(3):56-58. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.014
摘要:目的 为进行某些特殊项目的实验研究,建立一种持续麻醉实验动物模型。方法 戊巴比妥钠粉剂加生理盐水溶解,配成 1% 水剂,按 3 mL / kg(30 mg / kg)耳缘静脉注射。诱导成功后约 2 h 经留置针使用恒速微量泵 1 mL / h·kg 给药,维持 4 h 后调节至 2 mL / h·kg 给药,并长期维持。每日上午、下午各停止静脉给药 1 h,为动物饲食水。结果 经实验证明家兔可耐受 120 h 连续麻醉。实验动物耐 受 情 况 好,家兔麻醉前呼吸 48 ~ 68 次 /min,心跳 140 ~ 200 次 /min,体温为 39. 4℃ ± 1. 0℃ 。以 3 ~ 6 mg /s 速度,成年兔的正常耳缘静脉注射后,平 均 3 + 2. 8 s实验动物呈三度麻醉状态,无自主运动,未见兴奋躁动过程,呼吸 24 ± 6. 6 次 / min。死亡率 12. 5% 。持续麻醉期间动物二便正常。结论 长期持续麻醉的效果要求是以避免动物挣扎的镇静为主,戊巴比妥适合于建立长期麻醉实验动物模型。该方法在爆炸伤和创面愈合等实验实际应用中效果理想。
2011, 21(3):59-61. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.015
摘要:含胱冬肽酶富集功能域的凋亡抑制因子( apoptosis repressor with CARD,ARC) 蛋白是 20 世纪末发现的在心肌、骨骼肌和大脑等终末分化组织中大量表达的抗凋亡蛋白。ARC 的主要功能是抗凋亡作用。由于其在心脏中表达的特异性和抗凋亡的多层次性,使 ARC 在心脏中的作用成为近年来研究的热点。本文主要对其抗凋亡途径以及近年来在心肌病中的研究进展两方面进行综述。
2011, 21(3):62-66. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.016
摘要:寡核苷酸包括反义核酸和干扰 RNA 等,它们能够为多种疾病提供快速、特 异 性 的 治 疗,具 有 很 高 的应用潜力。然而这些分子能否有效地传递到特定的细胞和组织对于最终的临床应用非常关键。靶向性的传递能够提高寡核苷酸药物的特异性和使用效率,使药物分子能有效到达作用位点,进而发挥它们的治疗效果。一 些 基于不同平台的靶向性配体传递策略已经形成,并能够很好的发挥其生物学活性。本文针对当前该研究领域的进展提供一个概述。
2011, 21(3):67-71. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.017
摘要:精子冷冻是辅助生殖技术的基础,能够有效的保存有价值的基因资源。文章回顾了近些年来国内外精子冷冻保存的重要研究成果,分析了精子的来源、冷 冻 预 处 理、冷冻和解冻方法、防冻剂的选择及其加入去除方式的选择等因素对精子冷冻效果的影响。文章还总结了精子冷冻效果的评价方法,展望精子冷冻技术的发展方向和应用前景。
2011, 21(3):72-74+78. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.018
摘要:实验动物学是生命科学研究的基础和支撑条件之一。在医学院校实验动物学的教学中,应以实验动物与动物实验标准化为中心,增加和完善动物模型、分 子 遗 传、胚胎工程及转基因动物等理论内容,紧 跟 生 命 科 学的发展趋势;同时注重理论教学与实验教学的相互结 合,充分利用现代先进的教育技术,以 基 本 实 验、综 合 实 验 和自主设计实验培养学生的操作能力和创新思维。这些改革措施将对改进实验动物学的教学质量,提高医学院学生的科研水平有重要意义。
2011, 21(3):75-78. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.03.019
摘要:本文结合作者参加医学实验动物专业英语教学和在美国访问学习经历,介绍了几种在专业英语教学中强化学生综合运用语言能力的方法,希望能够起到抛砖引玉的作用,为促进学生掌握该专业英语语言特点,提高学习效率和实际应用能力提供有益的参考。